| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 1.文献综述 | 第10-17页 |
| 1.1 豆科模式植物蒺藜苜蓿 | 第10-11页 |
| 1.1.1 蒺藜苜蓿简介 | 第10-11页 |
| 1.1.2 Tnt1插入蒺藜苜蓿突变体库介绍 | 第11页 |
| 1.2 维生素E的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.3 维生素E的合成途径 | 第13-16页 |
| 1.3.1 HPPD | 第15页 |
| 1.3.2 HPT | 第15页 |
| 1.3.3 MPBQ MT | 第15-16页 |
| 1.3.4 TC | 第16页 |
| 1.3.5γ-TMT | 第16页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| 2.实验材料与方法 | 第17-24页 |
| 2.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第17页 |
| 2.1.2 实验菌株及载体 | 第17页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第18页 |
| 2.1.5 引物合成 | 第18-19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 生物信息学分析 | 第19-20页 |
| 2.2.2 基因克隆 | 第20页 |
| 2.2.3 载体构建与转化 | 第20页 |
| 2.2.4 含目的基因表达载体质粒的大肠杆菌DH5α的培养及质粒提取 | 第20-21页 |
| 2.2.5 农杆菌介导的拟南芥转化 | 第21页 |
| 2.2.6 转基因阳性拟南芥的筛选 | 第21-22页 |
| 2.2.7 维生素E的提取 | 第22页 |
| 2.2.8 蒺藜苜蓿突变体的鉴定 | 第22-23页 |
| 2.2.9 维生素E含量的检测 | 第23页 |
| 2.2.10 蒺藜苜蓿逆境处理 | 第23-24页 |
| 3.结果与分析 | 第24-38页 |
| 3.1 Mt HPT1的基因功能验证 | 第24-27页 |
| 3.1.1 MtHPT1的生物信息学分析 | 第24页 |
| 3.1.2 MtHPT1组织特异性表达 | 第24-25页 |
| 3.1.3 逆境处理下MtHPT1表达量分析 | 第25-26页 |
| 3.1.4 MtHPT1转野生型拟南芥阳性植株的筛选 | 第26页 |
| 3.1.5 拟南芥转化结果分析 | 第26-27页 |
| 3.2 MtTMT基因功能验证 | 第27-33页 |
| 3.2.1 生物信息学分析 | 第27页 |
| 3.2.2 MtTMT的组织特异性表达分析 | 第27-28页 |
| 3.2.3 胁迫处理下MtTMT在蒺藜苜蓿叶片中表达量分析 | 第28-29页 |
| 3.2.4 MtTMT转野生型拟南芥结果分析 | 第29-30页 |
| 3.2.5 MtTMT转拟南芥突变体vte4-3 结果分析 | 第30-32页 |
| 3.2.6 MtTMT转拟南芥突变体vte4-4 结果分析 | 第32-33页 |
| 3.3 蒺藜苜蓿tmt突变体的筛选与性状观察 | 第33-38页 |
| 3.3.1 蒺藜苜蓿突变体的生物信息学分析 | 第33-34页 |
| 3.3.2 蒺藜苜蓿tmt突变体的筛选 | 第34-35页 |
| 3.3.3 tmt蒺藜苜蓿突变体表型观察 | 第35-37页 |
| 3.3.4 tmt和R108胁迫处理 | 第37-38页 |
| 4.讨论 | 第38-40页 |
| 5.参考文献 | 第40-47页 |
| 6.Prtocols | 第47-49页 |
| Protocols1.CTAB法提取植物组织DNA | 第47页 |
| Protocols2.大肠杆菌DH5α感受态制备 | 第47-48页 |
| Protocols3.农杆菌GV3101感受态制备 | 第48-49页 |
| 7.附表 | 第49-53页 |
| 致谢 | 第53页 |
