英文缩略表 | 第7-9页 |
中文摘要 | 第9-11页 |
英文摘要 | 第11-12页 |
前言 | 第13-16页 |
第一部分:ART对 植入前胚胎全基因组DNA甲基化程度的影响 | 第16-26页 |
一、材料 | 第16-18页 |
1.1 实验标本 | 第16-17页 |
1.2 主要仪器 | 第17页 |
1.3 主要试剂 | 第17-18页 |
1.4.主要试剂配置 | 第18页 |
二、方法 | 第18-22页 |
2.1 体内组胚胎、超排组胚胎、IVF 组胚胎和 IVM 组胚胎的获取 | 第18-20页 |
2.2 胚胎免疫荧光染色步骤 | 第20-22页 |
2.3 统计学处理 | 第22页 |
三、结果 | 第22-23页 |
3.1 囊胚期体内组、超排组、IVF组、IVM组DNA甲基化激光共聚焦图片 | 第22-23页 |
3.2 实验数据 | 第23页 |
四、讨论 | 第23-26页 |
第二部分:ART对植入前胚胎印记基因Igf2和Grb10转录表达的影响 | 第26-36页 |
一、材料 | 第26-28页 |
1.1 实验标本 | 第26-27页 |
1.2 主要仪器 | 第27页 |
1.3 主要试剂 | 第27页 |
1.4 主要试剂配置 | 第27-28页 |
二、方法 | 第28-30页 |
2.1 胚胎的获取 | 第28页 |
2.2 提取单个囊胚的RNA | 第28页 |
2.3 逆转录合成cDNA | 第28页 |
2.4 定量PCR反应 | 第28-29页 |
2.5 统计学处理 | 第29-30页 |
三、结果 | 第30-34页 |
3.1 实时荧光定量PCR反应 | 第30-32页 |
3.2 定量分析结果 | 第32-34页 |
四、讨论 | 第34-36页 |
第三部分:ART对小鼠植入前胚胎中Grb10 CpG岛甲基化的影响 | 第36-49页 |
一、材料 | 第36-38页 |
1.1 实验标本 | 第36-37页 |
1.2 主要实验仪器 | 第37页 |
1.3 主要试剂 | 第37-38页 |
1.4 主要试剂配制 | 第38页 |
二、方法 | 第38-42页 |
2.1 胚胎的获取 | 第38页 |
2.2 单个囊胚的亚硫酸氢盐修饰 | 第38-39页 |
2.3 甲基化引物设计 | 第39-40页 |
2.4 小鼠Grb10甲基化分析的PCR扩增 | 第40-42页 |
三、结果 | 第42-46页 |
3.1 小鼠印记基因Grb10的CGI1甲基化比率分析 | 第42-46页 |
四、讨论 | 第46-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-56页 |
综述 | 第56-69页 |
参考文献 | 第64-69页 |
致谢 | 第69页 |