中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写词表 | 第12-13页 |
第1章 绪论 | 第13-24页 |
1.1 隐花素的发现 | 第13-14页 |
1.2 隐花素的结构 | 第14-15页 |
1.3 蓝光受体 CRY 的功能 | 第15-19页 |
1.3.1 对光周期控制的开花时间的调节 | 第15-16页 |
1.3.2 调控去黄化作用 | 第16页 |
1.3.3 调节生物钟 | 第16-17页 |
1.3.4 调节气孔开闭及保卫细胞的发育 | 第17-18页 |
1.3.5 其他调控功能 | 第18-19页 |
1.4 CRY 的生理生化特性 | 第19-20页 |
1.4.1 CRY 蛋白的亚细胞定位 | 第19页 |
1.4.2 CRY 蛋白的磷酸化 | 第19-20页 |
1.4.3 CRY 蛋白的降解 | 第20页 |
1.5 CRY 互作蛋白以及介导的信号转导 | 第20-22页 |
1.5.1 CRY 与 COP1 的相互作用 | 第20页 |
1.5.2 CRY 与 PHY 的相互作用 | 第20-21页 |
1.5.3 CRY 与 SPA 的相互作用 | 第21页 |
1.5.4 CRY 与 CIB 的相互作用 | 第21-22页 |
1.5.5 CRY 与 ZTL/LKP1/ADO1 的相互作用 | 第22页 |
1.6 立题依据 | 第22-24页 |
第2章 拟南芥蓝光受体 CRY2 互作蛋白的筛选 | 第24-46页 |
2.1 实验材料 | 第24-28页 |
2.1.1 实验菌株及载体 | 第24-25页 |
2.1.2 拟南芥预制文库 | 第25页 |
2.1.3 实验仪器 | 第25页 |
2.1.4 实验试剂及试剂盒 | 第25-26页 |
2.1.5 实验溶液及配制 | 第26-28页 |
2.2 实验方法 | 第28-39页 |
2.2.1 拟南芥 CRY2 酵母双杂交诱饵载体的构建 | 第28-33页 |
2.2.2 拟南芥CRY2相互作用蛋白的酵母双杂交cDNA文库筛选 | 第33-36页 |
2.2.3 阳性酵母筛库结果鉴定及分析 | 第36-39页 |
2.3 结果与分析 | 第39-46页 |
2.3.1 拟南芥 CRY2 酵母双杂交诱饵载体构建 | 第39-40页 |
2.3.2 酵母筛库阳性克隆 X-gal 分析筛选 | 第40-41页 |
2.3.3 CIK1 生物信息学分析 | 第41-44页 |
2.3.4 回转互作验证 | 第44-46页 |
第3章 拟南芥蛋白激酶 CIK1 与 CRY2 蛋白相互作用的验证 | 第46-63页 |
3.1 实验材料 | 第46-48页 |
3.1.1 植物材料 | 第46页 |
3.1.2 实验菌种及载体 | 第46页 |
3.1.3 实验仪器 | 第46页 |
3.1.4 实验药品 | 第46-47页 |
3.1.5 PCR 引物 | 第47-48页 |
3.2 实验方法 | 第48-52页 |
3.2.1 拟南芥培养 | 第48页 |
3.2.2 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第48-50页 |
3.2.3 酵母双杂交分析 CIK1 与 CRY2 的互作 | 第50-51页 |
3.2.4 双分子荧光互补分析 CIK1 和 CRY2 的互作 | 第51-52页 |
3.3 结果与分析 | 第52-63页 |
3.3.1 拟南芥 RNA 提取的质量检测 | 第52-53页 |
3.3.2 酵母双杂交分析 CIK1 与 CRY2 的互作及互作特性 | 第53-57页 |
3.3.3 拟南芥 CIK1 的亚细胞定位 | 第57-60页 |
3.3.4 双分子荧光互补分析 CIK1 与 CRY2 的互作 | 第60-63页 |
第4章 拟南芥蛋白激酶 CIK1 的克隆及转基因植株的获得 | 第63-73页 |
4.1 实验材料 | 第63-65页 |
4.1.1 植物材料 | 第63页 |
4.1.2 实验菌种及载体 | 第63页 |
4.1.3 实验仪器 | 第63页 |
4.1.4 实验药品 | 第63-65页 |
4.1.5 PCR 引物 | 第65页 |
4.2 实验方法 | 第65-69页 |
4.2.1 拟南芥培养 | 第65页 |
4.2.2 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第65页 |
4.2.3 通过 In-Fusion 技术构建表达载体 pEGAD-3×HA-Luc-CIK1 | 第65页 |
4.2.4 通过 Gateway 技术构建表达载体 p120-CIK1 | 第65-66页 |
4.2.5 农杆菌电击转化感受态的制备 | 第66页 |
4.2.6 农杆菌电击转化 | 第66-67页 |
4.2.7 农杆菌阳性克隆验证 | 第67页 |
4.2.8 拟南芥蘸花侵染 | 第67页 |
4.2.9 阳性苗的筛选 | 第67-68页 |
4.2.10 转基因拟南芥的 Western Blot 检测 | 第68-69页 |
4.3 结果与分析 | 第69-73页 |
4.3.1 重组植物表达载体的农杆菌转化 | 第69-70页 |
4.3.2 阳性植株的筛选 | 第70-73页 |
第5章 讨论 | 第73-75页 |
第6章 结论与展望 | 第75-77页 |
6.1 结论 | 第75页 |
6.2 展望 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-88页 |
作者简介 | 第88-89页 |
致谢 | 第89页 |