| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10页 |
| 第一章 引言 | 第11-25页 |
| 1 漆酶的研究现状 | 第11-20页 |
| 1.1 漆酶的定义 | 第11页 |
| 1.2 漆酶的结构特性 | 第11-12页 |
| 1.3 漆酶的催化机制 | 第12-13页 |
| 1.4 漆酶合成的影响因素 | 第13-16页 |
| 1.4.1 温度 | 第13-14页 |
| 1.4.2 pH值 | 第14页 |
| 1.4.3 碳源和氮源 | 第14页 |
| 1.4.4 金属离子 | 第14-15页 |
| 1.4.5 接种量 | 第15页 |
| 1.4.6 装液量 | 第15-16页 |
| 1.4.7 诱导剂 | 第16页 |
| 1.5 真菌漆酶 | 第16-17页 |
| 1.6 漆酶酶活测定方法 | 第17页 |
| 1.7 漆酶的应用 | 第17-20页 |
| 1.7.1 造纸工业中的应用 | 第17-18页 |
| 1.7.2 食品工业中的应用 | 第18-19页 |
| 1.7.3 环境保护中的应用 | 第19页 |
| 1.7.4 饲料中应用 | 第19-20页 |
| 2 诱变育种 | 第20-22页 |
| 2.1 物理因子诱变 | 第20页 |
| 2.2 化学因子诱变 | 第20-22页 |
| 2.2.2 核酸碱基类似物 | 第21页 |
| 2.2.3 移码突变剂 | 第21-22页 |
| 2.2.4 其他种类 | 第22页 |
| 3 原生质诱变技术 | 第22-24页 |
| 4 本研究的目的和意义及内容 | 第24-25页 |
| 第二章 漆酶高产菌株的筛选 | 第25-31页 |
| 1 实验材料与方法 | 第25-27页 |
| 1.1 实验材料 | 第25-26页 |
| 1.1.1 菌种 | 第25页 |
| 1.1.2 培养基 | 第25页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第25-26页 |
| 1.1.4 主要试剂 | 第26页 |
| 1.2 实验方法 | 第26-27页 |
| 1.2.1 采集样品的分离纯化 | 第26页 |
| 1.2.2 产漆酶能力初筛 | 第26页 |
| 1.2.3 产漆酶能力复筛 | 第26-27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-29页 |
| 2.1 产漆酶的食用菌菌株的筛选 | 第27-29页 |
| 2.1.1 产漆酶菌株的初筛 | 第27-28页 |
| 2.1.2 复筛结果 | 第28-29页 |
| 2.2 采集的样本中产漆酶菌株的筛选 | 第29页 |
| 2.2.1 产漆酶菌株的初筛 | 第29页 |
| 2.2.2 产漆酶菌株的复筛 | 第29页 |
| 3 小结 | 第29-31页 |
| 第三章 菌株FA-J1分子生物学鉴定 | 第31-38页 |
| 1 材料与方法 | 第31-35页 |
| 1.1 实验材料 | 第31-32页 |
| 1.1.1 样品和载体 | 第31页 |
| 1.1.2 引物 | 第31页 |
| 1.1.3 主要分析软件 | 第31页 |
| 1.1.4 主要试剂 | 第31页 |
| 1.1.5 主要溶液和主要培养基 | 第31-32页 |
| 1.1.6 主要仪器 | 第32页 |
| 1.2 实验方法 | 第32-35页 |
| 1.2.1 菌种基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| 1.2.2 ITS rDNA基因的PCR扩增 | 第33页 |
| 1.2.3 PCR扩增产物纯化 | 第33页 |
| 1.2.4 连接反应 | 第33-34页 |
| 1.2.5 质粒转化 | 第34页 |
| 1.2.6 阳性克隆子菌落PCR验证 | 第34-35页 |
| 1.2.7 测序分析 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-37页 |
| 2.1 菌株基因组DNA的提取 | 第35页 |
| 2.2 TTS序列的扩增 | 第35-36页 |
