| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 1 引言 | 第11-26页 |
| ·猪传染性胃肠炎病毒 | 第11-22页 |
| ·TGEV 的一般生物学特性 | 第11-13页 |
| ·TGEV 分子生物学特性 | 第13-17页 |
| ·TGEVS 蛋白在制备诊断制品上的研究进展 | 第17-20页 |
| ·TGEVS 基因工程疫苗的研究进展 | 第20-22页 |
| ·猪大肠杆菌 | 第22-24页 |
| ·产肠毒素型大肠杆菌 | 第22页 |
| ·肠毒素 | 第22页 |
| ·热敏肠毒素及分子结构 | 第22-24页 |
| ·LT 的佐剂活性 | 第24页 |
| ·本课题研究的目的及意义 | 第24-26页 |
| 2 S_1 基因和LTB 基因的克隆、重组及序列分析 | 第26-40页 |
| ·材料 | 第26-29页 |
| ·菌株、毒株与细胞 | 第26页 |
| ·载体及克隆菌株 | 第26页 |
| ·细胞培养所需主要试剂 | 第26页 |
| ·PCR(RT-PCR)反应所需试剂 | 第26-27页 |
| ·目的基因的克隆所需试剂 | 第27页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第27-28页 |
| ·主要仪器 | 第28-29页 |
| ·方法 | 第29-35页 |
| ·猪传染性胃肠炎S_1 基因克隆与序列测定 | 第29-33页 |
| ·猪大肠杆菌LTB 基因克隆与序列测定 | 第33-34页 |
| ·S_1 基因与猪大肠杆菌LTB 基因的重组 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-37页 |
| ·猪传染性胃肠炎S_1 基因克隆与序列测定 | 第35-36页 |
| ·猪大肠杆菌LTB 基因克隆与序列测定 | 第36-37页 |
| ·S_1 基因与猪大肠杆菌LTB 基因的重组 | 第37页 |
| ·讨论 | 第37-40页 |
| 3 S_1 蛋白、LTB 蛋白和LTB_2-S_(1-2) 融合蛋白的表达及Western-blotting 鉴定 | 第40-56页 |
| ·材料 | 第40-44页 |
| ·载体及菌株 | 第40页 |
| ·酶 | 第40页 |
| ·诱导表达所需主要试剂 | 第40页 |
| ·SDS-PAGE 所需主要试剂 | 第40-41页 |
| ·蛋白纯化所需主要试剂 | 第41页 |
| ·Western-blotting 所需试剂、血清及抗体 | 第41页 |
| ·试验所用溶液及其配制 | 第41-44页 |
| ·S_1 基因、LTB 基因和LTB_2-S_(1-2) 基因的原核重组表达载体的构建 | 第44-46页 |
| ·S_1 基因的原核重组表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·LTB 基因的原核重组表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·LTB_2-S_(1-2) 基因的原核重组表达载体的构建 | 第46页 |
| ·51 基因、LTB 基因和LTB_2-S_(1-2) 基因的基因工程重组表达菌的诱导表达 | 第46-49页 |
| ·S_1 蛋白重组表达菌的诱导表达 | 第46-48页 |
| ·LTB 蛋白重组表达菌的诱导表达 | 第48页 |
| ·LTB_2-S_(1-2) 蛋白重组表达菌的诱导表达 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-54页 |
| ·重组质粒pET-28_a-S_1 的鉴定及重组51 蛋白表达菌的诱导表达 | 第49-51页 |
| ·重组质粒pET-28_a-LTB 的鉴定及重组LTB 蛋白表达菌的诱导表达 | 第51-52页 |
| ·重组质粒pET-28_a-LTB_2-S_(1-2) 的鉴定及重组LTB_2-S_(1-2) 融合表达菌的诱导表达 | 第52-54页 |
| ·讨论 | 第54-56页 |
| 4 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 | 第63-69页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第69-70页 |
| 作者简历 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
