| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11页 |
| 第一章 前言 | 第12-18页 |
| 1.1 菊花遗传转化体系的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 转化方法的研究 | 第12页 |
| 1.1.2 抗生素对菊花转化效率的影响 | 第12-13页 |
| 1.1.3 不同菌株对菊花转化效率的影响 | 第13页 |
| 1.1.4 玻璃化现象对转化效率的影响 | 第13页 |
| 1.1.5 其他因素对转化效率的影响 | 第13-14页 |
| 1.2 DREB转基因研究进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 DREB基因对非生物胁迫的应答 | 第15-17页 |
| 1.2.2 DREB基因参与生物胁迫响应的可能性 | 第17页 |
| 1.3 本研究的目的与意义 | 第17-18页 |
| 第二章 农杆菌介导遗传转化体系的优化 | 第18-27页 |
| 2.1 试验材料 | 第18-19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 农杆菌菌株及载体 | 第18页 |
| 2.1.3 试验试剂 | 第18页 |
| 2.1.4 试验仪器 | 第18页 |
| 2.1.5 培养基制备与培养条件 | 第18-19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-21页 |
| 2.2.1 不同着生部位对菊花叶片再生能力的影响 | 第19页 |
| 2.2.2 卡那霉素浓度的筛选 | 第19页 |
| 2.2.3 农杆菌侵染液的制备 | 第19页 |
| 2.2.4 头孢霉素浓度的筛选 | 第19页 |
| 2.2.5 预培养时间的筛选 | 第19-20页 |
| 2.2.6 农杆菌浓度、稀释倍数及侵染时间的确定 | 第20页 |
| 2.2.7 共培养时间的筛选 | 第20页 |
| 2.2.8 延迟培养时间的筛选 | 第20页 |
| 2.2.9 筛选培养 | 第20页 |
| 2.2.10 抗性植株的获得 | 第20页 |
| 2.2.11 菊花基因组DNA的提取 | 第20页 |
| 2.2.12 lPCR检测 | 第20-21页 |
| 2.3 结果与分析 | 第21-27页 |
| 2.3.1 不同着生部位对菊花叶片再生能力的影响 | 第21页 |
| 2.3.2 卡那霉素浓度对菊花叶片不定芽分化及生根的影响 | 第21-23页 |
| 2.3.3 头孢霉素对农杆菌生长及叶片再生能力的影响 | 第23页 |
| 2.3.4 预培养时间对转化效率的影响 | 第23-24页 |
| 2.3.5 农杆菌浓度、稀释倍数及侵染时间的确定 | 第24页 |
| 2.3.6 共培养时间对转化效率的影响 | 第24-25页 |
| 2.3.7 延迟培养时间对转化效率的影响 | 第25页 |
| 2.3.8 抗性植株的检测 | 第25-27页 |
| 第三章 CmDREBa-2基因功能验证 | 第27-34页 |
| 3.1 试验材料 | 第27页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第27页 |
| 3.1.2 试验试剂 | 第27页 |
| 3.1.3 试验器材 | 第27页 |
| 3.2 试验方法 | 第27-30页 |
| 3.2.1 抗性苗的继代、扩繁和炼苗 | 第27页 |
| 3.2.2 自然失水胁迫处理 | 第27页 |
| 3.2.3 叶片相对自然饱和亏缺测定 | 第27-28页 |
| 3.2.4 形态萎蔫指数测定 | 第28页 |
| 3.2.5 离体叶片失水速率 | 第28页 |
| 3.2.6 植物材料的接菌处理 | 第28页 |
| 3.2.7 引物设计 | 第28页 |
| 3.2.8 植物总RNA的提取 | 第28-29页 |
| 3.2.9 反转录cDNA第一链的合成 | 第29-30页 |
| 3.2.10 实时荧光定量PCR | 第30页 |
| 3.3 结果与分析 | 第30-34页 |
| 3.3.1 水分胁迫对转CmDREBa-2基因株系叶片相对水分饱和亏缺的影响 | 第30-31页 |
| 3.3.2 形态萎蔫指数分析 | 第31-32页 |
| 3.3.3 水分胁迫对转CmDREBa-2基因株系叶片失水速率的影响 | 第32页 |
| 3.3.4 CmDREBa-2基因受菊花白色锈病诱导表达特异性分析 | 第32-34页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第34-39页 |
| 4.1 结论 | 第34页 |
| 4.2 讨论 | 第34-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 附录 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 攻读学位论文期间发表文章 | 第45-46页 |
