目录 | 第3-5页 |
中文摘要 | 第5-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
前言 | 第11-12页 |
一. 鼠冠状病毒S蛋白膜内区正电残基对其亚细胞定位的影响 | 第12-27页 |
引言 | 第12-13页 |
1.1 材料与方法 | 第13-14页 |
1.1.1 病毒与细胞 | 第13页 |
1.1.2 抗体 | 第13页 |
1.1.3 质粒构建 | 第13页 |
1.1.4 重组病毒制备与其他相关材料方法 | 第13-14页 |
1.2 实验结果 | 第14-26页 |
1.2.1 真核载体的构建及融合蛋白表达 | 第14-15页 |
1.2.2 非跨膜融合蛋白MS2亚细胞分布 | 第15页 |
1.2.3 膜内区截短的人PDGFR融合蛋白的亚细胞分布 | 第15页 |
1.2.4 流感病毒HAH3膜内区融合蛋白的亚细胞分布 | 第15-19页 |
1.2.5 鼠冠状病毒S膜内区融合蛋白的亚细胞分布 | 第19页 |
1.2.6 重组鼠冠状病毒的构建及外源蛋白表达 | 第19页 |
1.2.7 病毒表达的MHVS膜内区融合蛋白的亚细胞分布 | 第19-26页 |
1.3 讨论 | 第26-27页 |
二. MPER和膜内区转运基序对HIV-1 Env细胞内定位的影响 | 第27-44页 |
引言 | 第27-28页 |
2.1 材料与方法 | 第28-29页 |
2.1.1 病毒与细胞 | 第28页 |
2.1.2 抗体 | 第28页 |
2.1.3 质粒构建 | 第28页 |
2.1.4 重组病毒制备与其他相关材料方法 | 第28-29页 |
2.2 实验结果 | 第29-43页 |
2.2.1 MPER缺失突变融合蛋白的构建与表达 | 第29页 |
2.2.2 MPER缺失突变融合蛋白与高尔基器的共定位 | 第29页 |
2.2.3 MPER缺失突变融合蛋白在鼠巨噬细胞RAW 264.7中的分布 | 第29-33页 |
2.2.4 MPER缺失突变融合蛋白在鼠细胞中的定位 | 第33-35页 |
2.2.5 MPER缺失突变融合蛋白在DC-/L-SIGN转化鼠细胞的分布 | 第35页 |
2.2.6 真核载体表达MPER缺失突变融合蛋白的定位 | 第35页 |
2.2.7 HIV Env跨膜区及膜内区对细胞AP-1/AP-2表达水平的影响 | 第35-38页 |
2.2.8 Mut-41C与细胞AP-1和AP-2的共定位 | 第38页 |
2.2.9 Env膜内区转运基序对融合蛋白细胞定位的影响 | 第38-43页 |
2.3 讨论 | 第43-44页 |
三. 附:人DC-SIGN和L-SIGN促进鼠冠状病毒的复制与表达 | 第44-52页 |
引言 | 第44-46页 |
3.1 材料与方法 | 第46-47页 |
3.1.1 病毒与细胞 | 第46页 |
3.1.2 抗体 | 第46页 |
3.1.3 病毒扩增曲线的测定 | 第46页 |
3.1.4 抗体封闭实验 | 第46页 |
3.1.5 细胞免疫荧光定位与蛋白免疫印迹 | 第46-47页 |
3.2 实验结果 | 第47-51页 |
3.2.1 人DC-SIGN和L-SIGN在NIH/3T3细胞中的表达 | 第47页 |
3.2.2 人DC-SIGN和L-SIGN促进MHV A59在NIH/3T3细胞中复制 | 第47页 |
3.2.3 人DC-SIGN和L-SIGN促进重组MHV表达外源蛋白 | 第47-51页 |
3.3 讨论 | 第51-52页 |
四.技术与方法 | 第52-82页 |
4.1 分子克隆 | 第53-62页 |
4.2 细胞培养与分析 | 第62-69页 |
4.3 蛋白质的生化及免疫学方法 | 第69-71页 |
4.4 病毒学方法 | 第71-75页 |
4.5 技术要点 | 第75-76页 |
4.6 实验用仪器设备 | 第76-78页 |
4.7 实验用试剂及配制 | 第78-82页 |
五. 综述 | 第82-102页 |
5.1 人类免疫缺陷病毒1型gp41结构与功能的研究进展 | 第82-92页 |
5.2 衔接蛋白复合体的结构与功能 | 第92-102页 |
六. 参考文献 | 第102-120页 |
七. 论文总结 | 第120-124页 |
致谢 | 第124-125页 |