摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第14-33页 |
1.1 小麦与条锈菌 | 第14-17页 |
1.1.1 小麦 | 第14页 |
1.1.2 小麦条锈病 | 第14-17页 |
1.2 抗条锈病基因Yr26及其在抗条锈病育种中的利用 | 第17-20页 |
1.2.1 Yr26基因的来源 | 第17页 |
1.2.2 Yr26及其等位基因的定位 | 第17-18页 |
1.2.3 Yr26基因在抗条锈病育种中的应用 | 第18-20页 |
1.2.4 对Yr26基因有毒性小种的出现及分布 | 第20页 |
1.3 细菌人工染色体基因组文库 | 第20-26页 |
1.3.1 DNA大片段插入文库的研究进展 | 第21页 |
1.3.2 小麦BAC文库研究进展 | 第21-24页 |
1.3.3 大片段DNA插入文库在小麦抗病基因图位克隆中的应用 | 第24-26页 |
1.4 转录组测序 | 第26-31页 |
1.4.1 转录组方法及简介 | 第26-28页 |
1.4.2 RNA测序平台 | 第28-29页 |
1.4.3 RNA-seq在小麦转录组研究中的应用 | 第29-31页 |
1.5 本研究的目的及意义 | 第31-32页 |
1.6 技术路线 | 第32-33页 |
第二章 Yr26载体材料 92R137细菌人工染色体文库构建 | 第33-43页 |
2.1 材料与方法 | 第33-37页 |
2.1.1 植物材料与高分子量DNA制备 | 第33-34页 |
2.1.2 限制性酶切及DNA片段选择 | 第34页 |
2.1.3 连接载体 | 第34-35页 |
2.1.4 连接和细菌转化 | 第35页 |
2.1.5 检测插入DNA片段大小 | 第35页 |
2.1.6 碱裂解法提取质粒DNA | 第35-36页 |
2.1.7 挑取阳性克隆 | 第36页 |
2.1.8 检测叶绿体污染 | 第36页 |
2.1.9 BAC克隆混池 | 第36-37页 |
2.1.10 用Yr26基因连锁的分子标记筛选BAC文库 | 第37页 |
2.2 结果 | 第37-41页 |
2.2.1 部分酶切实验及大片段DNA选择 | 第37-38页 |
2.2.2 BAC文库构建 | 第38-40页 |
2.2.3 BAC克隆混池以及Yr26连锁标记筛选阳性克隆 | 第40-41页 |
2.3 讨论 | 第41-43页 |
第三章 Yr26基因介导的抗条锈病转录组测序 | 第43-58页 |
3.1 材料与方法 | 第43-44页 |
3.1.1 小麦材料与条锈菌 | 第43页 |
3.1.2 条锈菌接种及采样 | 第43页 |
3.1.3 RNA提取检测及RNA-seq测序 | 第43页 |
3.1.4 RNA-seq数据分析 | 第43-44页 |
3.2 结果 | 第44-55页 |
3.2.1 RNA-seq测序数据量及质控结果 | 第44-46页 |
3.2.2 比对到基因组的结果统计 | 第46-47页 |
3.2.3 基因表达量及差异基因分析 | 第47-48页 |
3.2.4 差异基因功能注释 | 第48-49页 |
3.2.5 差异基因介导的信号通路分析及趋势分析 | 第49-55页 |
3.3 讨论 | 第55-57页 |
3.3.1 条锈菌侵染对寄主光合作用的影响 | 第55-56页 |
3.3.2 病原菌侵染对寄主激素代谢的影响 | 第56页 |
3.3.3 病菌侵染介导的寄主防卫反应基因的差异表达 | 第56-57页 |
3.4 结论 | 第57-58页 |
第四章 小麦抗条锈病已知基因对中国当前流行小种有效性分析 | 第58-68页 |
4.1 材料与方法 | 第58-61页 |
4.1.1 植物材料 | 第58-59页 |
4.1.2 病原菌 | 第59-60页 |
4.1.3 温室苗期分小种的抗条锈病鉴定 | 第60页 |
4.1.4 田间成株期人工接种病圃抗条锈病鉴定 | 第60页 |
4.1.5 天水条锈病自然发病圃抗病性鉴定 | 第60-61页 |
4.1.6 数据分析标准 | 第61页 |
4.2 实验结果分析 | 第61-64页 |
4.2.1 单个抗病基因有效性分析 | 第64页 |
4.2.2 含有多个基因组合的载体材料对条锈病的抗性评估 | 第64页 |
4.3 讨论 | 第64-68页 |
4.3.1 当前威胁我国小麦生产的条锈菌主要流行小种 | 第64-65页 |
4.3.2 已知抗条锈病基因的有效性 | 第65-66页 |
4.3.3 抗病基因持续有效利用的策略 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-83页 |
附录 | 第83-84页 |
缩略词 | 第84-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
作者简介 | 第87页 |