| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 缩略语表（Abbreviation） | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-23页 |
| 1.1 猪繁殖与呼吸综合征病毒简介 | 第12页 |
| 1.2 PRRSV分子生物学 | 第12-16页 |
| 1.3 猪繁殖与呼吸综合征病毒的检测和防控 | 第16-19页 |
| 1.3.1 临床诊断 | 第16页 |
| 1.3.2 血清学诊断技术 | 第16-17页 |
| 1.3.3 病毒分离 | 第17页 |
| 1.3.4 逆转录聚合酶链式扩增技术 | 第17-18页 |
| 1.3.5 逆转录环介导等温扩增技术 | 第18页 |
| 1.3.6 PRRSV的防控 | 第18-19页 |
| 1.4 新型抗蓝耳病毒药物检测方法的建立 | 第19-23页 |
| 1.4.1 双荧光素酶报告系统 | 第19-21页 |
| 1.4.2 内含肽介导的生物传感器的构建 | 第21-23页 |
| 第2章 目的与意义 | 第23-24页 |
| 第3章 材料与方法 | 第24-34页 |
| 3.1 实验材料 | 第24-28页 |
| 3.1.1 菌种、细胞 | 第24页 |
| 3.1.2 载体构建所需材料及获赠载体 | 第24页 |
| 3.1.3 相关引物 | 第24-25页 |
| 3.1.4 工具酶及主要试剂 | 第25-26页 |
| 3.1.5 相关试剂的配制 | 第26-27页 |
| 3.1.6 主要实验仪器及设备 | 第27-28页 |
| 3.1.7 分子生物学分析软件 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-34页 |
| 3.2.1 聚合酶链式反应（PCR） | 第28页 |
| 3.2.2 限制性内切酶酶切反应 | 第28页 |
| 3.2.3 PCR或酶切产物琼脂糖凝胶电泳检测 | 第28-29页 |
| 3.2.4 PCR或酶切产物的回收与纯化 | 第29页 |
| 3.2.5 外源DNA片段与载体的连接反应 | 第29页 |
| 3.2.6 大肠杆菌感受态细胞的制备（氯化钙法） | 第29-30页 |
| 3.2.7 连接产物的转化 | 第30页 |
| 3.2.8 重组质粒的小量制备 | 第30页 |
| 3.2.9 重组质粒的鉴定 | 第30页 |
| 3.2.10 质粒中提 | 第30页 |
| 3.2.11 细胞转染实验（脂质体介导转染法） | 第30-31页 |
| 3.2.12 荧光素酶报告基因实验 | 第31-32页 |
| 3.2.13 Western Blot检测目的蛋白的表达 | 第32-33页 |
| 3.2.14 空斑实验 | 第33页 |
| 3.2.15 统计学方法 | 第33-34页 |
| 第4章 结果与分析 | 第34-46页 |
| 4.1 荧光素酶生物传感器表达质粒的构建 | 第34-35页 |
| 4.2 筛选最优的报告质粒 | 第35-43页 |
| 4.2.1 报告质粒的效果验证 | 第35-36页 |
| 4.2.2 报告质粒的敏感性验证 | 第36-38页 |
| 4.2.3 报告质粒 358D-Nsp3/4 的特异性验证 | 第38-43页 |
| 4.3 抗PRRSV药物的筛选 | 第43-46页 |
| 第5章 讨论与结论 | 第46-51页 |
| 5.1 讨论 | 第46-50页 |
| 5.1.1 双荧光素酶报告系统的选择 | 第46页 |
| 5.1.2 PRRSV非结构蛋白切割序列的选择 | 第46-47页 |
| 5.1.3 萤火虫荧光素酶突变体的选择 | 第47-49页 |
| 5.1.4 Npu DnaE内含肽的选择 | 第49-50页 |
| 5.1.5 抑制PRRSV增殖的药物筛选以及验证 | 第50页 |
| 5.2 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-60页 |
| 致谢 | 第60页 |