致谢 | 第4-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
第一部分 文献综述 | 第9-19页 |
1 人乳头瘤病毒的研究进展 | 第9-14页 |
1.1 HPV的发现及分类 | 第9页 |
1.2 HPV的理化及生物学特性 | 第9-10页 |
1.3 HPV的基因组及编码蛋白 | 第10-11页 |
1.4 HPV的流行病学 | 第11-12页 |
1.5 HPV的感染及致病机制 | 第12-14页 |
1.6 HPV的筛查和预防 | 第14页 |
2 人乳头瘤病毒疫苗的研究进展 | 第14-15页 |
2.1 HPV预防性疫苗 | 第14-15页 |
2.2 HPV治疗性疫苗 | 第15页 |
3 重组蛋白表达策略的选择 | 第15页 |
4 本研究的试验目的和意义 | 第15-16页 |
5 研究内容及技术路线 | 第16-19页 |
5.1 研究内容 | 第16-17页 |
5.2 技术路线 | 第17-19页 |
第二部分 研究内容 | 第19-49页 |
第一章 HPV58-L1蛋白原核表达载体的构建及蛋白诱导表达条件的优化 | 第19-31页 |
1 引言 | 第19页 |
2 材料和方法 | 第19-25页 |
2.1 菌株 | 第19页 |
2.2 主要试剂 | 第19页 |
2.3 主要溶液和培养基的配置 | 第19-20页 |
2.4 HPV58-L1重组蛋白原核表达载体的构建 | 第20-23页 |
2.5 原核表达产物的初步鉴定及可溶性分析 | 第23-24页 |
2.6 重组蛋白HPV58-L1的免疫原性分析 | 第24页 |
2.7 重组蛋白在大肠杆菌中诱导表达条件的优化 | 第24-25页 |
3 试验结果 | 第25-29页 |
3.1 原核表达载体BL21(DE3)-pE-S-HPV58-L1的鉴定 | 第25-26页 |
3.2 HPV58-L1蛋白的免疫原性分析 | 第26-27页 |
3.3 HPV58-L1蛋白在大肠杆菌中诱导表达条件的优化 | 第27-29页 |
4 讨论 | 第29-31页 |
第二章 HPV58-L1蛋白的纯化及免疫评价 | 第31-39页 |
1 引言 | 第31页 |
2 材料和方法 | 第31-34页 |
2.1 主要仪器设备 | 第31页 |
2.2 主要试剂及相关试剂配制 | 第31-32页 |
2.3 主要试验动物 | 第32页 |
2.4 HPV58-L1蛋白纯化条件的摸索 | 第32-33页 |
2.5 动物免疫方案 | 第33页 |
2.6 小鼠的免疫评价 | 第33-34页 |
3 试验结果 | 第34-37页 |
3.1 HPV58-L1蛋白纯化条件的确定 | 第34-35页 |
3.2 免疫效果评价 | 第35-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
第三章 HPV58-L1蛋白植物表达载体的构建及水稻转基因植株的鉴定 | 第39-49页 |
1 引言 | 第39页 |
2 材料和方法 | 第39-45页 |
2.1 主要仪器及设备 | 第39页 |
2.2 菌株及质粒 | 第39-40页 |
2.3 主要试剂 | 第40页 |
2.4 主要溶液和培养基 | 第40-42页 |
2.5 水稻胚乳特异性植物表达载体pCAMBIA1300-pMP3-HPV58-L1的构建 | 第42-43页 |
2.6 水稻胚乳特异性表达载体电转根癌农杆菌 | 第43-44页 |
2.7 水稻胚乳的遗传转化 | 第44-45页 |
2.8 转基因水稻的PCR鉴定 | 第45页 |
3 试验结果 | 第45-48页 |
3.1 植物表达载体p CAMBIA1300-pMP3-HPV58-L1的鉴定 | 第45-46页 |
3.2 重组根癌农杆菌表达载体EHA105-pCAMBIA1300-pMP3-HPV58-L1的鉴定 | 第46-47页 |
3.3 水稻胚乳表达系统的遗传转化 | 第47页 |
3.4 转基因植株的鉴定 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-49页 |
全文总结 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
ABSTRACT | 第57-58页 |
附录 | 第59页 |