| 2.3 菌落PCR验证结果 | 第36-37页 |
| 2.4 系统发育树的构建及分析 | 第37页 |
| 3 小结 | 第37-38页 |
| 第四章 菌株FA-J1液态发酵产漆酶条件分析 | 第38-46页 |
| 1 材料与方法 | 第38页 |
| 1.1 实验材料 | 第38页 |
| 1.1.1 菌种 | 第38页 |
| 1.1.2 主要仪器 | 第38页 |
| 1.1.3 主要试剂和培养基 | 第38页 |
| 1.2 实验方法 | 第38页 |
| 1.2.1 种子培养液的制备 | 第38页 |
| 1.2.2 粗酶液的制备 | 第38页 |
| 1.2.3 漆酶活性测定 | 第38页 |
| 2 结果与分析 | 第38-44页 |
| 2.1 菌株FA-J1在产酶培养基上的产酶曲线 | 第38-39页 |
| 2.2 碳源对菌株发酵产酶的影响 | 第39-40页 |
| 2.3 氮源对菌株产酶的影响 | 第40页 |
| 2.4 培养温度对菌株产酶的影响 | 第40-41页 |
| 2.5 初始pH值对菌株产酶的影响 | 第41-42页 |
| 2.6 添加Cu~(2+)对菌株发酵产酶的影响 | 第42-43页 |
| 2.7 装液量对菌株发酵产酶的影响 | 第43-44页 |
| 3 小结 | 第44-46页 |
| 第五章 真菌FA-J1固态发酵产漆酶条件分析 | 第46-52页 |
| 1 材料与方法 | 第46页 |
| 1.1 实验材料 | 第46页 |
| 1.1.1 主要仪器 | 第46页 |
| 1.1.2 培养基 | 第46页 |
| 1.2 实验方法 | 第46页 |
| 1.2.1 粗酶液的制备 | 第46页 |
| 1.2.2 漆酶活性测定 | 第46页 |
| 2 结果与分析 | 第46-50页 |
| 2.1 菌株FA-J1固态发酵产酶曲线 | 第46-47页 |
| 2.2 五节芒和麸皮的不同比例对产漆酶的影响 | 第47-48页 |
| 2.3 培养基含水量对FA-J1固体发酵产漆酶的影响 | 第48页 |
| 2.4 起始pH值对FA-J1固体发酵产漆酶的影响 | 第48-49页 |
| 2.5 培养温度对FA-J1固体发酵产漆酶的影响 | 第49-50页 |
| 2.6 Cu~(2+)浓度对FA-J1固体发酵产漆酶的影响 | 第50页 |
| 3 小结 | 第50-52页 |
| 第六章 诱变育种 | 第52-61页 |
| 1 材料与方法 | 第52-54页 |
| 1.1 实验材料 | 第52页 |
| 1.1.1 菌种 | 第52页 |
| 1.1.2 主要培养基和试剂 | 第52页 |
| 1.1.3 主要试剂 | 第52页 |
| 1.1.4 主要设备与仪器 | 第52页 |
| 1.2 实验方法 | 第52-54页 |
| 1.2.0 原生质体制备与再生 | 第52-53页 |
| 1.2.1 原生质体诱变处理 | 第53页 |
| 1.2.2 原生质体再生菌株的初筛 | 第53页 |
| 1.2.3 原生质体再生菌株的复筛 | 第53-54页 |
| 1.2.4 漆酶酶活的测定 | 第54页 |
| 1.2.5 诱变菌种遗传稳定性研究 | 第54页 |
| 1.2.6 诱变菌株与出发菌株RAPD分析 | 第54页 |
| 2 结果与讨论 | 第54-60页 |
| 2.1 原生质再生 | 第54-55页 |
| 2.2 原生质紫外诱变 | 第55-56页 |
| 2.2.1 紫外线诱变时间对原生质体致死率的影响 | 第55-56页 |
| 2.2.2 原生质体再生菌株有益菌株的筛选 | 第56页 |
| 2.3 原生质硫酸二乙酯(DES)诱变 | 第56-58页 |
| 2.3.1 硫酸二乙酯处理时间对原生质体致死率的影响 | 第56-57页 |
| 2.3.2 原生质体再生菌株有益菌株的筛选 | 第57-58页 |
| 2.4 诱变菌种遗传稳定性测定 | 第58页 |
| 2.5 诱变菌株与出发菌株RAPD分析 | 第58-60页 |
| 3 小结 | 第60-61页 |
| 第七章 结论与展望 | 第61-62页 |
| 1. 结论 | 第61页 |
| 2. 展望 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68页 |
