| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 英文缩略词中英文注释表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-25页 |
| 1.1 缺血性脑血管病概述 | 第15-16页 |
| 1.2 线粒体在缺血性脑血管病中的重要作用 | 第16-20页 |
| 1.2.1 缺血阶段：氧化磷酸化去磷酸化及钙离子的作用 | 第16-17页 |
| 1.2.2 再灌注阶段：氧化磷酸化过渡激活、膜电位超极化及ROS生成 | 第17-18页 |
| 1.2.3 迟发性神经元死亡：凋亡样表型 | 第18-19页 |
| 1.2.4 线粒体功能障碍 | 第19页 |
| 1.2.5 线粒体解偶联 | 第19-20页 |
| 1.3 靶向线粒体通透性转换孔治疗缺血性脑血管病 | 第20-23页 |
| 1.3.1 mPTP结构与功能关系研究进展 | 第20-21页 |
| 1.3.2 mPTP开放的影响 | 第21-22页 |
| 1.3.3 靶向mPTP降低缺血再灌注损伤 | 第22-23页 |
| 1.4 没食子酸（GA）的研究进展 | 第23页 |
| 1.5 本课题研究思路 | 第23-25页 |
| 第二章 GA保护线粒体功能对抗脑缺血再灌注损伤 | 第25-44页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-28页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第25页 |
| 2.1.2 实验动物 | 第25页 |
| 2.1.3 药品与试剂 | 第25-27页 |
| 2.1.4 实验仪器 | 第27-28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-34页 |
| 2.2.1 细胞培养 | 第28页 |
| 2.2.2 Na_2S_2O_4致SH-SY5Y细胞缺氧复氧模型建立 | 第28页 |
| 2.2.3 MTT法检测细胞活性 | 第28-29页 |
| 2.2.4 DCFH-DA探针法检测细胞内ROS水平 | 第29页 |
| 2.2.5 MitoSOX Red探针法检测线粒体内ROS水平 | 第29页 |
| 2.2.6 脂质氧化检测试剂盒检测细胞内MDA含量 | 第29-30页 |
| 2.2.7 荧光素酶法测定细胞内ATP含量 | 第30页 |
| 2.2.8 JC-1 染色检测线粒体膜电位 | 第30页 |
| 2.2.9 Clark氧电极检测细胞耗氧量 | 第30-31页 |
| 2.2.10 大鼠脑中动脉栓塞致局灶性脑缺血再灌注损伤模型(MCAO） | 第31-32页 |
| 2.2.11 TTC染色检测大鼠大脑梗死体积 | 第32页 |
| 2.2.12 H&E染色检测大鼠大脑病理改变 | 第32-33页 |
| 2.2.13 TUNEL染色检测大鼠大脑神经细胞凋亡 | 第33页 |
| 2.2.14 大鼠大脑缺血半暗带线粒体提取 | 第33页 |
| 2.2.15 超氧化物歧化酶试剂盒检测大鼠大脑SOD含量 | 第33页 |
| 2.2.16 Western blot检测蛋白的水平 | 第33-34页 |
| 2.2.17 统计学分析 | 第34页 |
| 2.3 实验结果 | 第34-43页 |
| 2.3.1 GA对抗Na_2S_2O_4诱导的SH-SY5Y细胞损伤 | 第34-36页 |
| 2.3.2 GA对抗Na_2S_2O_4诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激损伤 | 第36-37页 |
| 2.3.3 GA对抗Na_2S_2O_4诱导的SH-SY5Y细胞线粒体ROS产生 | 第37页 |
| 2.3.4 GA对抗Na_2S_2O_4诱导SH-SY5Y细胞线粒体功能障碍 | 第37-39页 |
| 2.3.5 GA降低MCAO大鼠大脑梗死体积 | 第39-40页 |
| 2.3.6 GA降低MCAO缺血半暗带神经细胞凋亡水平 | 第40-41页 |
| 2.3.7 GA抑制MCAO缺血半暗带神经细胞Cyt C释放 | 第41-42页 |
| 2.3.8 GA维持MCAO缺血半暗带神经细胞SOD活力 | 第42-43页 |
| 2.4 本章小结 | 第43-44页 |
| 第三章 GA靶向mPTP保护神经细胞 | 第44-55页 |
| 3.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 3.1.1 细胞株 | 第44页 |
| 3.1.2 实验动物 | 第44页 |
| 3.1.3 药品与试剂 | 第44-45页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-48页 |
