| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 一 前言 | 第13-35页 |
| 1 植物糖基转移酶和小分子化合物糖基化 | 第13-20页 |
| 1.1 植物糖基转移酶是多基因家族 | 第13-15页 |
| 1.2 糖基转移酶的生物学功能 | 第15-20页 |
| 2 植物免疫反应 | 第20-32页 |
| 2.1 PAMP触发的的免疫反应(PTI) | 第21-25页 |
| 2.2 效应蛋白触发的免疫反应(ETI) | 第25-32页 |
| 3 本研究的目的意义 | 第32-35页 |
| 二 材料与方法 | 第35-59页 |
| 1 实验材料 | 第35-39页 |
| 1.1 植物材料 | 第35页 |
| 1.2 载体与菌株 | 第35页 |
| 1.3 实验试剂与仪器 | 第35-39页 |
| 2 实验方法 | 第39-59页 |
| 2.1 植物材料种植 | 第39页 |
| 2.2 植物RNA的提取 | 第39-40页 |
| 2.3 RNA的反转录 | 第40页 |
| 2.4 PCR扩增 | 第40-42页 |
| 2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第42页 |
| 2.6 DNA片断的纯化回收(天根试剂盒) | 第42页 |
| 2.7 克隆基因的连接 | 第42页 |
| 2.8 大肠杆菌感受态细胞的制备和质粒转化 | 第42-45页 |
| 2.9 农杆菌GV3101感受态细胞的制备以及质粒转化 | 第45页 |
| 2.10 拟南芥过表达转基因植株的获得以及纯和体筛选 | 第45-46页 |
| 2.11 GUS染色分析 | 第46页 |
| 2.12 DAB染色 | 第46-47页 |
| 2.13 植物组织中SA含量的测定 | 第47-48页 |
| 2.14 PstDC3000感染实验 | 第48-49页 |
| 2.15 FOC699-GFP感染实验 | 第49页 |
| 2.16 基因枪转化洋葱表皮细胞 | 第49-51页 |
| 2.17 植物DNA提取 | 第51页 |
| 2.18 原核表达载体pGEX3H-UGT的构建 | 第51-52页 |
| 2.19 原核表达载体pGEX3H-UGT转化表达菌株XL1-Blue | 第52页 |
| 2.20 GST融合蛋白的表达纯化 | 第52-55页 |
| 2.21 酶促反应条件 | 第55-56页 |
| 2.22 植物总蛋白的提取 | 第56页 |
| 2.23 拟南芥T-DNA插入突变纯合体鉴定 | 第56-59页 |
| 三 结果与分析 | 第59-105页 |
| 1 拟南芥UGT73C7基因的表达特异性研究 | 第59-64页 |
| 1.1 病原菌及SA处理UGT73C7基因的表达分析 | 第59-60页 |
| 1.2 UGT73C7启动子克隆及表达分析 | 第60-64页 |
| 1.3 小结 | 第64页 |
| 2 拟南芥糖基转移酶基因UGT73C7过表达及突变体表型和作用机理分析 | 第64-82页 |
| 2.1 拟南芥UGT73C7过表达株系的获得及纯合体筛选 | 第64-68页 |
| 2.2 拟南芥UGT73C7过表达纯合体株系的表型和生理分析 | 第68-78页 |
| 2.3 拟南芥UGT73C7基因RNAi干扰植株的获得及筛选 | 第78-81页 |
| 2.4 拟南芥UGT73C7干扰植株的表型 | 第81-82页 |
| 2.5 小结 | 第82页 |
| 3 拟南芥UGT73C7糖基转移酶蛋白的亚细胞定位 | 第82-84页 |
| 3.1 UGT73C7与GFP融合载体构建 | 第82-83页 |
| 3.2 UGT73C7糖基转移酶蛋白的亚细胞定位 | 第83-84页 |
| 3.3 小结 | 第84页 |
| 4 UGT73C7过表达体与各个突变体杂交株系获得及表型分析 | 第84-98页 |
| 4.1 拟南芥UGT73C7过表达体与Ws杂交纯合体的筛选及表型生理分析 | 第84-89页 |
| 4.2 拟南芥UGT73C7OE与pad4-1纯合体的筛选及表型生理分析 | 第89-92页 |
| 4.3 拟南芥UGT73C70E与eds1-1纯合体的筛选及表型生理分析 | 第92-95页 |
| 4.4 拟南芥UGT73C7OE与NaHG杂交株系的筛选及表型生理分析 | 第95-98页 |
| 4.5 小结 | 第98页 |
| 5 糖基转移酶UGT73C7底物鉴定 | 第98-105页 |
| 5.1 原核表达载体的构建及原核蛋白的纯化 | 第98-102页 |
| 5.2 体外酶活性鉴定 | 第102页 |
| 5.3 植物总蛋白的提取及体外酶活性鉴定 | 第102-103页 |
| 5.4 小结 | 第103-105页 |
| 四 讨论 | 第105-113页 |
| 1 糖基转移酶UGT73C7在抗病方面的作用 | 第105-106页 |
| 2 糖基转移酶基因UGT73C7过表达体组成型激活植物免疫反应的分子机制 | 第106-109页 |
| 3 糖基转移酶UGT73C7糖基化底物推测 | 第109-111页 |
| 4 糖基转移酶UGT73C7可能的应用价值 | 第111-112页 |
| 5 需要进一步解决的问题 | 第112-113页 |
| 五 总结与创新点 | 第113-115页 |
| 六 其他基因的研究总结 | 第115-129页 |
| 1 植物表达载体的构建及过表达纯和体的获得 | 第115-118页 |
| 1.1 克隆载体的构建 | 第115-116页 |
| 1.2 植物表达载体的构建 | 第116-117页 |
| 1.3 各个基因过表达纯合株系的筛选 | 第117-118页 |
| 1.4 各基因过表达纯合体各转基因株系的表达量分析 | 第118页 |
| 2 植物T-DNA插入突变体纯和体筛选及表达量验证 | 第118-119页 |
| 2.1 植物T-DNA插入突变体纯和体筛选 | 第118-119页 |
| 2.2 植物T-DNA插入突变体纯和体表达量验证 | 第119页 |
| 3 各基因过表达体及突变体抗逆实验 | 第119-124页 |
| 3.1 UGT73B3耐逆性分析 | 第119-121页 |
| 3.2 UGT73C4耐逆性分析 | 第121-122页 |
| 3.3 UGT73C5耐逆性分析 | 第122-124页 |
| 4 各基因作用底物的鉴定 | 第124-129页 |
| 4.1 原核表达载体的构建及原核蛋白的纯化 | 第124-128页 |
| 4.2 体外酶活性鉴定 | 第128-129页 |
| 参考文献 | 第129-139页 |
| 致谢 | 第139-141页 |
| 硕士期间发表论文 | 第141-142页 |
| 学位论文评闽及答辩情况表 | 第142页 |
