摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-26页 |
1.1 水稻叶片衰老的生理表现和假说 | 第13-14页 |
1.2 水稻叶片衰老调控基因的发掘 | 第14-16页 |
1.3 水稻叶片衰老基因调控的机理研究 | 第16-19页 |
1.4 NAD合成通路和细胞衰老的关系 | 第19-25页 |
1.4.1 NAD合成和补偿途径 | 第19-21页 |
1.4.2 NAD合成途径中的几个重要酶及其功能 | 第21-22页 |
1.4.3 NAD合成途径中的衍生物对植物发育过程的影响 | 第22-23页 |
1.4.4 NAD合成途径中的衍生物对细胞衰老的调控 | 第23-24页 |
1.4.5 NAD与植物衰老的关系 | 第24-25页 |
1.5 本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
第二章 试验材料与方法 | 第26-42页 |
2.1 研究材料 | 第26页 |
2.2 常用试剂与仪器 | 第26-27页 |
2.2.1 化学试剂 | 第26页 |
2.2.2 主要实验仪器 | 第26页 |
2.2.3 主要菌株与载体 | 第26-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-42页 |
2.3.1 日本晴和lts1叶片组织透射电镜观察 | 第27页 |
2.3.2 水稻DNA提取 | 第27页 |
2.3.3 水稻RNA提取以及应用 | 第27-28页 |
2.3.4 PCR扩增体系以及琼脂糖凝胶电泳 | 第28-29页 |
2.3.5 PCR扩增目的片段回收 | 第29页 |
2.3.6 实验相关载体构建 | 第29-30页 |
2.3.7 大肠杆菌的质粒提取 | 第30页 |
2.3.8 大肠杆菌感受态的制备 | 第30-31页 |
2.3.9 农杆菌感受态的制备 | 第31页 |
2.3.10 大肠杆菌和农杆菌转化 | 第31-32页 |
2.3.11 水稻转基因方法 | 第32-36页 |
2.3.12 水稻原生质体制备及转化 | 第36-37页 |
2.3.13 Western-Blot分析 | 第37-39页 |
2.3.14 OsNaPRT1酶活测定 | 第39页 |
2.3.15 组化分析、H2O2和丙二醛含量以及过氧化氢酶活性测定 | 第39页 |
2.3.16 代谢产物含量测定 | 第39页 |
2.3.17 TUNEL试验 | 第39页 |
2.3.18 烟酸和烟酰胺处理试验 | 第39页 |
2.3.19 基因芯片杂交和数据分析 | 第39-40页 |
2.3.20 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第40-42页 |
第三章 结果与分析 | 第42-59页 |
3.1 LTS1的叶尖枯萎表型和叶肉细胞的透射电镜观察 | 第42-43页 |
3.2 LTS1/OSNaPRT1编码水稻中的烟酸磷酸核糖转移酶 | 第43-46页 |
3.3 LTS1/OSNaPRT1在水稻中不同组织的表达模式及蛋白的亚细胞定位 | 第46-47页 |
3.4 LTS1/OSNaPRT1在叶片中的表达下调导致了叶尖早衰 | 第47-48页 |
3.5 OSSRTS在突变体叶片中的表达受到抑制 | 第48-52页 |
3.6 突变体中转录组分析显示衰老相关基因的表达量升高 | 第52-55页 |
3.7 突变体中衰老相关基因的组蛋白H3K9乙酰化水平增加 | 第55-59页 |
第四章 结果讨论 | 第59-63页 |
4.1 OSNaPRT1突变扰乱了NAD补偿途径并产生多种异常表型 | 第59页 |
4.2 OSNaPRT1突变改变了烟酰胺的含量启动了叶肉细胞的衰老过程 | 第59-60页 |
4.3 OSSRTS的表达受抑制引起衰老相关基因的表达上调 | 第60-63页 |
第五章 全文结论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-75页 |
附录 | 第75-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
作者简历 | 第82页 |