| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-19页 |
| 1.1 几丁质概述 | 第11-14页 |
| 1.1.1 几丁质的结构性质 | 第11-12页 |
| 1.1.2 几丁质的降解 | 第12-13页 |
| 1.1.2.1 化学法 | 第12页 |
| 1.1.2.2 物理法 | 第12页 |
| 1.1.2.3 酶降解法 | 第12-13页 |
| 1.1.3 几丁质及其衍生物的应用 | 第13-14页 |
| 1.1.3.1 在食品工业中的应用 | 第13-14页 |
| 1.1.3.2 在医药临床上的应用 | 第14页 |
| 1.1.3.3 在农业生产上的应用 | 第14页 |
| 1.1.3.4 在轻纺工业的应用 | 第14页 |
| 1.2 几丁质酶概述 | 第14-18页 |
| 1.2.1 几丁质酶的理化性质 | 第14-15页 |
| 1.2.2 微生物产几丁质酶的研究概况 | 第15-17页 |
| 1.2.2.1 产几丁质酶的陆地微生物 | 第15-16页 |
| 1.2.2.2 产几丁质酶的海洋微生物 | 第16-17页 |
| 1.2.3 产几丁质酶菌株的筛选 | 第17页 |
| 1.2.4 微生物几丁质酶的应用 | 第17-18页 |
| 1.3 本课题的意义和研究内容 | 第18-19页 |
| 1.3.1 研究意义 | 第18页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 产几丁质酶的海洋菌株的分离筛选与鉴定 | 第19-34页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第19-21页 |
| 2.1.1 主要实验药品 | 第19-20页 |
| 2.1.2 主要实验仪器 | 第20页 |
| 2.1.3 主要试剂的配制 | 第20-21页 |
| 2.1.3.1 胶体几丁质的制备 | 第20-21页 |
| 2.1.3.2 DNS(3,5-二硝基水杨酸)试剂的制备 | 第21页 |
| 2.1.3.3 NAG标准溶液 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-23页 |
| 2.2.1 培养基 | 第21-22页 |
| 2.2.2 NAG标准曲线的测定 | 第22页 |
| 2.2.3 测定几丁质酶活力的方法 | 第22-23页 |
| 2.3 菌种筛选流程 | 第23-24页 |
| 2.3.1 样品采集 | 第23页 |
| 2.3.2 样品处理 | 第23页 |
| 2.3.3 初筛 | 第23-24页 |
| 2.3.4 复筛 | 第24页 |
| 2.3.5 菌种保藏 | 第24页 |
| 2.4 菌种的鉴证流程 | 第24-28页 |
| 2.4.1 菌株菌落形态特征 | 第24-25页 |
| 2.4.2 细菌生理生化指标测定 | 第25页 |
| 2.4.3 菌株Z-1的分子生物学鉴定 | 第25-28页 |
| 2.4.3.1 细菌16S rDNA引物合成 | 第25页 |
| 2.4.3.2 Z-1菌株DNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.4.3.3 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第26-27页 |
| 2.4.3.4 PCR及其产物测序 | 第27页 |
| 2.4.3.5 序列分析及系统发育树的构建 | 第27-28页 |
| 2.5 结果与分析 | 第28-33页 |
| 2.5.1 胶体几丁质的制备 | 第28页 |
| 2.5.2 菌种的初筛和复筛 | 第28-30页 |
| 2.5.3 菌落形态特征 | 第30页 |
| 2.5.4 菌株Z-1的生理特征 | 第30-31页 |
| 2.5.5 菌种Z-1分子生物学鉴定 | 第31-33页 |
| 2.5.5.1 菌种Z-1的16S rDNA PCR | 第31-32页 |
| 2.5.5.2 16S rDNA PCR产物的序列分析和系统发育树 | 第32-33页 |
| 2.6 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 产几丁质酶菌株Z-1发酵条件的优化 | 第34-45页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第34-35页 |
| 3.1.1 菌种 | 第34页 |
| 3.1.2 主要实验仪器 | 第34页 |
| 3.1.3 主要实验药品 | 第34-35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-36页 |
| 3.2.1 培养基 | 第35页 |
| 3.2.2 菌株Z-1生长曲线的测定 | 第35-36页 |
| 3.2.3 菌株Z-1发酵条件的优化 | 第36页 |
| 3.3 结果与分析 | 第36-44页 |
| 3.3.1 菌株Z-1生长曲线的测定 | 第36-37页 |
| 3.3.2 碳源种类及量的优化 | 第37-39页 |
| 3.3.3 氮源种类及量的优化 | 第39-40页 |
| 3.3.4 KH_2PO_4添加量对菌株Z-1产酶影响 | 第40-41页 |
| 3.3.5 NaCl添加量对菌株Z-1产酶影响 | 第41页 |
| 3.3.6 正交试验 | 第41-42页 |
| 3.3.7 培养基起始pH对菌株Z-1产酶的影响 | 第42-43页 |
| 3.3.8 培养温度对菌株产酶的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.9 摇床转速对菌株产酶的影响 | 第44页 |
| 3.4 小结 | 第44-45页 |
| 第四章 几丁质酶的纯化及酶性质研究 | 第45-55页 |
| 4.1 材料 | 第45-46页 |
| 4.1.1 菌种 | 第45页 |
| 4.1.2 主要实验仪器 | 第45页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第45-46页 |
| 4.2 实验方法 | 第46-48页 |
| 4.2.1 培养基 | 第46页 |
| 4.2.2 菌株Z-1发酵液的制备 | 第46页 |
| 4.2.3 几丁质粗酶液的制备 | 第46-47页 |
| 4.2.3.1 硫酸铵分段沉淀 | 第46页 |
| 4.2.3.2 透析与浓缩 | 第46-47页 |
| 4.2.4 几丁质酶酶学性质的研究 | 第47-48页 |
| 4.2.4.1 几丁质酶最适反应温度的确定 | 第47页 |
| 4.2.4.2 几丁质酶的温度稳定性 | 第47页 |
| 4.2.4.3 几丁质酶在不同温度下不同时间内的热稳定性 | 第47页 |
| 4.2.4.4 几丁质酶最适反应pH的确定 | 第47页 |
| 4.2.4.5 几丁质酶的pH稳定性 | 第47页 |
| 4.2.4.6 几丁质酶降解几丁质 | 第47-48页 |
| 4.2.4.7 几丁质酶降解胶体几丁质 | 第48页 |
| 4.3 结果与分析 | 第48-53页 |
| 4.3.1 硫酸铵分级沉淀 | 第48页 |
| 4.3.2 几丁质酶酶学性质的研究 | 第48-53页 |
| 4.3.2.1 几丁质酶最适反应温度的确定 | 第48-49页 |
| 4.3.2.2 几丁质酶的温度稳定性 | 第49-50页 |
| 4.3.2.3 几丁质酶在不同温度下不同时间内的热稳定性 | 第50-51页 |
| 4.3.2.4 几丁质酶最适反应pH的确定 | 第51页 |
| 4.3.2.5 几丁质酶的pH稳定性 | 第51-52页 |
| 4.3.2.6 几丁质酶降解几丁质 | 第52-53页 |
| 4.3.2.7 几丁质酶降解胶体几丁质 | 第53页 |
| 4.4 小结 | 第53-55页 |
| 第五章 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附录A | 第62页 |
