摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-17页 |
1.1 镉污染 | 第10-13页 |
1.2 乳酸乳球菌 | 第13页 |
1.3 耐镉乳酸乳球菌 | 第13-14页 |
1.3.1 属种 | 第13-14页 |
1.3.2 生理生化特性 | 第14页 |
1.4 蛋白组学 | 第14-15页 |
1.5 研究意义及目的 | 第15-17页 |
2 材料与方法 | 第17-29页 |
2.1 菌种 | 第17页 |
2.2 培养基 | 第17页 |
2.3 主要试剂 | 第17页 |
2.4 主要溶液 | 第17-18页 |
2.5 主要仪器设备 | 第18-19页 |
2.6 磷酸氢二钾对于乳酸乳球菌生长的影响 | 第19页 |
2.7 菌种活化 | 第19页 |
2.8 基本驯化 | 第19-20页 |
2.9 最大耐镉浓度的测定 | 第20页 |
2.10 生长曲线的测定 | 第20页 |
2.11 对于其他金属的耐受性研究 | 第20页 |
2.12 2D 凝胶电泳 | 第20-25页 |
2.12.1 样品收集 | 第21页 |
2.12.2 细胞质内全蛋白质提取 | 第21页 |
2.12.3 蛋白质浓度的测定 | 第21-22页 |
2.12.4 胶条水化 | 第22页 |
2.12.5 第一向等电聚焦 | 第22-23页 |
2.12.6 胶条平衡 | 第23页 |
2.12.7 第二向聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS-PAGE | 第23-24页 |
2.12.8 染色 | 第24-25页 |
2.12.9 2D 凝胶电泳图谱扫描与分析 | 第25页 |
2.13 质谱鉴定 | 第25页 |
2.14 引物的验证 | 第25-28页 |
2.14.1 总 RNA 提取 | 第25-26页 |
2.14.2 RNA 电泳 | 第26页 |
2.14.3 反转录 | 第26-27页 |
2.14.4 引物设计与合成 | 第27页 |
2.14.5 RT-PCR | 第27-28页 |
2.15 转录水平验证差异基因 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-39页 |
3.1 磷酸氢二钾对于乳酸乳球菌生长的影响 | 第29页 |
3.2 基本驯化操作及最大耐镉浓度的测定 | 第29-30页 |
3.3 生长曲线的测定 | 第30-31页 |
3.4 对于其他金属的耐受性研究 | 第31-32页 |
3.5 2D 凝胶电泳 | 第32-34页 |
3.5.1 蛋白浓度测定 | 第32-33页 |
3.5.2 不同质量浓度的 Cd2+对于乳酸乳球菌蛋白表达的影响 | 第33-34页 |
3.6 质谱鉴定 | 第34-36页 |
3.7 引物验证 | 第36-37页 |
3.7.1 总 RNA 提取结果 | 第36页 |
3.7.2 反转录 | 第36-37页 |
3.7.3 RT-PCR | 第37页 |
3.8 转录水平验证差异基因 | 第37-39页 |
4 讨论 | 第39-48页 |
4.1 磷酸氢二钾对于乳酸乳球菌生长的影响 | 第39页 |
4.2 生长曲线的测定 | 第39-40页 |
4.3 对于其他金属的耐受性研究 | 第40页 |
4.4 2D 凝胶电泳 | 第40-45页 |
4.4.1 全蛋白浓度测定 | 第40页 |
4.4.2 不同质量浓度的 Cd2+对于乳酸乳球菌蛋白表达的影响 | 第40-42页 |
4.4.3 与细胞胁迫响应相关差异蛋白的分析 | 第42-43页 |
4.4.4 能量代谢相关差异蛋白的分析 | 第43页 |
4.4.5 与小分子代谢相关的差异蛋白的分析 | 第43-44页 |
4.4.6 与核酸、细胞分裂相关差异蛋白的分析 | 第44-45页 |
4.4.7 涉及蛋白代谢的相关差异蛋白的分析 | 第45页 |
4.5 转录水平验证差异基因 | 第45-48页 |
5 结论 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-52页 |
在攻读硕士研究生期间发表的学术论文 | 第52-53页 |
作者简介 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |