| 摘要 | 第6-9页 |
| Abstract | 第9-12页 |
| 缩略词 | 第21-22页 |
| 第一章 绪言 | 第22-42页 |
| 1.1 干旱胁迫对植物的影响及植物响应干旱胁迫的机制研究 | 第22-24页 |
| 1.1.1 干旱对植物的影响 | 第22-24页 |
| 1.1.1.1 植物生长受到抑制 | 第22页 |
| 1.1.1.2 膜及膜系统受到伤害 | 第22-23页 |
| 1.1.1.3 干旱胁迫对光合作用的影响 | 第23页 |
| 1.1.1.4 干旱影响植物抗氧化系统 | 第23-24页 |
| 1.1.1.5 干旱对植物激素和物质代谢的影响 | 第24页 |
| 1.2 植物缓解干旱胁迫的机制 | 第24-27页 |
| 1.2.1 植物缓解干旱胁迫的生理机制 | 第25-26页 |
| 1.2.2 植物缓解干旱的分子机制 | 第26-27页 |
| 1.3 植物质膜H~+-ATPase的研究进展 | 第27-32页 |
| 1.3.1 质膜H~+-ATPase结构 | 第27-28页 |
| 1.3.2 质膜H~+-ATPase的功能 | 第28-30页 |
| 1.3.2.1 产生电化学势梯度,参与促进物质的次级跨膜运输 | 第28-29页 |
| 1.3.2.2 质膜H~+-ATPase调节植物细胞内pH的稳定 | 第29页 |
| 1.3.2.3 参与调节气孔开启和关闭 | 第29页 |
| 1.3.2.4 质膜H~+-ATPase参与植物细胞生长调节 | 第29-30页 |
| 1.3.2.5 质膜H~+-ATPase参与信号传导 | 第30页 |
| 1.3.3 质膜H~+-ATPase对逆境胁迫的响应 | 第30-31页 |
| 1.3.4 逆境胁迫对质膜H~+-ATPase磷酸化水平的影响 | 第31-32页 |
| 1.4 植物14-3-3蛋白的研究进展 | 第32-38页 |
| 1.4.1 14-3-3蛋白的结构特征 | 第32-33页 |
| 1.4.2 14-3-3蛋白的功能 | 第33-37页 |
| 1.4.2.1 植物14-3-3蛋白对种子萌发的调节作用 | 第33页 |
| 1.4.2.2 调控植物发育过程的信号转导 | 第33-35页 |
| 1.4.2.3 14-3-3蛋白参与植物代谢调节 | 第35页 |
| 1.4.2.4 14-3-3蛋白参与蛋白的定位的调节 | 第35-36页 |
| 1.4.2.5 14-3-3蛋白调控植物细胞周期 | 第36页 |
| 1.4.2.6 14-3-3蛋白应答逆境胁迫 | 第36-37页 |
| 1.4.4 植物中14-3-3蛋白调节质膜H~+-ATPase的活性 | 第37-38页 |
| 1.5 14-3-3蛋白、质膜H~+-ATPase以及H_2O_2调控气孔的机制 | 第38-39页 |
| 1.6 本研究中所用的4种转基因烟草的来源 | 第39-40页 |
| 1.7 本研究的目的和意义 | 第40-42页 |
| 第二章 野生型烟草14-3-3蛋白与H~+-ATPase应答PEG模拟干旱胁迫机理分析 | 第42-59页 |
| 2.1 材料与方法 | 第42-48页 |
| 2.1.1 烟草的培养 | 第42页 |
| 2.1.2 14-3-3蛋白抗体、质膜H~+-ATPase蛋白抗体来源 | 第42页 |
| 2.1.3 野生型烟草在PEG模拟干旱胁迫处理下,植株失水率、叶的蒸腾速率、气孔传导率的测定 | 第42-43页 |
| 2.1.4 可溶性糖、脯氨酸、MDA、可溶性蛋白、H_2O_2的测定 | 第43-44页 |
| 2.1.5 APX、POD、SOD、CAT的测定 | 第44-45页 |
