摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
引言 | 第11-12页 |
上篇 文献综述 | 第12-27页 |
第一章 植物抗病反应及病毒介导的基因沉默 | 第13-21页 |
1 植物抗病反应 | 第13-17页 |
1.1 植物抗病性的概述 | 第13-14页 |
1.2 植物抗病反应的分类 | 第14-15页 |
1.3 植物抗病反应的机制 | 第15-17页 |
2 病毒介导的基因沉默 | 第17-21页 |
2.1 VIGS概述 | 第17页 |
2.2 VIGS的机制 | 第17-18页 |
2.3 VIGS的应用 | 第18-19页 |
2.4 VIGS的局限 | 第19-21页 |
第二章 植物转录因子的研究进展 | 第21-27页 |
1 植物转录因子的功能结构域 | 第21-23页 |
1.1 DNA结合域(DNA-binding domain) | 第21-22页 |
1.2 转录调控区(Transcription regulation domain) | 第22-23页 |
1.3 寡聚化位点(Oligomerization site) | 第23页 |
1.4 核定位信号(Nuclear localization signal,NLS) | 第23页 |
2 植物转录因子的分类 | 第23页 |
3 植物转录因子的功能概述 | 第23-26页 |
3.1 AP2/ERF转录因子家族 | 第24页 |
3.2 WRKY转录因子家族 | 第24-25页 |
3.3 bZIP转录因子家族 | 第25页 |
3.4 MYB转录因子家族 | 第25-26页 |
4 总结与展望 | 第26-27页 |
下篇 研究内容 | 第27-75页 |
第一章 本氏烟中抗疫霉转录因子的筛选 | 第29-41页 |
1 材料与方法 | 第31-35页 |
1.1 实验材料 | 第31页 |
1.2 台盼蓝染色 | 第31页 |
1.3 送测转录组的样品制备 | 第31-32页 |
1.4 本氏烟转录因子生物信息学分析 | 第32-33页 |
1.5 本氏烟中上调表达转录因子的疫霉诱导表达分析 | 第33-35页 |
2 结果与分析 | 第35-40页 |
2.1 本氏烟和寄生疫霉互作数据库的建立 | 第35-36页 |
2.2 本氏烟中受寄生疫霉诱导上调表达转录因子的筛选 | 第36-37页 |
2.3 本氏烟中疫霉诱导的转录因子表达模式验证 | 第37-40页 |
3 结论与讨论 | 第40-41页 |
第二章 本氏烟NbWRKY40转录因子抗病相关功能研究 | 第41-63页 |
1 材料与方法 | 第43-52页 |
1.1 实验材料 | 第43-45页 |
1.2 寄生疫霉菌游动孢子的获得 | 第45页 |
1.3 本氏烟烟草叶片总RNA的提取 | 第45页 |
1.4 逆转录RNA和实时荧光定量PCR | 第45页 |
1.5 转录因子NbWRKY40生物信息学分析 | 第45-46页 |
1.6 Nb WRKY40基因沉默载体构建 | 第46-48页 |
1.7 电转化重组质粒 | 第48-49页 |
1.8 Nb WRKY40基因沉默体系的建立和沉默效率的检测 | 第49-50页 |
1.9 Nb WRKY40基因沉默植株对寄生疫霉抗性检测 | 第50页 |
1.10 NbWRKY40基因沉默植株对灰霉菌抗性检测 | 第50-51页 |
1.11 NbWRKY40基因沉默植株抗病性的细胞学检测 | 第51-52页 |
1.12 数据统计分析 | 第52页 |
2 结果与分析 | 第52-60页 |
2.1 Nb WRKY40基因生物信息学分析 | 第52-54页 |
2.2 Nb WRKY40基因在疫霉侵染阶段的表达分析 | 第54-55页 |
2.3 Nb WRKY40基因沉默植株的获得 | 第55页 |
2.4 Nb WRKY40基因沉默效率检测 | 第55-56页 |
2.5 Nb WRKY40沉默植株对寄生疫霉的抗性分析 | 第56-58页 |
2.6 Nb WRKY40沉默植株对灰霉菌的抗性分析 | 第58页 |
2.7 Nb WRKY40基因沉默对抗病通路相关基因表达的影响 | 第58-60页 |
3 结论与讨论 | 第60-63页 |
第三章 本氏烟NbWRKY1转录因子抗病相关功能研究 | 第63-75页 |
1 材料与方法 | 第64-67页 |
1.1 实验材料 | 第64-65页 |
1.2 转录因子NbWRKY1生物信息学分析 | 第65页 |
1.3 Nb WRKY1基因沉默载体构建 | 第65页 |
1.4 本氏烟VIGS体系的建立 | 第65页 |
1.5 沉默效率检测 | 第65页 |
1.6 NbWRKY1基因沉默植株对寄生疫霉抗性检测 | 第65-66页 |
1.7 NbWRKY1基因沉默植株对灰霉菌抗性检测 | 第66页 |
1.8 数据统计分析 | 第66-67页 |
2 结果与分析 | 第67-72页 |
2.1 NbWRKY1基因生物信息学分析 | 第67-68页 |
2.2 NbWRKY1基因沉默植株的获得及沉默效率检测 | 第68-69页 |
2.3 NbWRKY1沉默植株对寄生疫霉的抗性分析 | 第69-70页 |
2.4 NbWRKY1沉默植株对灰霉菌的抗性分析 | 第70-71页 |
2.5 NbWRKY1基因沉默对抗病通路相关基因表达的影响 | 第71-72页 |
3 结论与讨论 | 第72-75页 |
参考文献 | 第75-87页 |
附录 | 第87-93页 |
全文总结与创新点 | 第93-95页 |
攻读硕士学位期间发表的研究论文 | 第95-97页 |
致谢 | 第97页 |