| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 1 引言和文献综述 | 第12-25页 |
| 1.1 蛋白质相互作用的研究方法概述 | 第12-18页 |
| 1.2 Fox基因家族简介 | 第18-21页 |
| 1.3 FoxP基因简介 | 第21-23页 |
| 1.4 本文研究的意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-46页 |
| 2.1 材料 | 第25-30页 |
| 2.1.1 酶类和试剂盒 | 第25-26页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第26页 |
| 2.1.3 缓冲液和培养基 | 第26-27页 |
| 2.1.4 其他试剂 | 第27-28页 |
| 2.1.5 主要实验仪器 | 第28-29页 |
| 2.1.6 生物信息学分析的主要软件与数据库 | 第29-30页 |
| 2.2 方法 | 第30-46页 |
| 2.2.1 组织样品RNA抽提 | 第30-31页 |
| 2.2.2 RNA甲醛变性胶电泳 | 第31-32页 |
| 2.2.3 第一条cDNA链的合成 | 第32页 |
| 2.2.4 PCR反应混合液配制 | 第32-33页 |
| 2.2.5 PCR反应 | 第33-35页 |
| 2.2.6 PCR产物的纯化回收 | 第35-36页 |
| 2.2.7 连接 | 第36-37页 |
| 2.2.8 感受态细胞的制备 | 第37页 |
| 2.2.9 转化(热休克法) | 第37-38页 |
| 2.2.10 质粒的小量制备 | 第38-39页 |
| 2.2.11 阳性克隆的筛选与鉴定 | 第39页 |
| 2.2.12 测序 | 第39页 |
| 2.2.13 细胞培养 | 第39-40页 |
| 2.2.14 细胞瞬时转染 | 第40-41页 |
| 2.2.15 蛋白的提取 | 第41-42页 |
| 2.2.16 免疫共沉淀 | 第42-43页 |
| 2.2.17 SDS-PAGE | 第43-44页 |
| 2.2.18 Western blot | 第44-46页 |
| 3 结果与讨论 | 第46-73页 |
| 3.1 结果 | 第46-71页 |
| 3.1.1 人组织total RNA的提取及cDNA的合成 | 第47页 |
| 3.1.2 Actal、C17orf81、ABHD11等12个基因的克隆与鉴定 | 第47-65页 |
| 3.1.2.1 Actal基因克隆入T载体及鉴定 | 第47-49页 |
| 3.1.2.2 C17orf81基因克隆入T载体及鉴定 | 第49-50页 |
| 3.1.2.3 PTP4A3基因克隆入T载体及鉴定 | 第50-52页 |
| 3.1.2.4 ABHD11基因克隆入T载体及鉴定 | 第52-53页 |
| 3.1.2.5 RMND5B基因克隆入T载体及鉴定 | 第53-55页 |
| 3.1.2.6 TNXB基因克隆入T载体及鉴定 | 第55-56页 |
| 3.1.2.7 HLA-DPB1基因克隆入T载体及鉴定 | 第56-58页 |
| 3.1.2.8 Loc100288161基因克隆入T载体及鉴定 | 第58-59页 |
| 3.1.2.9 COL1A1基因克隆入T载体及鉴定 | 第59-61页 |
| 3.1.2.10 COL3A1基因克隆入T载体及鉴定 | 第61-62页 |
| 3.1.2.11 COL4A2基因克隆入T载体及鉴定 | 第62-64页 |
| 3.1.2.12 FN1基因克隆入T载体及鉴定 | 第64-65页 |
| 3.1.3 ACTA1、C17orf81、ABHD11等12个基因真核表达质粒的构建 | 第65-68页 |
| 3.1.4 ACTA1、C17orf81、ABHD11等12个蛋白分别与Foxp4的CO-IP实验 | 第68-71页 |
| 3.2 讨论 | 第71-73页 |
| 4 其它工作 | 第73-90页 |
| 4.1 斑马鱼Foxp4基因相关工作 | 第73-78页 |
| 4.1.1 斑马鱼Foxp4基因兔多克隆抗体的制备 | 第73-77页 |
| 4.1.1.1 Z-Foxp4基因片段PCR扩增及重组质粒的构建 | 第73-74页 |
| 4.1.1.2 Z-Foxp4融合蛋白的诱导表达和纯化 | 第74-76页 |
| 4.1.1.3 Z-Foxp4兔多克隆抗体检测 | 第76-77页 |
| 4.1.2 Foxp4基因在斑马鱼早期胚胎与成体组织的表达 | 第77-78页 |
| 4.1.2.1 Foxp4基因在斑马鱼早期胚胎的表达 | 第77页 |
| 4.1.2.2 Foxp4基因在斑马鱼成体组织的表达 | 第77-78页 |
| 4.1.3 本节讨论 | 第78页 |
| 4.2 斑马鱼Fbxl5基因相关工作 | 第78-90页 |
| 4.2.1 搭桥PCR法克隆Z-Fbxl5基因CDS | 第78-82页 |
| 4.2.2 斑马鱼Fbxl5基因兔多克隆抗体的制备 | 第82-85页 |
| 4.2.2.1 原核表达质粒pET28a-Z-Fbxl5的构建 | 第82-84页 |
| 4.2.2.2 Z-Fbxl5融合蛋白的诱导表达和纯化 | 第84-85页 |
| 4.2.2.3 Z-Fbxl5兔多克隆抗体检测 | 第85页 |
| 4.2.3 Fbxl5基因在斑马鱼胚胎与成体组织的表达 | 第85-87页 |
| 4.2.3.1 Fbxl5基因在斑马鱼胚胎中的表达 | 第85-86页 |
| 4.2.3.2 Fbxl5基因在斑马鱼成体组织的表达 | 第86-87页 |
| 4.2.4 基因芯片分析Fbxl5-MO和Std胚胎样品的mRNA含量差异 | 第87-88页 |
| 4.2.5 本节讨论 | 第88-90页 |
| 结语 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-100页 |
| 附录 | 第100-101页 |
| 后记 | 第101-102页 |