| 2.1.6 表达谱分析 | 第45-47页 |
| 2.1.7 质膜H~+-ATPase活性测定 | 第47页 |
| 2.1.8 质子泵活性测定 | 第47页 |
| 2.1.9 免疫共沉淀(CO-IP)和Western Blot | 第47-48页 |
| 2.1.10 H_2O_2荧光标记染料染色 | 第48页 |
| 2.1.11 数据处理 | 第48页 |
| 2.2 结果与分析 | 第48-56页 |
| 2.2.1 不同浓度PEG模拟干旱胁迫对野生型烟草植株失水率、叶片蒸腾速率以及气孔传导率的影响 | 第48-50页 |
| 2.2.2 不同浓度PEG干旱胁迫下,烟草叶片中脯氨酸、可溶性总蛋白以及可溶性糖的含量变化 | 第50-51页 |
| 2.2.3 不同浓度PEG处理野生型烟草对叶片H_2O_2以及抗氧化物酶含量的影响 | 第51-52页 |
| 2.2.4 H_2O_2荧光探针分析2%PEG处理对烟草叶片保卫细胞积累H_2O_2的叶绿体数量的影响 | 第52-53页 |
| 2.2.5 2%PEG模拟干旱胁迫对烟草叶片中14-3-3基因、PMA基因、APX、CAT、POD基因转录水平的影响 | 第53-54页 |
| 2.2.6 PEG模拟干旱胁迫对质膜H~+-ATPase磷酸化水平及其与14-3-3蛋白相互的影响 | 第54-55页 |
| 2.2.7 干旱胁迫对烟草叶片中气孔开度以及质膜质子泵的影响 | 第55-56页 |
| 2.3 讨论 | 第56-59页 |
| 第三章 PEG模拟干旱胁迫对过量表达SGF14a和抑制14-3-3基因的烟草应答机制的分析 | 第59-76页 |
| 3.1 材料与方法 | 第59-60页 |
| 3.1.1 烟草的培养 | 第59页 |
| 3.1.2 14-3-3蛋白抗体、质膜H+-ATPase蛋白抗体来源 | 第59页 |
| 3.1.3 野生型烟草在PEG模拟干旱胁迫处理下,植株失水率、光合速率、叶的蒸腾速率、气孔传导率的测定 | 第59-60页 |
| 3.1.4 H_2O_2的测定 | 第60页 |
| 3.1.5 APX、POD、CAT的测定 | 第60页 |
| 3.1.6 表达谱分析 | 第60页 |
| 3.1.7 质膜H+-ATPase活性测定 | 第60页 |
| 3.1.8 质子泵活性测定 | 第60页 |
| 3.1.9 免疫共沉淀(CO-IP)和Western Blot | 第60页 |
| 3.1.10 H_2O_2荧光染料染色 | 第60页 |
| 3.1.11 过表达14-3-3-GFP标记的转基因烟草14-3-3表达定位 | 第60页 |
| 3.1.12 数据处理 | 第60页 |
| 3.2 结果 | 第60-73页 |
| 3.2.1 过表达GFP-SGF14a标记的转基因烟草叶片中14-3-3蛋白的表达定位 | 第60-61页 |
| 3.2.2 过表达SGF-14a基因的转基因烟草叶片质膜H~+-ATPase磷酸化及14.3.3 蛋白互作水平 | 第61-62页 |
| 3.2.3 干旱胁迫对过表达SGF14a转基因烟草中Nt14-3-3和抗氧化物酶表达量的影响 | 第62-63页 |
| 3.2.4 过表达SGF14a转基因烟草S23在干旱胁迫下叶片中H_2O_2含量和抗氧化酶活性的变化 | 第63-64页 |
| 3.2.5 H_2O_2荧光探针分析干旱胁迫下转基因烟草保卫细胞中积累H_2O_2的叶绿体数量的变化及气孔开度 | 第64-65页 |
| 3.2.6 干旱胁迫对过量表达SGF14a转基因烟草失水率、光合速率、气孔导率、蒸腾速率的影响 | 第65-66页 |
| 3.2.7 干旱胁迫对过表达SGF14a转基因烟草质膜H~+-ATPase活性及H~+泵活性的影响 | 第66-67页 |
