| 中文摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词及符号表 | 第6-11页 |
| 一、引言 | 第11-17页 |
| 1 疱疹病毒UL22基因及其编码糖蛋白gH的研究进展 | 第11-16页 |
| 1.1 疱疹病毒的基本特征 | 第11页 |
| 1.2 UL22基因序列及其编码蛋白的结构特点 | 第11-13页 |
| 1.2.1 UL22基因序列特点 | 第11-12页 |
| 1.2.2 糖蛋白gH的特点 | 第12-13页 |
| 1.2.3 糖蛋白gH的功能域 | 第13页 |
| 1.3 疱疹病毒糖蛋白gH的功能 | 第13-15页 |
| 1.3.1 介导病毒的入侵和细胞间的传播 | 第13页 |
| 1.3.2 在膜融合过程中的作用 | 第13-14页 |
| 1.3.3 抗原性 | 第14-15页 |
| 1.3.4 抗病毒作用 | 第15页 |
| 1.4 疱疹病毒糖蛋白gH与其它蛋白的相互作用 | 第15-16页 |
| 1.4.1 糖蛋白gH和gL的相互作用 | 第15页 |
| 1.4.2 糖蛋白gH与gE的相互作用 | 第15页 |
| 1.4.3 第三蛋白与gH/gL复合体的相互作用 | 第15-16页 |
| 1.5 展望 | 第16页 |
| 2 选题目的及意义 | 第16-17页 |
| 二、实验研究 | 第17-48页 |
| 1 实验材料 | 第17-20页 |
| 1.1 基因序列 | 第17-18页 |
| 1.2 毒株、菌种、载体及细胞 | 第18页 |
| 1.3 主要试剂 | 第18页 |
| 1.4 主要试剂的配制 | 第18-20页 |
| 1.5 主要仪器 | 第20页 |
| 1.6 实验动物 | 第20页 |
| 2 实验方法 | 第20-30页 |
| 2.1 DPV UL22基因序列及其编码蛋白的生物信息学分析 | 第20-21页 |
| 2.1.1 DPV UL22基因的核苷酸序列分析 | 第20页 |
| 2.1.2 DPV UL22基因编码蛋gH的生物信息学分析 | 第20页 |
| 2.1.3 同源性分析 | 第20-21页 |
| 2.2 DPV UL22基因的克隆表达、蛋白纯化及多抗制备 | 第21-27页 |
| 2.2.1 DPV UL22基因的克隆 | 第21-22页 |
| 2.2.2 UL22截段基因gHt重组原核表达质粒的构建 | 第22-23页 |
| 2.2.3 重组蛋白gHt的诱导表达及条件优化 | 第23-24页 |
| 2.2.4 重组蛋白gHt的纯化及鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.5 兔抗DPV gHt多克隆抗体的制备 | 第25-27页 |
| 2.3 DPV UL22编码蛋白gH在感染DEF中的定位分析 | 第27页 |
| 2.3.1 间接免疫荧光检测DPV gH蛋白在DEF的定位 | 第27页 |
| 2.3.2 gH蛋白在细胞内定位的动态分析 | 第27页 |
| 2.4 DPV gH和gHt真核表达载体的构建及表达分析 | 第27-30页 |
| 2.4.1 DPV UL22基因和UL22截段基因重组真核表达质粒的构建 | 第27-28页 |
| 2.4.2 HEK293细胞的培养 | 第28-29页 |
| 2.4.3 重组质粒pCMV-HA-gH和pCMV-HA-gHt转染HEK293细胞 | 第29页 |
| 2.4.4 重组质粒的表达分析 | 第29-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-44页 |
| 3.1 DPV UL22基因序列及其编码蛋白的生物信息学分析结果 | 第30-38页 |
| 3.1.1 DPV UL22基因的核苷酸序列分析结果 | 第30页 |
| 3.1.2 DPV UL22基因编码蛋白gH的生物信息学分析结果 | 第30-36页 |
| 3.1.3 同源性分析结果 | 第36-38页 |
| 3.2 DPV UL22基因的克隆表达、蛋白纯化及多抗制备结果 | 第38-41页 |
| 3.2.1 DPV UL22基因及截段UL22基因的克隆与鉴定 | 第38页 |
| 3.2.2 原核表达重组质粒pET32c(+)-gHt的构建与鉴定 | 第38页 |
| 3.2.3 gHt的诱导表达及条件优化 | 第38-40页 |
| 3.2.4 重组蛋白gHt的纯化与鉴定 | 第40页 |
| 3.2.5 多抗的制备与鉴定 | 第40-41页 |
| 3.3 DPV UL22编码蛋白gH在感染DEF中的定位分析 | 第41-42页 |
| 3.3.1 特异性试验结果 | 第41-42页 |
| 3.3.2 DPV gH蛋白在感染病毒的宿主细胞中的定位分析及动态检测 | 第42页 |
| 3.4 DPV gH和gHt真核表达载体的构建及表达分析 | 第42-44页 |
| 3.4.1 重组质粒pCMV-HA-gH和pCMV-HA-gHt的构建及鉴定 | 第42页 |
| 3.4.2 重组质粒pCMV-HA-gH和pCMV-HA-gHt的表达分析 | 第42-44页 |
| 4 分析讨论 | 第44-48页 |
| 4.1 DPV UL22基因序列及其编码蛋白的生物信息学分析 | 第44-45页 |
| 4.2 DPV UL22基因的克隆表达、蛋白纯化及多抗制备 | 第45-46页 |
| 4.2.1 引物的设计 | 第45-46页 |
| 4.2.2 重组质粒的构建 | 第46页 |
| 4.2.3 蛋白的表达、纯化及多抗的制备 | 第46页 |
| 4.3 DPV UL22编码蛋白gH在感染DEF中的定位分析 | 第46-47页 |
| 4.4 DPV gH和gHt真核表达载体的构建及表达分析 | 第47-48页 |
| 三、结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介及攻读硕士学位期间学术论文发表 | 第56页 |
