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拟南芥光信号蛋白FHY3/FAR1调控淀粉合成及能量饥饿响应功能分析

符号说明第5-9页
中文摘要第9-12页
Abstract第12-14页
1 前言第15-34页
    1.1 光信号转导第15-16页
    1.2 光信号转导蛋白FHY3和FAR第16-21页
        1.2.1 起源于转座酶的新型转录因子FHY3和FAR第16-17页
        1.2.2 FHY3/FAR1对植物生长发育的作用第17-21页
    1.3 淀粉第21-26页
        1.3.1 淀粉的组成及结构第21-22页
        1.3.2 淀粉的合成与降解第22-25页
        1.3.3 淀粉去分支酶DBEs功能研究第25-26页
    1.4 植物能量代谢第26-33页
        1.4.1 植物糖信号转导和能量响应第26-31页
        1.4.2 植物能量匮乏和细胞自体吞噬第31-33页
    1.5 本研究的目的和意义第33-34页
2 材料与方法第34-49页
    2.1 实验材料第34-37页
        2.1.1 植物材料第34页
        2.1.2 载体第34页
        2.1.3 菌株第34页
        2.1.4 酶与各种生化试剂第34-35页
        2.1.5 PCR引物第35-37页
    2.2 实验方法第37-49页
        2.2.1 溶液与培养基第37-38页
        2.2.2 植物总RNA提取与qRT-PCR第38页
        2.2.3 农杆菌浸泡法转化拟南芥第38-40页
        2.2.4 酵母单杂交第40-41页
        2.2.5 淀粉及可溶性多糖含量检测第41-42页
        2.2.6 透射电镜第42-43页
        2.2.7 淀粉碘染色第43-44页
        2.2.8 植物总蛋白提取第44页
        2.2.9 Western-blot第44-45页
        2.2.10 染色体免疫共沉淀技术(ChIP)第45-49页
3 结果与分析第49-88页
    3.1 光信号蛋白FHY3调控淀粉代谢的分子机理研究第49-66页
        3.1.1 光信号转导途径蛋白相关突变体淀粉碘染色分析第49-50页
        3.1.2 光信号蛋白FHY3和FAR1相关突变体淀粉碘染色分析第50-51页
        3.1.3 光信号蛋白FHY3和FAR1淀粉及可溶性多糖含量分析第51-53页
        3.1.4 fhy3以及fhy3far1突变体淀粉粒形态分析第53-55页
        3.1.5 fhy3以及fhy3far1突变体淀粉代谢相关基因表达量分析第55-56页
        3.1.6 光信号蛋白FHY3/FAR1结合ISA2启动子分析第56-58页
        3.1.7 光信号蛋白FHY3/FAR1对ISA2基因表达量调控作用分析第58-59页
        3.1.8 淀粉去分支酶ISA2对fhy3far1双突变体的作用第59-61页
        3.1.9 外源糖对FHY3/FAR1功能缺失突变体中淀粉含量的影响第61-64页
        3.1.10 糖信号对淀粉去分支酶ISA基因表达的影响第64-66页
        3.1.11 FHY3/FAR1对糖调控的ISA2/3基因表达的影响第66页
    3.2 光信号蛋白FHY3响应能量饥饿的表型及机理探究第66-88页
        3.2.1 FHY3功能缺失突变体延长黑暗转光下表型分析第66-68页
        3.2.2 暗光转变中,fhy3far1双突变体中ROS相关标志基因表达量分析第68-70页
        3.2.3 暗光转变中,fhy3far1双突变体中光合系统蛋白表达分析第70-71页
        3.2.4 暗光转变中,fhy3far1双突变体中叶绿体类囊体膜蛋白表型分析第71-73页
        3.2.5 FHY3功能缺失突变体自吞噬相关表型分析第73-75页
        3.2.6 FHY3功能缺失突变体饥饿相关基因转录水平分析第75-77页
            3.2.6.1 FHY3功能缺失突变体饥饿相关标志基因表达量分析第75页
            3.2.6.2 FHY3功能缺失突变体中饥饿相关标志基因GUS染色分析第75-77页
        3.2.7 FHY3功能缺失突变体碳饥饿处理表型分析第77-78页
        3.2.8 FHY3功能缺失突变体氮饥饿处理表型分析第78-79页
        3.2.9 外源施加糖处理对fhy3far1双突变体的细胞死亡表型分析第79-81页
        3.2.10 光信号蛋白FHY3与能量代谢相关激酶KIN10功能比对分析第81-83页
        3.2.11 FHY3对KIN10诱导下游基因的结合区域分析第83-84页
        3.2.12 光信号蛋白FHY3与逆境胁迫整合子KIN10功能机理分析第84-88页
            3.2.12.1 FHY3与KIN10蛋白相互作用分析第84-85页
            3.2.12.2 FHY3对KIN10蛋白转录激活作用分析第85-86页
            3.2.12.3 KIN10对FHY3蛋白转录激活作用分析第86-88页
4 讨论第88-95页
    4.1 转录因子FHY3对植物体内淀粉合成代谢的影响第88-89页
    4.2 转录因子FHY3调控植物体内淀粉合成代谢的机理研究第89-90页
    4.3 光信号和糖信号对ISA2转录水平调控及淀粉合成的影响第90-92页
    4.4 转录因子FHY3在植物能量饥饿响应过程中的作用第92-93页
    4.5 昼夜交替转变对植物生长发育的影响第93-95页
5 结论第95-96页
参考文献第96-101页
致谢第101-102页
攻读学位期间发表论文情况第102页

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