| 3.2.8 抑制烟草14-3-3蛋白表达的转基因烟草质膜H~+-ATPase磷酸化水平以及与14-3-3蛋白互作水平 | 第67-68页 |
| 3.2.9 抑制烟草14-3-3蛋白表达的转基因烟草中Nt14-3-3和抗氧化物酶表达量的分析 | 第68-69页 |
| 3.2.10 干旱胁迫对抑制14-3-3E基因的转基因烟草叶片中H_2O_2含量和抗氧化酶活性的影响 | 第69-70页 |
| 3.2.11 H_2O_2荧光探针分析干旱胁迫下抑制14-3-3蛋白的转基因烟草叶片保卫细胞中积累过氧化氢的叶绿体数量的变化及气孔开度 | 第70-71页 |
| 3.2.12 干旱胁迫对抑制14-3-3E转基因烟草失水率、光合速率、气孔导率、蒸腾速率的影响 | 第71-72页 |
| 3.2.13 干旱胁迫对抑制14-3-3蛋白表达的转基因烟草质膜H~+-ATPase活性及H~+泵活性的影响 | 第72-73页 |
| 3.3 讨论 | 第73-76页 |
| 第四章 PEG模拟干旱胁迫对过量表达ΔGHA2和抑制pma4基因的烟草应答机制的分析 | 第76-89页 |
| 4.1 材料与方法 | 第76-77页 |
| 4.1.1 烟草的培养 | 第76页 |
| 4.1.2 14-3-3 蛋白抗体、质膜H~+-ATPase蛋白抗体来源 | 第76页 |
| 4.1.3 野生型烟草在PEG模拟干旱胁迫处理下,植株失水率、光合速率、叶的蒸腾速率、气孔传导率的测定 | 第76页 |
| 4.1.4 H_2O_2的测息 | 第76页 |
| 4.1.5 APX、POD、CAT的测定 | 第76-77页 |
| 4.1.6 质膜H~+-ATPase活性测定 | 第77页 |
| 4.1.7 质子泵活性测定 | 第77页 |
| 4.1.8 免疫共沉淀(CO-IP)和Western Blot | 第77页 |
| 4.1.9 H_2O_2荧光染料染色 | 第77页 |
| 4.1.10 数据处理 | 第77页 |
| 4.2 结果 | 第77-86页 |
| 4.2.1 干旱胁迫对过量表达ΔGHA2基因的转基因烟草质膜H~+-ATPase和H~+泵活性的影响 | 第77-78页 |
| 4.2.2 H_2O_2荧光探针分析干旱胁迫下过量表达ΔGHA2基因的转基因烟草叶片保卫细胞中积累H_2O_2的叶绿体数量的变化、气孔开度以及烟草叶中H_2O_2含量的测定 | 第78-79页 |
| 4.2.3 干旱胁迫对过量表达ΔGHA2转基因烟草失水率、光合速率、气孔导率、蒸腾速率的影响 | 第79-81页 |
| 4.2.4 抑制pma4基因表达的转基因烟草质膜H~+-ATPase磷酸化及与14-3-3互作水平的变化 | 第81页 |
| 4.2.5 干旱胁迫下抑制pma4基因表达的转基因烟草质膜H~+-ATPase活性和H~+泵活性的变化 | 第81-82页 |
| 4.2.6 H_2O_2荧光探针分析干旱胁迫下抑制pma4基因表达的转基因烟草叶片保卫细胞中积累H_2O_2的叶绿体数量和气孔开度的变化 | 第82-84页 |
| 4.2.7 干旱胁迫下抑制pma4基因表达的转基因烟草叶中H_2O_2含量及抗氧化物酶活性变化 | 第84-85页 |
| 4.2.8 干旱胁迫对抑制pma4基因表达的转基因烟草植株失水率、光合作用速率,叶片蒸腾速率以及气孔传导率的影响 | 第85-86页 |
| 4.3 讨论 | 第86-89页 |
| 第五章 总结与展望 | 第89-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-107页 |
| 附录A：攻读硕士期间发表的论文 | 第107页 |
