摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略语表 | 第9-10页 |
1 前言 | 第10-20页 |
1.1 马铃薯低温糖化 | 第10页 |
1.2 转化酶及转化酶抑制子在低温糖化中的作用 | 第10-11页 |
1.3 SnRK1对转化酶活性的调控 | 第11-12页 |
1.4 SnRK1的结构及功能 | 第12-15页 |
1.4.1 SnRK1α 亚基结构及功能 | 第13-14页 |
1.4.2 SnRK1β 亚基结构及功能 | 第14页 |
1.4.3 植物特有的SnRK1βγ 亚基结构及功能 | 第14-15页 |
1.5 SnRK1磷酸化水平调控研究 | 第15-18页 |
1.5.1 上游激酶对SnRK1的正调控 | 第16页 |
1.5.2 上游磷酸酶对SnRK1的负调控 | 第16-18页 |
1.5.3 SnRK1的其他形式的调控 | 第18页 |
1.6 本课题提出的目的及意义 | 第18-20页 |
2 材料与方法 | 第20-29页 |
2.1 研究材料 | 第20-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第20页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第20页 |
2.1.3 引物 | 第20-22页 |
2.2 研究方法 | 第22-29页 |
2.2.0 马铃薯叶片DNA提取 | 第22页 |
2.2.1 马铃薯叶片RNA提取 | 第22页 |
2.2.2 cDNA的制备 | 第22-23页 |
2.2.3 Quantitative Real Time-PCR | 第23-24页 |
2.2.4 载体构建 | 第24页 |
2.2.5 酵母双杂 | 第24-25页 |
2.2.6 烟草瞬时表达和荧光成像 | 第25页 |
2.2.7 蛋白原核表达与纯化 | 第25-26页 |
2.2.8 Western Blot | 第26-27页 |
2.2.9 农杆菌介导的遗传转化 | 第27页 |
2.2.10 株系生理指标测定 | 第27-28页 |
2.2.11 统计分析 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-51页 |
3.1 马铃薯StSnRK1γ 功能分析 | 第29-40页 |
3.1.1 StSnRK1γ 基因克隆及生物信息学分析 | 第29-32页 |
3.1.2 StSnRK1γ 在不同低温糖化抗性材料块茎中的表达分析 | 第32页 |
3.1.3 StSnRK1γ 与SbSnRK1α 之间的互作验证 | 第32-34页 |
3.1.4 StSnRK1γ 的亚细胞定位 | 第34-35页 |
3.1.5 StSnRK1γ 基因在马铃薯块茎低温糖化过程中的作用 | 第35-40页 |
3.2 SbSnRK1α 上游磷酸酶StABI1 | 第40-51页 |
3.2.1 StABI1基因克隆及生物信息学分析 | 第40-43页 |
3.2.2 StABI1基因在不同低温糖化抗性块茎中的表达分析 | 第43-44页 |
3.2.3 亚细胞定位 | 第44页 |
3.2.4 原核表达与蛋白纯化 | 第44-46页 |
3.2.5 StABI1基因在马铃薯低温糖化中的作用 | 第46-49页 |
3.2.6 转基因株系加工品质分析 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-53页 |
4.1 StSnRK1γ 作为SnRK1的一个调节亚基来调控马铃薯低温糖化 | 第51页 |
4.2 StABI1作为SnRK1的上游磷酸酶来调控马铃薯低温糖化 | 第51-52页 |
4.3 StSnRK1γ 研究展望 | 第52页 |
4.4 StABI1研究展望 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-60页 |
致谢 | 第60页 |