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环境因子对Pseudoalteromonas issachenkonii HZ胞外多糖合成及相关基因表达调控的影响研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
第1章 绪论第12-26页
    1.1 微生物多糖综述第12-16页
        1.1.1 微生物多糖第12页
        1.1.2 微生物多糖的分类第12-13页
        1.1.3 胞外多糖的组成和结构第13页
        1.1.4 胞外多糖的功能第13-15页
        1.1.5 几种重要的胞外多糖第15-16页
    1.2 微生物多糖的研究方法第16-17页
        1.2.1 微生物多糖的提取方法第16页
        1.2.2 微生物多糖的纯化方法第16页
        1.2.3 多糖的单糖组成分析第16-17页
        1.2.4 多糖红外光谱分析第17页
        1.2.5 核磁共振分析第17页
    1.3 海洋交替假单胞菌胞外多糖的研究现状第17-18页
    1.4 环境因子对多糖合成的影响第18-19页
    1.5 基因定量方法—荧光定量PCR第19-22页
        1.5.1 荧光定量PCR技术第19-21页
        1.5.2 实时荧光定量PCR技术的应用第21-22页
    1.6 立题依据和研究内容第22-26页
        1.6.1 立题依据第22-23页
        1.6.2 研究内容第23-24页
        1.6.3 技术路线第24-26页
第2章 不同环境因子下Pseudoalteromonas issachenkonii HZ胞外多糖的提取、分离及纯化第26-34页
    2.1 材料第26-28页
        2.1.1 菌株与培养基第26-27页
        2.1.2 试剂第27页
        2.1.3 仪器与设备第27-28页
    2.2 实验方法第28-30页
        2.2.1 海洋细菌Pseudoalteromonas issachenkonii HZ胞外多糖的提取第28页
        2.2.2 多糖样品中的蛋白质的去除第28页
        2.2.3 DEAE-52 纯化胞外多糖第28-29页
        2.2.4 Sepharose G-100 对胞外多糖除杂第29页
        2.2.5 半透膜除盐第29-30页
        2.2.6 冷冻干燥第30页
    2.3 结果与讨论第30-31页
        2.3.1 胞外多糖除蛋白后紫外扫描曲线第30页
        2.3.2 DEAE-52 离子交换层析结果第30-31页
        2.3.3 Sepharose G-100 柱层析结果第31页
    2.4 本章小结第31-34页
第3章 不同环境因子下Pseudoalteromonas issachenkonii HZ产胞外多糖结构的差异第34-44页
    3.1 材料第35页
        3.1.1 试剂第35页
        3.1.2 仪器与设备第35页
    3.2 实验方法第35-36页
        3.2.1 胞外多糖单糖组成分析第35-36页
        3.2.2 胞外多糖的傅里叶红外光谱分析第36页
        3.2.3 胞外多糖的核磁共振解析第36页
    3.3 结果与讨论第36-42页
        3.3.1 不同环境因子条件下胞外多糖单糖组成结果第36-37页
        3.3.2 不同环境因子条件下胞外多糖红外光谱分析结果第37-38页
        3.3.3 不同环境因子条件下核磁共振波谱分析结果第38-42页
    3.4 本章小结第42-44页
第4章 不同环境因子对海洋细菌Pseudoalteromonas issachenkonii HZ引导糖基转移酶基因表达的影响第44-62页
    4.1 材料第45-46页
        4.1.1 菌株与培养基第45页
        4.1.2 试剂第45-46页
        4.1.3 仪器与设备第46页
    4.2 实验方法第46-52页
        4.2.1 菌种活化第46-47页
        4.2.2 DNA的提取第47页
        4.2.3 引物的设计与合成第47页
        4.2.4 PCR反应体系与程序第47-48页
        4.2.5 PCR产物的纯化第48-49页
        4.2.6 引导糖基转移酶序列分析第49页
        4.2.7 温度变化对引导糖基转移酶基因表达的影响第49页
        4.2.8 pH对引导糖基转移酶基因表达的影响第49页
        4.2.9 海盐浓度对引导糖基转移酶基因表达的影响第49页
        4.2.10 RNA的提取及cDNA的反转录合成第49-51页
        4.2.11 荧光定量PCR体系的建立第51-52页
        4.2.12 实验数据的处理第52页
    4.3 结果与讨论第52-59页
        4.3.1 基因组DNA的提取第52-53页
        4.3.2 引导糖基转移酶基因的扩增第53-54页
        4.3.3 细菌总RNA的提取第54页
        4.3.4 引物特异性分析第54-56页
        4.3.5 引物扩增效率验证第56-57页
        4.3.6 引导糖基转移酶基因对温度变化的响应第57-58页
        4.3.7 引导糖基转移酶对海盐浓度变化的响应第58页
        4.3.8 引导糖基转移酶对pH变化的响应第58-59页
    4.4 本章小结第59-62页
第5章 结论与展望第62-64页
    5.1 结论第62-63页
    5.2 展望第63-64页
参考文献第64-70页
致谢第70-72页
在学期间主要科研成果第72页
    一、发表学术论文第72页
    二、其他科研成果第72页

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