| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第14页 |
| 第一章 Bdnf与受体TrkB调节动物摄食和体重的研究进展 | 第14-25页 |
| 1.1 下丘脑对动物摄食和能量代谢的调控作用 | 第14-15页 |
| 1.1.1 下丘脑对能量信号的感知 | 第14页 |
| 1.1.2 下丘脑弓状核分泌能量信号相关的神经肽 | 第14-15页 |
| 1.2 Bdnf研究进展 | 第15-22页 |
| 1.2.1 Bdnf的分子结构及其信号通路 | 第15-17页 |
| 1.2.2 Bdnf对动物、人类体重和能量代谢的调控作用 | 第17-18页 |
| 1.2.3 下丘脑各个区域Bdnf对小鼠体重和摄食的调控 | 第18-20页 |
| 1.2.4 下丘脑各个区域Bdnf对小鼠能量消耗的调控 | 第20-21页 |
| 1.2.5 后脑Bdnf和能量平衡调控环路 | 第21-22页 |
| 1.2.6 Bdnf和中脑缘的反馈回路 | 第22页 |
| 1.3 Bdnf与TrkB对能量代谢的调控作用 | 第22-23页 |
| 1.4 Cre-loxp重组酶系统的发现及应用 | 第23-25页 |
| 试验研究 | 第25-26页 |
| 前言 | 第25-26页 |
| 第二章 下丘脑VMH区域Bdnf对小鼠体重的调控作用 | 第26-38页 |
| 2.1 前言 | 第26页 |
| 2.2 材料与方法 | 第26-30页 |
| 2.2.1 实验动物饲养与管理 | 第26页 |
| 2.2.2 杂交获取模型小鼠 | 第26-27页 |
| 2.2.3 成年小鼠心脏灌流实验 | 第27页 |
| 2.2.4 组织DAB和图像采集 | 第27-28页 |
| 2.2.5 体增重和日摄食量测定 | 第28页 |
| 2.2.6 体组成和空腹血糖测定 | 第28页 |
| 2.2.7 原位杂交 | 第28-30页 |
| 2.2.8 大脑立体显微注射 | 第30页 |
| 2.2.9 显著性分析 | 第30页 |
| 2.3 结果与分析 | 第30-35页 |
| 2.3.1 Bdnf在小鼠脑组织的表达规律 | 第30-32页 |
| 2.3.2 构建Sf1-Cre; Bdnflox/lox基因敲除小鼠 | 第32-33页 |
| 2.3.3 胚胎发育时期特异性敲除VMH的Bdnf对小鼠体增重的影响 | 第33页 |
| 2.3.4 成年时期VMH特异性敲除Bdnf对小鼠体重的调节作用 | 第33-34页 |
| 2.3.5 成年时期VMH特异性敲除Bdnf对小鼠日摄食量、体长和体增重的影响 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-37页 |
| 2.4.1 胚胎发育时期敲除VMH的Bdnf不影响小鼠体重 | 第35-36页 |
| 2.4.2 成年时期敲除VMH的Bdnf小鼠体重显著升高 | 第36页 |
| 2.4.3 性别影响 | 第36-37页 |
| 2.5 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 下丘脑VMH的Bdnf对小鼠能量消耗的影响 | 第38-44页 |
| 3.1 前言 | 第38页 |
| 3.2 材料与方法 | 第38-39页 |
| 3.2.1 实验动物饲养与管理 | 第38页 |
| 3.2.2 小鼠能量代谢测定 | 第38页 |
| 3.2.3 脑部立体显微注射 | 第38页 |
| 3.2.4 数据统计与分析 | 第38-39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-42页 |
| 3.3.1 成年时期敲除VMH的Bdnf对小鼠能量消耗的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.2 成年时期敲除VMH的Bdnf对小鼠自主运动和基础代谢的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.3 分析显微注射位点 | 第41-42页 |
| 3.3.4 敲除DMH区域Bdnf对小鼠体重的影响 | 第42页 |
| 3.4 讨论 | 第42-43页 |
| 3.4.1 敲除成年小鼠VMH区域的Bdnf可以影响小鼠耗氧量 | 第42-43页 |
| 3.4.2 敲除成年小鼠DMH区域的Bdnf不影响小鼠体重 | 第43页 |
| 3.5 小结 | 第43-44页 |
