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水稻OsNaPRT1基因的突变抑制NAD补偿途径和导致叶尖枯萎的分子机理研究

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-26页
    1.1 水稻叶片衰老的生理表现和假说第13-14页
    1.2 水稻叶片衰老调控基因的发掘第14-16页
    1.3 水稻叶片衰老基因调控的机理研究第16-19页
    1.4 NAD合成通路和细胞衰老的关系第19-25页
        1.4.1 NAD合成和补偿途径第19-21页
        1.4.2 NAD合成途径中的几个重要酶及其功能第21-22页
        1.4.3 NAD合成途径中的衍生物对植物发育过程的影响第22-23页
        1.4.4 NAD合成途径中的衍生物对细胞衰老的调控第23-24页
        1.4.5 NAD与植物衰老的关系第24-25页
    1.5 本研究的目的和意义第25-26页
第二章 试验材料与方法第26-42页
    2.1 研究材料第26页
    2.2 常用试剂与仪器第26-27页
        2.2.1 化学试剂第26页
        2.2.2 主要实验仪器第26页
        2.2.3 主要菌株与载体第26-27页
    2.3 实验方法第27-42页
        2.3.1 日本晴和lts1叶片组织透射电镜观察第27页
        2.3.2 水稻DNA提取第27页
        2.3.3 水稻RNA提取以及应用第27-28页
        2.3.4 PCR扩增体系以及琼脂糖凝胶电泳第28-29页
        2.3.5 PCR扩增目的片段回收第29页
        2.3.6 实验相关载体构建第29-30页
        2.3.7 大肠杆菌的质粒提取第30页
        2.3.8 大肠杆菌感受态的制备第30-31页
        2.3.9 农杆菌感受态的制备第31页
        2.3.10 大肠杆菌和农杆菌转化第31-32页
        2.3.11 水稻转基因方法第32-36页
        2.3.12 水稻原生质体制备及转化第36-37页
        2.3.13 Western-Blot分析第37-39页
        2.3.14 OsNaPRT1酶活测定第39页
        2.3.15 组化分析、H2O2和丙二醛含量以及过氧化氢酶活性测定第39页
        2.3.16 代谢产物含量测定第39页
        2.3.17 TUNEL试验第39页
        2.3.18 烟酸和烟酰胺处理试验第39页
        2.3.19 基因芯片杂交和数据分析第39-40页
        2.3.20 染色质免疫共沉淀(ChIP)第40-42页
第三章 结果与分析第42-59页
    3.1 LTS1的叶尖枯萎表型和叶肉细胞的透射电镜观察第42-43页
    3.2 LTS1/OSNaPRT1编码水稻中的烟酸磷酸核糖转移酶第43-46页
    3.3 LTS1/OSNaPRT1在水稻中不同组织的表达模式及蛋白的亚细胞定位第46-47页
    3.4 LTS1/OSNaPRT1在叶片中的表达下调导致了叶尖早衰第47-48页
    3.5 OSSRTS在突变体叶片中的表达受到抑制第48-52页
    3.6 突变体中转录组分析显示衰老相关基因的表达量升高第52-55页
    3.7 突变体中衰老相关基因的组蛋白H3K9乙酰化水平增加第55-59页
第四章 结果讨论第59-63页
    4.1 OSNaPRT1突变扰乱了NAD补偿途径并产生多种异常表型第59页
    4.2 OSNaPRT1突变改变了烟酰胺的含量启动了叶肉细胞的衰老过程第59-60页
    4.3 OSSRTS的表达受抑制引起衰老相关基因的表达上调第60-63页
第五章 全文结论第63-64页
参考文献第64-75页
附录第75-81页
致谢第81-82页
作者简历第82页

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