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F-box蛋白SlAMR1调控番茄抗坏血酸合成的机理研究

摘要第6-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第10-11页
1 前言第11-25页
    1.1 课题的提出第11-12页
    1.2 植物抗坏血酸的研究进展第12-21页
        1.2.1 抗坏血酸的生理功能第12-13页
        1.2.2 抗坏血酸在植物中的生物合成途径第13-16页
        1.2.3 植物体内抗坏血酸的氧化第16-17页
        1.2.4 植物体内抗坏血酸的循环再生第17-18页
        1.2.5 抗坏血酸的转运第18-19页
        1.2.6 植物体内抗坏血酸合成的调控第19-21页
    1.3 F-box蛋白研究进展第21-25页
        1.3.1 F-box蛋白与泛素蛋白酶体途径第21页
        1.3.2 F-box在植物生长发育过程中的作用第21-25页
2 材料与方法第25-30页
    2.1 植物材料第25页
    2.2 主要试剂、菌株及载体第25页
    2.3 实验方法第25-30页
        2.3.1 番茄抗坏血酸含量测定分析第25-26页
        2.3.2 转基因材料氧化处理第26-27页
        2.3.3 叶绿素含量测定第27页
        2.3.4 丙二醛(MDA)含量测定第27页
        2.3.5 DAB染色第27-28页
        2.3.6 番茄叶片H2O2荧光染色鉴定第28页
        2.3.7 抗坏血酸合成途径底物饲喂处理番茄叶片第28页
        2.3.8 抗坏血酸合成途径底物饲喂处理番茄果实第28-29页
        2.3.9 GMP酶活测量第29页
        2.3.10 GalUR酶活测定第29-30页
3 结果与分析第30-46页
    3.1 F-box蛋白家族的系统进化分析第30-31页
    3.2 F-box蛋白SlAMR1转基因材料叶片抗坏血酸含量分析第31-32页
    3.3 SlAMR1转基因材料果实中抗坏血酸含量及基因表达量分析第32-33页
    3.4 SlAMR1转基因材料对光周期的响应第33-35页
    3.5 转基因材料的氧化胁迫反应第35-36页
    3.6 转基因材料活性氧水平鉴定第36-39页
    3.7 AsA合成途径底物饲喂处理转基因材料叶片第39-40页
    3.8 AsA合成途径底物饲喂处理转基因材料果实第40-41页
    3.9 叶片中GMP酶活测定第41-42页
    3.10 叶片中GalUR酶活测定第42-43页
    3.11 泛素蛋白的Western检测第43-45页
    3.12 SlAMR1互作基因表达量测定第45-46页
4 讨论与展望第46-50页
    4.1 讨论第46-48页
    4.2 后续工作展望第48-50页
参考文献第50-60页
附录第60-64页
    附录一 DNA提取第60页
    附录二 RNA提取和反转录第60-61页
    附录三 实时荧光定量PCR分析第61-62页
    附录四 Western Blot第62-64页
致谢第64页

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