| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-39页 |
| 1.1 猪链球菌概述 | 第12-14页 |
| 1.2 病原菌对碳水化合物的利用 | 第14-23页 |
| 1.2.1 细菌对碳水化合物的转运 | 第14-16页 |
| 1.2.2 细菌对碳水化合物的代谢 | 第16-18页 |
| 1.2.3 细菌利用碳水化合物的调控机制 | 第18-20页 |
| 1.2.4 碳水化合物利用与病原菌致病性的关系 | 第20-23页 |
| 1.3 细菌细胞分裂机制研究进展 | 第23-39页 |
| 1.3.1 细菌细胞分裂蛋白质FtsZ和Z环 | 第23-25页 |
| 1.3.2 杆菌的细胞分裂机制 | 第25-30页 |
| 1.3.3 球菌的细胞分裂机制 | 第30-38页 |
| 1.3.4 猪链球菌的细胞分裂机制研究进展 | 第38-39页 |
| 2 研究目的与意义 | 第39-40页 |
| 3 猪链球菌MsmK转运多种碳水化合物的功能研究 | 第40-62页 |
| 3.1 前言 | 第40-41页 |
| 3.2 材料与方法 | 第41-50页 |
| 3.2.1 菌株、质粒和引物 | 第41-42页 |
| 3.2.2 实验相关试剂 | 第42-44页 |
| 3.2.3 荧光定量PCR（qRT-PCR） | 第44-46页 |
| 3.2.4 克隆、表达以及纯化MsmK蛋白 | 第46-47页 |
| 3.2.5 MsmK ATPase活性的鉴定 | 第47-48页 |
| 3.2.6 msmK缺失突变菌株的构建与鉴定 | 第48-49页 |
| 3.2.7 发酵实验 | 第49页 |
| 3.2.8 不同碳水化合物培养条件下生长曲线的检测 | 第49-50页 |
| 3.3 结果与分析 | 第50-57页 |
| 3.3.1 猪链球菌中MsmEFG与MalXCD的功能分析 | 第50-51页 |
| 3.3.2 猪链球菌MsmK具有ATPase活性 | 第51-53页 |
| 3.3.3 msmK基因缺失突变体（ΔmsmK）的鉴定 | 第53页 |
| 3.3.4 MsmK负责多种碳水化合物的转运 | 第53-55页 |
| 3.3.5 MsmK蛋白表达量的检测 | 第55-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-62页 |
| 3.4.1 猪链球菌对 α-葡聚糖的利用 | 第57-58页 |
| 3.4.2 MsmK在猪链球菌中协同ABC转运子MsmEFG和MalXCD作用 | 第58-60页 |
| 3.4.3 猪链球菌对 α-葡聚糖的代谢 | 第60-62页 |
| 4 MsmK促进猪链球菌在体内定植的功能研究 | 第62-76页 |
| 4.1 前言 | 第62-63页 |
| 4.2 材料与方法 | 第63-66页 |
| 4.2.1 小鼠致病性实验 | 第63页 |
| 4.2.2 小鼠竞争性定植实验 | 第63-64页 |
| 4.2.3 全血杀伤实验 | 第64页 |
| 4.2.4 吞噬实验 | 第64页 |
| 4.2.5 溶血实验 | 第64页 |
| 4.2.6 粘附与侵入实验 | 第64-65页 |
| 4.2.7 细菌应激实验 | 第65页 |
| 4.2.8 生物被膜实验 | 第65页 |
| 4.2.9 荧光定量PCR | 第65-66页 |
| 4.3 结果与分析 | 第66-73页 |
| 4.3.1 MsmK对猪链球菌致病性的影响 | 第66-68页 |
| 4.3.2 msmK缺失菌株在宿主体内的定植能力减弱 | 第68页 |
| 4.3.3 msmK缺失菌株对全血和吞噬细胞的抵抗能力减弱 | 第68-70页 |
| 4.3.4 msmK缺失菌株的溶血活性减弱 | 第70-71页 |
| 4.3.5 msmK缺失菌株的粘附能力增强 | 第71-72页 |
| 4.3.6 msmK缺失菌株对渗透压和过氧环境的抵抗能力减弱 | 第72页 |
| 4.3.7 msmK缺失菌株形成生物被膜的能力减弱 | 第72-73页 |
| 4.4 讨论 | 第73-76页 |
| 4.4.1 碳源的利用调控猪链球菌毒力的机制 | 第73页 |
| 4.4.2 MsmK影响猪链球菌在组织中的定植 | 第73-74页 |
| 4.4.3 MsmK影响猪链球菌在血液中的存活 | 第74-76页 |
| 5 MsmK影响猪链球菌细胞分裂过程的机制研究 | 第76-102页 |
| 5.1 前言 | 第76-77页 |
| 5.2 材料和方法 | 第77-83页 |
| 5.2.1 菌株、质粒及引物 | 第77-78页 |
| 5.2.2 细菌双杂交用试剂与培养基的配制 | 第78-79页 |
| 5.2.3 重组质粒的构建 | 第79-80页 |
| 5.2.4 蛋白的表达与纯化 | 第80页 |
| 5.2.5 细菌双杂交实验 | 第80页 |
| 5.2.6 表面等离子共振实验 | 第80-81页 |
| 5.2.7 ELISA实验 | 第81页 |
| 5.2.8 MsmK和同源物GTPase活性的测定 | 第81页 |
| 5.2.9 超速离心实验 | 第81-82页 |
| 5.2.10 透射电镜观察FtsZ多聚体的形成 | 第82页 |
| 5.2.11 透射电镜观察细菌形态 | 第82页 |
| 5.2.12 扫描电镜观察细菌形态 | 第82页 |
| 5.2.13 荧光定量PCR | 第82-83页 |
| 5.3 结果与分析 | 第83-95页 |
| 5.3.1 链球菌中FtsZ蛋白的鉴定 | 第83-85页 |
| 5.3.2 MsmK和Fts Z存在相互作用 | 第85-86页 |
| 5.3.3 MsmK和Fts Z相互作用的位点均在N端 | 第86-88页 |
| 5.3.4 MsmK同源蛋白质与猪链球菌FtsZ的互作情况 | 第88-89页 |
| 5.3.5 MsmK具有GTPase活性 | 第89页 |
| 5.3.6 MsmK在体外促进FtsZ多聚体的形成 | 第89-92页 |
| 5.3.7 msmK基因缺失突变株生长情况 | 第92-93页 |
| 5.3.8 MsmK影响猪链球菌的形态 | 第93-94页 |
| 5.3.9 细胞分裂相关基因转录水平的变化 | 第94-95页 |
| 5.4 讨论 | 第95-102页 |
| 5.4.1 FtsZ的调控 | 第95-97页 |
| 5.4.2 MsmK具有GTP酶活性 | 第97-98页 |
| 5.4.3 MsmK促进FtsZ的多聚化 | 第98-99页 |
| 5.4.4 MsmK影响细菌形态 | 第99-100页 |
| 5.4.5 MsmK影响细胞分裂相关基因的表达量 | 第100-102页 |
| 结论与展望 | 第102-103页 |
| 参考文献 | 第103-116页 |
| 论文发表 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117-118页 |
