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钩状木霉抑菌作用的比较基因组学和蛋白质组学研究

摘要第4-5页
Abstract第5-6页
第一章 文献综述第11-16页
    1.1 木霉的分类第11页
    1.2 关于木霉的生物防治第11-13页
    1.3 基因组学和蛋白质组学及其木霉在抑菌机制研究中的应用第13-15页
    1.4 研究的目的与主要研究内容第15-16页
第二章 钩状木霉生物防治菌株的筛选与鉴定第16-43页
    2.1 材料与试剂第16-17页
    2.2 方法第17-21页
        2.2.1 生物防治活性菌株的筛选第17-18页
        2.2.2 生物防治活性菌株的形态和分子鉴定第18页
        2.2.3 钩状木霉活性菌株YYH13最适生长条件的筛选第18-19页
        2.2.4 钩状木霉YYH13代谢物抑制青枯雷尔氏菌的活性第19页
        2.2.5 钩状木霉YYH13发酵液抑制青枯雷尔氏菌的活性第19-20页
        2.2.6 田间抑菌试验第20-21页
    2.3 结果与分析第21-39页
        2.3.1 生物防治活性菌株的筛选第21-22页
        2.3.2 生物防治活性菌株的鉴定第22-26页
        2.3.3 钩状木霉YYH13最适生长条件第26-28页
        2.3.4 钩状木霉YYH13接种及其代谢物抑制青枯雷尔氏菌的活性比较第28-30页
        2.3.5 钩状木霉YYH1 3发酵液制备及其抑制青枯雷尔氏菌的活性比较第30-32页
        2.3.6 钩状木霉YYH13最适固体发酵条件第32-37页
        2.3.7 田间条件下钩状木霉YYH13的抑菌效果第37-39页
    2.4 讨论第39-42页
        2.4.1 生物防治效应差异显著的钩状木霉菌株的筛选第39-40页
        2.4.2 钩状木霉YYH13在田间条件下的抑菌作用第40-42页
    2.5 小结第42-43页
第三章 钩状木霉胞外蛋白质鉴定与蛋白质组学分析第43-59页
    3.1 材料与试剂第43页
    3.2 方法第43-45页
        3.2.1 代谢液中胞外蛋白的提取第44页
        3.2.2 不同温度、pH值条件下胞外蛋白质抑菌活力的测定第44页
        3.2.3 胞外蛋白SDS-PAGE凝胶电泳分析第44页
        3.2.4 LC-MS/MS质谱分析第44-45页
        3.2.5 蛋白质组学分析第45页
    3.3 结果与分析第45-57页
        3.3.1 不同(NH4)2SO4饱和度提取胞外蛋白的抑菌活性第45-46页
        3.3.2 不同温度影响胞外蛋白抑菌活性比较第46-47页
        3.3.3 不同pH值影响胞外蛋白抑菌活性的比较第47页
        3.3.4 SDS-PAGE凝胶电泳分析第47-48页
        3.3.5 钩状木霉胞外蛋白质的质谱鉴定第48-52页
        3.3.6 差异蛋白的相关生物信息学分析第52-57页
    3.4 讨论第57-58页
        3.4.1 钩状木霉胞外蛋白质的分离与鉴定第57页
        3.4.2 钩状木霉胞外蛋白质的活性分析第57-58页
    3.5 小结第58-59页
第四章 钩状木霉菌YYH13和YYH16比较基因组学研究第59-90页
    4.1 材料第59页
    4.2 方法第59-65页
        4.2.1 Illumina测序实验流程第59-61页
        4.2.2 17-K-mer分析以及基因组大小估计第61-63页
        4.2.3 基因组组装第63-64页
        4.2.4 基因功能注释第64页
        4.2.5 突变预测及注释结果统计第64-65页
        4.2.6 比较基因组分析第65页
    4.3 结果与分析第65-86页
        4.3.1 基因组测序数据统计分析第65-69页
        4.3.2 YYH13和YYH16测序信息及数据量比较第69-71页
        4.3.3 K-mer数据统计分析第71-73页
        4.3.4 基因组组装分析第73-74页
        4.3.5 基因组组装质量评估第74-75页
        4.3.6 基因功能注释分析第75-78页
        4.3.7 突变预测与注释第78-80页
        4.3.8 基因组共线性分析第80-81页
        4.3.9 木霉基因家族收缩与扩张的差异比较第81-83页
        4.3.10 基因家族酶类比较第83-85页
        4.3.11 与生物防治相关基因的预测第85-86页
    4.4 讨论第86-89页
        4.4.1 关于基因组数据杂和度分析第86-87页
        4.4.2 关于钩状木霉基因组测序与组装的策略流程第87-88页
        4.4.3 关于基因组突变预测分析第88页
        4.4.4 关于生物防治相关基因的预测第88-89页
    4.5 小结第89-90页
第五章 钩状木霉生物防治候选功能基因的验证第90-109页
    5.1 材料与试剂第90页
    5.2 方法第90-94页
        5.2.1 DNA qRT-PCR反应第90-91页
        5.2.2 RNA qRT-PCR反应第91-92页
        5.2.3 基因转录水平分析第92页
        5.2.4 YYH13107内切几丁质酶基因克隆第92-94页
    5.3 结果与分析第94-107页
        5.3.1 候选基因在YYH13和YYH16中DNA qRT-PCR表达分析结果第94-96页
        5.3.2 半定量RT-PCR测序验证第96页
        5.3.3 不同几丁质诱导时间对YYH13107和YYH1311002基因表达的影响第96-97页
        5.3.4 不同碳源对YYH132757和YYH1311002基因表达的影响第97-99页
        5.3.5 不同诱导时间对YYH132757和YYH1311002基因表达的影响第99-101页
        5.3.7 基因ctoi18-148内切几丁质酶基因的克隆第101-107页
    5.4 讨论第107-108页
        5.4.1 关于在YYH13与YYH16中内切几丁质酶基因转录差异分析第107-108页
        5.4.2 关于在YYH13与YYH16中外切β-1,3-葡聚糖酶基因转录差异分析第108页
    5.5 小结第108-109页
第六章 全文总结与展望第109-111页
    6.1 全文总结第109页
    6.2 本研究的特色与创新点第109-110页
    6.3 下一步研究计划第110-111页
参考文献第111-122页
附录:缩略词表第122-123页
致谢第123-124页
作者简介第124页

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