摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 引言 | 第12-18页 |
1.1 研究的目的与意义 | 第12页 |
1.2 国内外研究动态和趋势 | 第12-17页 |
1.2.1 植物花香生物合成关键酶及基因的研究进展 | 第12-13页 |
1.2.2 植物花香SABATH甲基转移酶的研究进展 | 第13-14页 |
1.2.3 植物SAMT的研究进展 | 第14-15页 |
1.2.4 水仙花花香的研究进展 | 第15-16页 |
1.2.5 金鱼藤的研究进展 | 第16-17页 |
1.3 研究内容与技术路线 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-27页 |
2.1 试验材料 | 第18-19页 |
2.1.1 植物材料 | 第18页 |
2.1.2 菌种及载体 | 第18页 |
2.1.3 试验试剂 | 第18页 |
2.1.4 培养基 | 第18-19页 |
2.2 试验方法 | 第19-27页 |
2.2.1 目的基因全长cDNA的克隆 | 第19-23页 |
2.2.2 植物表达载体的构建 | 第23-24页 |
2.2.3 农杆菌介导的金鱼藤遗传转化及转基因植株再生 | 第24-27页 |
3 结果与分析 | 第27-40页 |
3.1 提取植物总RNA | 第27页 |
3.2 RT-PCR法克隆Nt SAMT基因cDNA全长 | 第27-28页 |
3.3 中国水仙Nt SAMT基因的序列及其推导的蛋白同源性分析 | 第28-31页 |
3.3.1 Nt SAMT基因cDNA全长序列 | 第28-30页 |
3.3.2 Nt SAMT基因同源性比对 | 第30页 |
3.3.3 Nt SAMT编码氨基酸序列进化树分析 | 第30-31页 |
3.4 植物表达载体的构建 | 第31-33页 |
3.5 金鱼藤遗传转化体系建立 | 第33-37页 |
3.5.1 卡那霉素(Km)筛选压力的确定 | 第33-36页 |
3.5.2 除菌剂浓度的确定 | 第36-37页 |
3.6 外源基因转化金鱼藤 | 第37-38页 |
3.7 抗性植株的PCR检测 | 第38页 |
3.8 拟转基因金鱼藤植株的RT-PCR检测 | 第38-40页 |
4 讨论 | 第40-42页 |
4.1 花香基因分离方法的研究 | 第40页 |
4.1.1 功能克隆 | 第40页 |
4.1.2 同源克隆 | 第40页 |
4.1.3 表型差异克隆 | 第40页 |
4.2 花香基因的改良研究 | 第40-42页 |
5 结论 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
附录 | 第49-53页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第53页 |