| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 缩略语表 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 顶复门寄生虫顶质体研究进展 | 第12-18页 |
| 1.1.1 引言 | 第12页 |
| 1.1.2 顶质体的发现 | 第12-13页 |
| 1.1.3 顶质体的来源 | 第13-14页 |
| 1.1.4 顶质体的结构 | 第14页 |
| 1.1.5 顶质体的基因组 | 第14-15页 |
| 1.1.6 顶质体的生物学功能 | 第15-17页 |
| 1.1.7 顶质体的生物学意义 | 第17-18页 |
| 1.2 顶复门寄生虫移动连接体相关分子的研究进展 | 第18-22页 |
| 1.2.1 顶膜抗原 1（AMA1） | 第19-20页 |
| 1.2.2 棒状体颈部蛋白（RONs） | 第20-22页 |
| 第二章 东方巴贝斯虫顶质体基因组测序分析 | 第22-37页 |
| 2.1 研究目的意义 | 第22-23页 |
| 2.2 材料与方法 | 第23-29页 |
| 2.2.1 虫株和试验动物 | 第23页 |
| 2.2.2 菌种与质粒 | 第23-24页 |
| 2.2.3 主要仪器与试剂 | 第24页 |
| 2.2.4 东方巴贝斯虫的纯化 | 第24页 |
| 2.2.5 DNA模板的的提取 | 第24页 |
| 2.2.6 顶质体基因组的扩增 | 第24-26页 |
| 2.2.7 PCR反应体系 | 第26页 |
| 2.2.8 PCR产物的回收纯化及连接 | 第26-27页 |
| 2.2.9 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
| 2.2.10 连接产物的转化 | 第27页 |
| 2.2.11 碱裂解法小量提取质粒 | 第27-28页 |
| 2.2.12 质粒的酶切鉴定 | 第28页 |
| 2.2.13 东方巴贝斯虫顶质体基因的确定 | 第28页 |
| 2.2.14 生物信息学分析网站及软件 | 第28-29页 |
| 2.3 结果分析 | 第29-35页 |
| 2.3.1 顶质体基因组片段的筛选 | 第29-30页 |
| 2.3.2 顶质体基因组的克隆分析 | 第30-35页 |
| 2.3.2.1 顶质体基因组的序列 | 第30-31页 |
| 2.3.2.2 顶质体基因组的注释 | 第31页 |
| 2.3.2.3 顶质体基因组的基本特性 | 第31-32页 |
| 2.3.2.4 顶质体基因组的分段比对 | 第32-34页 |
| 2.3.2.5 顶质体基因组的系统进化分析 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 东方巴贝斯虫RON2在入侵中作用的研究 | 第37-59页 |
| 3.1 研究目的与意义 | 第37页 |
| 3.2 材料与方法 | 第37-46页 |
| 3.2.1 菌株、血清、载体及蛋白 | 第37-38页 |
| 3.2.2 主要仪器与试剂 | 第38-39页 |
| 3.2.3 主要溶液的配制 | 第39-41页 |
| 3.2.4 水牛红细胞膜蛋白的获取 | 第41页 |
| 3.2.5 东方巴贝斯虫裂殖子全抗原的提取 | 第41页 |
| 3.2.6 棒状体颈部蛋白RON2基因的克隆与测序 | 第41-42页 |
| 3.2.7 RON2重组表达质粒的构建 | 第42页 |
| 3.2.8 RON2重组蛋白的原核表达 | 第42页 |
| 3.2.9 RON2重组蛋白的纯化提取 | 第42-43页 |
| 3.2.10 Far-western bloting | 第43页 |
| 3.2.11 AMA1多克隆抗体血清IgG的纯化 | 第43-44页 |
| 3.2.12 生物素标记AMA1多克隆抗体血清IgG的试验 | 第44-45页 |
| 3.2.13 AMA与RON2的粘附ELISA试验 | 第45-46页 |
| 3.3 结果与分析 | 第46-57页 |
| 3.3.1 BoRON2基因的序列扩增及测定 | 第46-48页 |
| 3.3.2 BoRON2基因序列的生物信息学分析 | 第48-49页 |
| 3.3.3 RON2短肽段原核表达质粒的构建 | 第49-50页 |
| 3.3.4 短肽段重组蛋白的诱导表达 | 第50-51页 |
| 3.3.5 重组蛋白的纯化 | 第51-52页 |
| 3.3.6 Far-western结果 | 第52-54页 |
| 3.3.7 顶膜抗原AMA1多抗血清IgG的纯化及生物素标记 | 第54-55页 |
| 3.3.8 AMA1多抗血清标记生物素后IgG效价的测定 | 第55页 |
| 3.3.9 AMA1与RON2粘附ELISA试验 | 第55-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-59页 |
| 3.4.1 棒状体颈部蛋白RON2的基因克隆与截短表达 | 第57页 |
| 3.4.2 RON2与AMA1蛋白相互作用的验证 | 第57-59页 |
| 4 结论 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 附录 | 第72页 |