| 第四章 下丘脑PVH和VMH以外Bdnf对小鼠体重的调控作用 | 第44-57页 |
| 4.1 前言 | 第44页 |
| 4.2 材料与方法 | 第44-48页 |
| 4.2.1 实验动物饲养与管理 | 第44页 |
| 4.2.2 成年小鼠心脏灌流实验 | 第44-45页 |
| 4.2.3 免疫组化染色和图像采集 | 第45页 |
| 4.2.4 Western blot | 第45页 |
| 4.2.5 体重、摄食量和空腹血糖测定 | 第45页 |
| 4.2.6 实时定量PCR (Real-time PCR) | 第45-47页 |
| 4.2.7 原位杂交实验 | 第47页 |
| 4.2.8 小鼠机体组成和代谢笼实验 | 第47页 |
| 4.2.9 小鼠冷刺激和体温测定 | 第47-48页 |
| 4.2.10 数据处理与分析 | 第48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-55页 |
| 4.3.1 利用报告基因小鼠检测Nkx2.1-Cre小鼠Cre重组酶表达部位 | 第48页 |
| 4.3.2 利用Nkx2.1-Cre; Bdnfklox/+报告基因小鼠验证Bdnf的特异性敲除部位 | 第48-49页 |
| 4.3.3 Nkx2.1-Cre; Bdnflox/lox小鼠的Bdnf基因敲除效率 | 第49-50页 |
| 4.3.4 下丘脑PVH和VMH以外区域Bdnf参与调节小鼠体重变化 | 第50-51页 |
| 4.3.5 下丘脑PVH和VMH区域以外Bdnf参与调节小鼠能量消耗 | 第51-53页 |
| 4.3.6 下丘脑PVH和VMH区域以外Bdnf对小鼠自主运动的影响 | 第53-54页 |
| 4.3.7 Nkx2.1-Cre; Bdnflox/lox小鼠棕色脂肪适应性产热变化 | 第54-55页 |
| 4.4 讨论 | 第55-56页 |
| 4.4.1 下丘脑PVH和VMH区域以外的Bdnf参与调节小鼠的体重 | 第55页 |
| 4.4.2 下丘脑PVH和VMH区域以外的Bdnf影响小鼠能量消耗 | 第55-56页 |
| 4.5 小结 | 第56-57页 |
| 第五章 TrkB基因对小鼠体重的调节作用 | 第57-69页 |
| 5.1 前言 | 第57页 |
| 5.2 材料和方法 | 第57-58页 |
| 5.2.1 实验动物饲养与管理 | 第57页 |
| 5.2.2 TrkB基因与Leptin受体共定位 | 第57页 |
| 5.2.3 TrkB报告基因小鼠和基因敲除的获得 | 第57-58页 |
| 5.2.4 体重、日摄食量和血糖测定 | 第58页 |
| 5.2.5 DAB染色和免疫组化染色 | 第58页 |
| 5.2.6 能量代谢测定 | 第58页 |
| 5.2.7 计算神经细胞个数 | 第58页 |
| 5.2.8 显著性分析 | 第58页 |
| 5.3 结果与分析 | 第58-67页 |
| 5.3.1 大脑中枢特异性敲除TrkB基因 | 第58-59页 |
| 5.3.2 特异性敲除小鼠大脑中枢leptin受体中TrkB基因后小鼠体重变化 | 第59-61页 |
| 5.3.3 特异性敲除TrkB基因后对小鼠日摄食量、空腹血糖水平和体组成影响 | 第61-62页 |
| 5.3.4 特异性敲除TrkB对小鼠能量消耗的影响 | 第62-63页 |
| 5.3.5 特异性敲除TrkB基因对小鼠自主活动的影响 | 第63-64页 |
| 5.3.6 TrkB基因与p-STAT3在大脑中枢的共定位 | 第64-65页 |
| 5.3.7 特异性敲除leptin受体表达神经细胞中TrkB对leptin信号通路的影响 | 第65-67页 |
| 5.4 讨论 | 第67-68页 |
| 5.4.1 特异性敲除leptin受体表达神经元中TrkB基因引起小鼠体重上升 | 第67-68页 |
| 5.4.2 特异性敲除TrkB基因引起小鼠下丘脑p-STAT3表达改变 | 第68页 |
| 5.4.3 特异性敲除PMV区域leptin受体表达神经元中TrkB基因不影响小鼠生产性能 | 第68页 |
| 5.5 小结 | 第68-69页 |
| 本研究主要结论、创新点与进一步研究内容 | 第69-70页 |
| 1. 本研究的主要结论 | 第69页 |
| 2. 创新点 | 第69页 |
| 3. 进一步研究内容 | 第69-70页 |
| 缩略词 | 第70-72页 |
| 参考文献 | 第72-81页 |
| 致谢 | 第81-83页 |
| 作者简介 | 第83-84页 |
