| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 前言 | 第12-15页 |
| 第一部分：玻璃化冷冻对小鼠胚胎体外发育的影响 | 第15-22页 |
| 材料 | 第15-17页 |
| 1.1 实验标本 | 第15-16页 |
| 1.2 主要仪器和耗材 | 第16页 |
| 1.3 主要试剂 | 第16-17页 |
| 方法 | 第17-18页 |
| 2.1 着床前胚胎的收集 | 第17页 |
| 2.2 玻璃化冷冻及复苏溶液 | 第17页 |
| 2.3 胚胎的冷冻 | 第17-18页 |
| 2.4 胚胎的复苏 | 第18页 |
| 2.5 胚胎培养 | 第18页 |
| 2.6 胚胎分级 | 第18页 |
| 结果 | 第18-20页 |
| 3.1 实验组图 | 第19页 |
| 3.2 实验数据 | 第19-20页 |
| 讨论 | 第20-22页 |
| 第二部分：玻璃化冷冻对小鼠植入前胚胎基因组DNA甲基化的影响 | 第22-31页 |
| 材料 | 第22-24页 |
| 1.1 实验标本 | 第22-23页 |
| 1.2 主要仪器 | 第23页 |
| 1.3 主要试剂 | 第23页 |
| 1.4 主要试剂的配置 | 第23-24页 |
| 方法 | 第24-26页 |
| 2.1 体内胚、体外胚和玻璃化冷冻胚的获取 | 第24页 |
| 2.2 胚胎免疫荧光染色步骤 | 第24-26页 |
| 2.3 统计学处理 | 第26页 |
| 结果 | 第26-29页 |
| 3.1 小鼠各阶段胚胎DNA甲基化免疫荧光 | 第26-29页 |
| 讨论 | 第29-31页 |
| 第三部分：玻璃化冷冻对小鼠胚胎印记基因Grb10转录水平的影响 | 第31-41页 |
| 材料 | 第31-33页 |
| 1.1 实验标本 | 第31-32页 |
| 1.2 主要仪器 | 第32页 |
| 1.3 主要试剂 | 第32-33页 |
| 1.4 主要试剂的配置 | 第33页 |
| 方法 | 第33-35页 |
| 2.1 获取胚胎 | 第33页 |
| 2.2 提取体内组、体外组和玻璃化冷冻组囊胚的RNA | 第33-34页 |
| 2.3 逆转录合成cDNA | 第34页 |
| 2.4 定量PCR反应 | 第34-35页 |
| 2.5 统计学处理 | 第35页 |
| 结果 | 第35-39页 |
| 3.1 实时荧光定量PCR反应 | 第35-38页 |
| 3.2 电泳选择PCR产物明确条带大小 | 第38页 |
| 3.3 统计结果 | 第38页 |
| 3.4 定量分析结果 | 第38-39页 |
| 讨论 | 第39-41页 |
| 第四部分：玻璃化冷冻对小鼠胚胎印记基因Grb10 DNA甲基化的影响 | 第41-52页 |
| 材料 | 第41-43页 |
| 1.1 实验标本 | 第41-42页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第42页 |
| 1.3 主要试剂 | 第42页 |
| 1.4 主要试剂配制 | 第42-43页 |
| 方法 | 第43-47页 |
| 2.1 获取胚胎 | 第43页 |
| 2.2 单个囊胚的亚硫酸氢盐修饰 | 第43-44页 |
| 2.3 甲基化引物设计 | 第44-45页 |
| 2.4 小鼠Grb10甲基化分析的PCR扩增 | 第45-47页 |
| 结果 | 第47-49页 |
| 3.1 小鼠Grb10基因CpG岛分析 | 第47页 |
| 3.2 小鼠Grb10基因CGI1甲基化分析 | 第47页 |
| 3.3 统计结果 | 第47-49页 |
| 讨论 | 第49-52页 |
| 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 综述 | 第60-68页 |
| 参考文献 | 第66-68页 |
