中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
目录 | 第8-10页 |
符号说明 | 第10-12页 |
前言 | 第12-17页 |
研究现状、成果 | 第12-16页 |
研究目的、方法 | 第16-17页 |
一、miR-1在喉鳞癌Hep2细胞中的功能研究 | 第17-28页 |
1.1 材料和方法 | 第17-23页 |
1.1.1 实验材料 | 第17-18页 |
1.1.2 实验方法 | 第18-23页 |
1.2 结果 | 第23-25页 |
1.2.1 real-time PCR检测转染pcDNA3/pri-1或ASO-1后HEp2细胞中miR-1的表达情况 | 第23-24页 |
1.2.2 MTT检测分析miR-1对喉鳞癌细胞HEp2增殖活性的影响 | 第24-25页 |
1.2.3 平板克隆形成实验分析miR-1对HEp2细胞克隆形成能力的影响 | 第25页 |
1.3 讨论 | 第25-27页 |
1.4 小结 | 第27-28页 |
二、miR-1在喉鳞癌Hep2细胞中靶基因的筛选及确定 | 第28-50页 |
2.1 材料和方法 | 第28-41页 |
2.1.1 实验材料 | 第28-30页 |
2.1.2 实验方法 | 第30-41页 |
2.2 结果 | 第41-46页 |
2.2.1 miR-1候选靶基因的筛选 | 第41页 |
2.2.2 pcDNA3/EGFP-FN1 3’UTR和pcDNA3/EGFP-FN13’UTR mut载体的构建 | 第41-42页 |
2.2.3 EGFP荧光报告载体实验验证FN1是miR-1的直接靶基因 | 第42-44页 |
2.2.4 real-time PCR检测FN1 mRNA在转染pri-1或ASO-1的HEp2细中的差异表达 | 第44页 |
2.2.5 免疫荧光实验检测FN1蛋白在转染pri-1或ASO-1的HEp2细胞中与对照组的差异表达 | 第44-46页 |
2.2.6 Western blot检测FN1蛋白在转染pri-1或ASO-1的HEp2细胞中与对照组之间的表达差异 | 第46页 |
2.3 讨论 | 第46-49页 |
2.4 小结 | 第49-50页 |
三、FN1基因对HEp2细胞生长的影响 | 第50-55页 |
3.1 材料和方法 | 第50-51页 |
3.1.1 实验材料 | 第50页 |
3.1.2 实验方法 | 第50-51页 |
3.2 结果 | 第51-54页 |
3.2.1 表达sh-FN1的质粒pRNAT-U6.2/FN1-shRNA的构建和验证 | 第51-52页 |
3.2.2 MTT检测分析FN1对HEp2细胞增殖的影响 | 第52-53页 |
3.2.3 平板克隆形成实验分析FN1对HEp2细胞克隆形成能力的影响 | 第53-54页 |
3.3 讨论 | 第54页 |
3.4 小结 | 第54-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-63页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第63-64页 |
综述 | 第64-76页 |
综述参考文献 | 第71-76页 |
致谢 | 第76页 |