符号说明 | 第5-9页 |
中文摘要 | 第9-12页 |
Abstract | 第12-14页 |
1 前言 | 第15-34页 |
1.1 光信号转导 | 第15-16页 |
1.2 光信号转导蛋白FHY3和FAR | 第16-21页 |
1.2.1 起源于转座酶的新型转录因子FHY3和FAR | 第16-17页 |
1.2.2 FHY3/FAR1对植物生长发育的作用 | 第17-21页 |
1.3 淀粉 | 第21-26页 |
1.3.1 淀粉的组成及结构 | 第21-22页 |
1.3.2 淀粉的合成与降解 | 第22-25页 |
1.3.3 淀粉去分支酶DBEs功能研究 | 第25-26页 |
1.4 植物能量代谢 | 第26-33页 |
1.4.1 植物糖信号转导和能量响应 | 第26-31页 |
1.4.2 植物能量匮乏和细胞自体吞噬 | 第31-33页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
2 材料与方法 | 第34-49页 |
2.1 实验材料 | 第34-37页 |
2.1.1 植物材料 | 第34页 |
2.1.2 载体 | 第34页 |
2.1.3 菌株 | 第34页 |
2.1.4 酶与各种生化试剂 | 第34-35页 |
2.1.5 PCR引物 | 第35-37页 |
2.2 实验方法 | 第37-49页 |
2.2.1 溶液与培养基 | 第37-38页 |
2.2.2 植物总RNA提取与qRT-PCR | 第38页 |
2.2.3 农杆菌浸泡法转化拟南芥 | 第38-40页 |
2.2.4 酵母单杂交 | 第40-41页 |
2.2.5 淀粉及可溶性多糖含量检测 | 第41-42页 |
2.2.6 透射电镜 | 第42-43页 |
2.2.7 淀粉碘染色 | 第43-44页 |
2.2.8 植物总蛋白提取 | 第44页 |
2.2.9 Western-blot | 第44-45页 |
2.2.10 染色体免疫共沉淀技术(ChIP) | 第45-49页 |
3 结果与分析 | 第49-88页 |
3.1 光信号蛋白FHY3调控淀粉代谢的分子机理研究 | 第49-66页 |
3.1.1 光信号转导途径蛋白相关突变体淀粉碘染色分析 | 第49-50页 |
3.1.2 光信号蛋白FHY3和FAR1相关突变体淀粉碘染色分析 | 第50-51页 |
3.1.3 光信号蛋白FHY3和FAR1淀粉及可溶性多糖含量分析 | 第51-53页 |
3.1.4 fhy3以及fhy3far1突变体淀粉粒形态分析 | 第53-55页 |
3.1.5 fhy3以及fhy3far1突变体淀粉代谢相关基因表达量分析 | 第55-56页 |
3.1.6 光信号蛋白FHY3/FAR1结合ISA2启动子分析 | 第56-58页 |
3.1.7 光信号蛋白FHY3/FAR1对ISA2基因表达量调控作用分析 | 第58-59页 |
3.1.8 淀粉去分支酶ISA2对fhy3far1双突变体的作用 | 第59-61页 |
3.1.9 外源糖对FHY3/FAR1功能缺失突变体中淀粉含量的影响 | 第61-64页 |
3.1.10 糖信号对淀粉去分支酶ISA基因表达的影响 | 第64-66页 |
3.1.11 FHY3/FAR1对糖调控的ISA2/3基因表达的影响 | 第66页 |
3.2 光信号蛋白FHY3响应能量饥饿的表型及机理探究 | 第66-88页 |
3.2.1 FHY3功能缺失突变体延长黑暗转光下表型分析 | 第66-68页 |
3.2.2 暗光转变中,fhy3far1双突变体中ROS相关标志基因表达量分析 | 第68-70页 |
3.2.3 暗光转变中,fhy3far1双突变体中光合系统蛋白表达分析 | 第70-71页 |
3.2.4 暗光转变中,fhy3far1双突变体中叶绿体类囊体膜蛋白表型分析 | 第71-73页 |
3.2.5 FHY3功能缺失突变体自吞噬相关表型分析 | 第73-75页 |
3.2.6 FHY3功能缺失突变体饥饿相关基因转录水平分析 | 第75-77页 |
3.2.6.1 FHY3功能缺失突变体饥饿相关标志基因表达量分析 | 第75页 |
3.2.6.2 FHY3功能缺失突变体中饥饿相关标志基因GUS染色分析 | 第75-77页 |
3.2.7 FHY3功能缺失突变体碳饥饿处理表型分析 | 第77-78页 |
3.2.8 FHY3功能缺失突变体氮饥饿处理表型分析 | 第78-79页 |
3.2.9 外源施加糖处理对fhy3far1双突变体的细胞死亡表型分析 | 第79-81页 |
3.2.10 光信号蛋白FHY3与能量代谢相关激酶KIN10功能比对分析 | 第81-83页 |
3.2.11 FHY3对KIN10诱导下游基因的结合区域分析 | 第83-84页 |
3.2.12 光信号蛋白FHY3与逆境胁迫整合子KIN10功能机理分析 | 第84-88页 |
3.2.12.1 FHY3与KIN10蛋白相互作用分析 | 第84-85页 |
3.2.12.2 FHY3对KIN10蛋白转录激活作用分析 | 第85-86页 |
3.2.12.3 KIN10对FHY3蛋白转录激活作用分析 | 第86-88页 |
4 讨论 | 第88-95页 |
4.1 转录因子FHY3对植物体内淀粉合成代谢的影响 | 第88-89页 |
4.2 转录因子FHY3调控植物体内淀粉合成代谢的机理研究 | 第89-90页 |
4.3 光信号和糖信号对ISA2转录水平调控及淀粉合成的影响 | 第90-92页 |
4.4 转录因子FHY3在植物能量饥饿响应过程中的作用 | 第92-93页 |
4.5 昼夜交替转变对植物生长发育的影响 | 第93-95页 |
5 结论 | 第95-96页 |
参考文献 | 第96-101页 |
致谢 | 第101-102页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第102页 |