| 3.2.1 细胞培养 | 第45页 |
| 3.2.2 H_2O_2致SH-SY5Y细胞mPTP开放模型建立 | 第45页 |
| 3.2.3 MTT法检测细胞活性 | 第45页 |
| 3.2.4 Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡 | 第45页 |
| 3.2.5 Calcein AM-CoCl2染色法检测mPTP的开放 | 第45-46页 |
| 3.2.6 Cyt C免疫染色法检测mPTP的开放 | 第46页 |
| 3.2.7 JC-1 染色检测线粒体膜电位 | 第46页 |
| 3.2.8 离体肝脏线粒体的制备 | 第46页 |
| 3.2.9 离体肝脏线粒体Ca~(2+)摄取能力的测定 | 第46-47页 |
| 3.2.10 脂质氧化检测试剂盒检测细胞内MDA含量 | 第47页 |
| 3.2.11 超氧化物歧化酶试剂盒检测细胞内SOD含量 | 第47页 |
| 3.2.12 Western blot检测蛋白水平 | 第47-48页 |
| 3.2.13 统计分析 | 第48页 |
| 3.3 实验结果 | 第48-54页 |
| 3.3.1 GA对抗H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞损伤 | 第48-49页 |
| 3.3.2 GA通过线粒体途径对抗H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞凋亡 | 第49-50页 |
| 3.3.3 GA抑制H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞mPTP开放 | 第50-51页 |
| 3.3.4 GA抑制H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞线粒体膜电位下降 | 第51-52页 |
| 3.3.5 GA提高离体肝脏线粒体钙摄取能力 | 第52-53页 |
| 3.3.6 GA抑制H_2O_2诱导SH-SY5Y细胞MDA的产生而对SOD活力无显著性影响 | 第53-54页 |
| 3.4 本章小结 | 第54-55页 |
| 第四章 GA作用mPTP的分子机制 | 第55-69页 |
| 4.1 实验材料 | 第55-56页 |
| 4.1.1 细胞株 | 第55页 |
| 4.1.2 实验动物 | 第55页 |
| 4.1.3 药品与试剂 | 第55页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第55-56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-59页 |
| 4.2.1 细胞的给药处理 | 第56页 |
| 4.2.2 PPID异构酶活力检测 | 第56-57页 |
| 4.2.3 免疫共沉淀法检测离体肝脏线粒体CypD与ANT结合水平 | 第57页 |
| 4.2.4 Calcein AM-CoCl2染色检测m PTP的开放 | 第57页 |
| 4.2.5 大鼠大脑中动脉栓塞致局灶性脑缺血再灌注损伤模型（MCAO） | 第57-58页 |
| 4.2.6 Western blot检测蛋白的水平 | 第58-59页 |
| 4.2.7 统计分析 | 第59页 |
| 4.3 实验结果 | 第59-67页 |
| 4.3.1 GA增强氨基脯氨酸顺反异构酶异构酶活力 | 第59页 |
| 4.3.2 GA抑制离体肝脏线粒体Cyp D与ANT-1 结合 | 第59-60页 |
| 4.3.3 GA下调SH-SY5Y细胞CypD表达水平 | 第60-61页 |
| 4.3.4 SH-SY5Y细胞ERK磷酸化水平与Cyp D表达水平负相关 | 第61-62页 |
| 4.3.5 MCAO损伤半暗带神经细胞ERK磷酸化水平与CypD表达水平负相关 | 第62-63页 |
| 4.3.6 GA下调SH-SY5Y细胞CypD表达水平与其促进ERK磷酸化有关 | 第63页 |
| 4.3.7 抑制ERK磷酸化逆转GA对抗H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞mPTP开放 | 第63-64页 |
| 4.3.8 抑制ERK磷酸化逆转GA对抗H_2O_2诱导的SH-SY5Y细胞线粒体途径凋亡 | 第64-66页 |
| 4.3.9 抑制ERK磷酸化逆转GA对抗MCAO的神经保护作用 | 第66-67页 |
| 4.4 本章小结 | 第67-69页 |
| 第五章 讨论 | 第69-73页 |
| 结论与展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 读硕士期间发表的学术论文 | 第88页 |
