| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 引言 | 第13-18页 |
| 1.1 肌肉生成概述 | 第13-14页 |
| 1.1.1 胚胎骨骼肌的发生 | 第13-14页 |
| 1.1.2 成体骨骼肌的发育 | 第14页 |
| 1.2 MRFs家族研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.1 MRFs家族及结构特征 | 第14页 |
| 1.2.2 MRFs家族表达模式 | 第14-15页 |
| 1.3 MyoG及Myf6基因的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.3.1 MyoG及Myf6基因的结构及定位 | 第15页 |
| 1.3.2 MyoG基因的功能 | 第15-16页 |
| 1.3.3 Myf6基因的功能 | 第16页 |
| 1.4 转基因技术的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-33页 |
| 2.1 真核表达载体的构建 | 第18-23页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第19-23页 |
| 2.2 MyoG转基因小鼠和Myf6转基因小鼠的制备 | 第23-24页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第23-24页 |
| 2.3 MyoG转基因小鼠和Myf6转基因小鼠的鉴定 | 第24-26页 |
| 2.3.1 实验材料 | 第24页 |
| 2.3.2 实验方法 | 第24-26页 |
| 2.4 Real-time RCR检测外源基因的表达变化 | 第26-27页 |
| 2.4.1 主要试剂 | 第26页 |
| 2.4.2 主要仪器 | 第26页 |
| 2.4.3 实验方法 | 第26-27页 |
| 2.5 Western blot检测蛋白表达 | 第27-29页 |
| 2.5.1 实验材料 | 第27-28页 |
| 2.5.2 实验试剂 | 第28页 |
| 2.5.3 主要实验仪器 | 第28页 |
| 2.5.4 实验方法 | 第28-29页 |
| 2.6 绝对定量PCR技术检测外源基因的拷贝数 | 第29-30页 |
| 2.6.1 试剂盒及其他试剂 | 第29页 |
| 2.6.2 主要仪器 | 第29页 |
| 2.6.3 实验方法 | 第29-30页 |
| 2.7 转基因小鼠体重测量 | 第30-31页 |
| 2.7.1 实验动物 | 第30页 |
| 2.7.2 主要仪器 | 第30页 |
| 2.7.3 实验方法 | 第30-31页 |
| 2.8 MyoG转基因小鼠和Myf6转基因小鼠组织学分析 | 第31-33页 |
| 2.8.1 实验材料 | 第31页 |
| 2.8.2 实验试剂 | 第31页 |
| 2.8.3 主要仪器 | 第31页 |
| 2.8.4 实验方法 | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-47页 |
| 3.1 真核表达载体pL452-373-MogG构建结果 | 第33页 |
| 3.2 转基因小鼠制备结果 | 第33-34页 |
| 3.3 转基因小鼠鉴定结果 | 第34-36页 |
| 3.3.1 转MyoG基因小鼠鉴定结果 | 第34页 |
| 3.3.2 PCR法对MyoG鼠子代的鉴定 | 第34-35页 |
| 3.3.3 转Myf6基因小鼠鉴定结果 | 第35页 |
| 3.3.4 PCR法对Myf6鼠子代的鉴定 | 第35-36页 |
| 3.4 Real-time PCR检测外源基因表达 | 第36-37页 |
| 3.5 Western blot检测蛋白表达结果 | 第37-39页 |
| 3.5.1 转MyoG基因鼠的蛋白检测结果 | 第37-38页 |
| 3.5.2 转Myf6基因鼠的蛋白检测结果 | 第38-39页 |
| 3.6 外源基因拷贝数检测结果 | 第39-41页 |
| 3.6.1 标准曲线的建立 | 第39-40页 |
| 3.6.2 Real-time PCR检测拷贝数结果 | 第40-41页 |
| 3.7 转基因鼠体重检测结果 | 第41-42页 |
| 3.8 肌纤维直径和数目统计结果 | 第42-47页 |
| 3.8.1 转MyoG基因鼠肌纤维组织学分析结果 | 第42-44页 |
| 3.8.2 转Myf6基因鼠肌纤维组织学分析结果 | 第44-47页 |
| 4 讨论 | 第47-50页 |
| 4.1 载体选择 | 第47页 |
| 4.2 外源基因拷贝数的检测 | 第47页 |
| 4.3 外源基因的插入量对小鼠发育的影响 | 第47-48页 |
| 4.4 MyoG基因对快肌、慢肌作用 | 第48页 |
| 4.5 关于外源基因的稳定遗传 | 第48-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第56页 |
