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棉花基于FISH的单染色体图谱及亚基因组和Oligo序列鉴定

摘要第9-12页
Abstract第12-14页
英文缩略表第15-16页
第一章 文献综述第16-42页
    1.1 棉属的分类与起源进化第16-19页
        1.1.1 棉属的分类第16-17页
        1.1.2 棉属的起源与进化第17-19页
    1.2 植物基因组图谱第19-21页
        1.2.1 细胞学图谱第19页
        1.2.2 遗传图谱第19-20页
        1.2.3 物理图谱第20-21页
    1.3 荧光原位杂交(FISH)技术概述第21-29页
        1.3.1 荧光原位杂交技术的基本原理第21-22页
        1.3.2 荧光原位杂交技术的发展第22-26页
        1.3.3 荧光原位杂交在植物研究中的应用第26-29页
    1.4 棉属荧光原位杂交技术应用研究进展第29-36页
        1.4.1 rDNA序列染色体定位第29-30页
        1.4.2 弥散重复序列FISH研究第30-31页
        1.4.3 经典遗传材料的鉴定第31-32页
        1.4.4 棉属的起源与进化研究第32页
        1.4.5 单染色体识别与命名第32-34页
        1.4.6 细胞遗传学图谱的构建第34-35页
        1.4.7 染色体特殊结构研究第35-36页
    1.5 寡核苷酸探针荧光原位杂交(Oligo-FISH)第36-38页
    1.6 植物基因组重复序列第38-40页
        1.6.1 植物基因组重复序列的分类第38页
        1.6.2 基因组重复序列的研究第38-39页
        1.6.3 基因组重复序列的研究意义第39-40页
    1.7 本研究的目的和意义第40-42页
第二章 陆地棉A_h01/D_h01染色体细胞遗传学图谱构建第42-69页
    2.1 实验材料第43-44页
        2.1.1 植物材料第43页
        2.1.2 BAC文库第43页
        2.1.3 参考的基因组序列和选用的SSR分子标记第43页
        2.1.4 主要的酶和生化试剂第43-44页
    2.2 实验方法第44-52页
        2.2.1 基因组DNA的提取第44-45页
        2.2.2 封阻DNA制备第45页
        2.2.3 SSR分子标记的选择第45-46页
        2.2.4 BAC文库的筛选第46-49页
        2.2.5 电子PCR(Electronic PCR, e-PCR)第49页
        2.2.6 棉花染色体制片第49-50页
        2.2.7 荧光原位杂交第50-52页
    2.3 结果与分析第52-65页
        2.3.1 DNA质量检测第52-53页
        2.3.2 选择的SSR分子标记第53-55页
        2.3.3 BAC文库筛选第55-56页
        2.3.4 阳性BAC克隆陆地棉A_h01/D_h01染色体上的FISH定位第56-58页
        2.3.5 染色体细胞遗传图谱构建及其与基因组序列图谱的整合第58-63页
        2.3.6 四倍体陆地棉粗线期染色体制片第63-65页
    2.4 讨论第65-69页
        2.4.1 SSR分子标记的选择第65页
        2.4.2 四倍体棉花减数分裂粗线期染色体制片技术第65-67页
        2.4.3 细胞遗传图谱对基因组序列组装的指导意义第67-69页
第三章 亚基因组特异BAC克隆的获得与分析第69-85页
    3.1 实验材料第69-70页
        3.1.1 植物材料第69-70页
        3.1.2 酶和生化试剂第70页
        3.1.3 参考的基因组序列及使用的引物信息第70页
    3.2 实验方法第70-72页
        3.2.1 特异BAC克隆 57I23的获得第70页
        3.2.2 BAC克隆序列测定第70-71页
        3.2.3 序列分析第71页
        3.2.4 特异序列片段的PCR扩增与纯化第71-72页
        3.2.5 荧光原位杂交第72页
    3.3 结果与分析第72-81页
        3.3.1 BAC克隆 57I23可以作为鉴别亚基因组的特异细胞遗传学标记第72-74页
        3.3.2 BAC测序及序列分析第74-78页
        3.3.3 BAC克隆的特异LTR-RTs在相关棉种基因组中的分布第78-81页
    3.4 讨论第81-85页
        3.4.1 亚基因组特异的FISH标记第81页
        3.4.2 陆地棉基因组草图重复序列组装质量的初步评价第81-82页
        3.4.3 BAC序列中识别的LTR-RT在棉属基因组扩张中起着重要作用第82页
        3.4.4 四倍体棉多倍化过程中“基因组小型化”第82-83页
        3.4.5 棉花四倍化过程中重复序列在基因组间的水平转移第83-85页
第四章 棉花Oligo-FISH技术体系的建立及其初步应用第85-98页
    4.1 材料和方法第86-92页
        4.1.1 实验材料第86页
        4.1.2 实验方法第86-92页
    4.2 结果与分析第92-95页
        4.2.1 建立了棉花单染色体特异oligos探针设计和标记技术第92-94页
        4.2.2 有丝分裂染色体Oligo-FISH初探第94-95页
    4.3 讨论第95-98页
        4.3.1 雷蒙德氏棉D_501染色体oligos探针第95页
        4.3.2 Oligos探针与传统FISH探针第95-97页
        4.3.3 用oligos探针追踪异源同源染色体动态第97-98页
全文总结第98-100页
参考文献第100-123页
攻读学位期间发表论文及申请专利情况第123-125页
致谢第125-127页

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