摘要 | 第3-4页 |
ABSTRCT | 第4页 |
目录 | 第5-7页 |
1 引言 | 第7-13页 |
1.1 化学诱导表达系统 | 第7-8页 |
1.1.1 理想的诱导表达系统应满足的要求 | 第7-8页 |
1.1.2 化学诱导表达体系的构建模式 | 第8页 |
1.2 激活类诱导系统 | 第8-9页 |
1.2.1 糖皮质激素诱导系统 | 第8-9页 |
1.2.2 其他激活诱导系统 | 第9页 |
1.3 化学诱导系统的应用 | 第9-13页 |
1.3.1 启动关闭转入基因的过表达 | 第9-10页 |
1.3.2 外源毒害基因的表达 | 第10页 |
1.3.3 激活复杂生命过程中低表达的内源基因 | 第10页 |
1.3.4 关于RNA 沉默机理与应用的研究 | 第10-11页 |
1.3.5 基因的定位表达 | 第11页 |
1.3.6 转录单元间转录干扰的研究 | 第11页 |
1.3.7 无标记转基因体系的建立 | 第11页 |
1.3.8 高水平扩增mRNA 系统的构建 | 第11-13页 |
2 材料与方法 | 第13-23页 |
2.1 材料 | 第13-15页 |
2.1.1 植物材料 | 第13页 |
2.1.2 质粒和菌种 | 第13页 |
2.1.3 化学试剂 | 第13页 |
2.1.4 PCR 引物 | 第13-14页 |
2.1.5 培养基 | 第14-15页 |
2.2 实验方法 | 第15-23页 |
2.2.1 植物表达载体的构建 | 第15-19页 |
2.2.2 农杆菌介导的烟草转化 | 第19-20页 |
2.2.3 植物基因组DNA 的分离 | 第20页 |
2.2.4 再生植株的PCR 检测 | 第20-21页 |
2.2.5 总RNA 的分离 | 第21页 |
2.2.6 RT-PCR | 第21页 |
2.2.7 糖皮质激素的处理 | 第21-22页 |
2.2.8 绿色荧光蛋白的诱导表达 | 第22-23页 |
3 结果 | 第23-31页 |
3.1 植物表达载体的构建 | 第23-26页 |
3.1.1 TA 克隆 | 第23-24页 |
3.1.2 DNA 测序及分析 | 第24页 |
3.1.3 植物诱导表达载体 pIndex-NTR-gfp 的构建及重组子的鉴定 | 第24-26页 |
3.2 农杆菌介导的烟草转化 | 第26-27页 |
3.3 转基因植株的 PCR 检测 | 第27-28页 |
3.4 转基因 gfp 在植物中表达的 RT-PCR 检测 | 第28-29页 |
3.5 绿色荧光蛋白在植物中诱导表达的情况: | 第29-31页 |
4 讨 论 | 第31-33页 |
4.1 化学调控双元表达载体 pIndex3-NTR-gfp 的构建 | 第31页 |
4.2 糖皮质激素调控绿色荧光蛋白表达的转基因烟草的获得及鉴定 | 第31-33页 |
5 结 论 | 第33-34页 |
参考文献 | 第34-37页 |
附 录 | 第37-40页 |
致 谢 | 第40页 |