| 缩写词 | 第10-12页 |
| 摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14页 |
| 0 前言 | 第17-19页 |
| 1 文献综述 | 第19-37页 |
| 1.1 芸薹属植物转基因研究 | 第19-28页 |
| 1.1.1 高频再生体系的建立 | 第19-21页 |
| 1.1.1.1 基因型 | 第19页 |
| 1.1.1.2 外植体 | 第19-20页 |
| 1.1.1.3 培养基组成 | 第20-21页 |
| 1.1.2 转化方法 | 第21-23页 |
| 1.1.2.1 DNA直接转化 | 第21页 |
| 1.1.2.2 农杆菌介导转化 | 第21-23页 |
| 1.1.3 目的基因的研究 | 第23-27页 |
| 1.1.3.1 抗除草剂 | 第23页 |
| 1.1.3.2 抗虫 | 第23页 |
| 1.1.3.3 抗病性 | 第23-24页 |
| 1.1.3.4 品质改良 | 第24页 |
| 1.1.3.5 自交不亲和性 | 第24页 |
| 1.1.3.6 雄性不育性 | 第24-27页 |
| 1.1.4 存在的问题 | 第27-28页 |
| 1.1.4.1 转基因技术对农产品本身品质的影响 | 第27页 |
| 1.1.4.2 转基因植物环境安全性 | 第27-28页 |
| 1.1.4.3 转基因植物的食品安全性 | 第28页 |
| 1.2 反义基因研究进展 | 第28-30页 |
| 1.2.1 反义基因的概念 | 第28页 |
| 1.2.2 反义基因的作用原理 | 第28-29页 |
| 1.2.3 反义基因在植物学研究上的应用 | 第29-30页 |
| 1.2.3.1 成熟控制 | 第29页 |
| 1.2.3.2 抗病性 | 第29-30页 |
| 1.2.3.3 改良品质 | 第30页 |
| 1.2.3.4 雄性不育 | 第30页 |
| 1.3 双向电泳在植物上的应用概况 | 第30-37页 |
| 1.3.1 差异蛋白质组学研究的意义 | 第32-33页 |
| 1.3.1.1 技术上有更高的可实现性 | 第32页 |
| 1.3.1.2 反映了蛋白质的动态本质 | 第32-33页 |
| 1.3.1.3 具有广泛和明确的应用前景 | 第33页 |
| 1.3.2 差异蛋白质组学研究技术进展 | 第33-35页 |
| 1.3.2.1 样品制备 | 第33页 |
| 1.3.2.2 样品分离 | 第33-34页 |
| 1.3.2.3 样品检测与分析 | 第34页 |
| 1.3.2.4 蛋白质组生物信息学 | 第34-35页 |
| 1.3.3 差异蛋白质组学在植物学研究上的应用现状 | 第35-37页 |
| 2 青花菜与芥蓝高频再生体系构建 | 第37-47页 |
| 2.1 材料与方法 | 第37-39页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第37页 |
| 2.1.2 培养基组成和培养条件 | 第37页 |
| 2.1.3 芽诱导和生根培养 | 第37-39页 |
| 2.2 结果与分析 | 第39-45页 |
| 2.2.1 生长调节剂对青花菜与芥蓝再生体系的影响 | 第39-42页 |
| 2.2.2 AgNO_3对青花菜与芥蓝再生体系的影响 | 第42-43页 |
| 2.2.3 蔗糖浓度对青花菜与芥蓝再生体系的影响 | 第43-44页 |
| 2.2.4 外植体类型对青花菜与芥蓝再生体系的影响 | 第44-45页 |
| 2.2.5 影响青花菜与芥蓝生根的因素 | 第45页 |
| 2.3 讨论 | 第45-47页 |
| 3 芥蓝不定芽发生的基因表达差异的cDNA-AFLP与双向电泳分析 | 第47-63页 |
| 3.1 材料与方法 | 第47-54页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第47页 |
| 3.1.2 试剂 | 第47-48页 |
| 3.1.3 cDNA-AFLP技术 | 第48-52页 |
| 3.1.3.1 RNA的分离与检测 | 第48-49页 |
| 3.1.3.2 cDNA的合成 | 第49-50页 |
| 3.1.3.3 cDNA酶切、连接 | 第50-51页 |
| 3.1.3.4 模板的预扩增和选择性扩增 | 第51页 |
| 3.1.3.5 测序胶电泳 | 第51-52页 |
| 3.1.3.6 银染方法 | 第52页 |
| 3.1.4 双向电泳技术 | 第52-54页 |
| 3.1.4.1 蛋白质提取 | 第52页 |
| 3.1.4.2 溶液配制 | 第52-53页 |
| 3.1.4.3 蛋白质含量测定 | 第53页 |
| 3.1.4.4 等电聚焦电泳 | 第53页 |
| 3.1.4.5 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第53页 |
| 3.1.4.6 银染方法 | 第53-54页 |
| 3.2 结果与分析 | 第54-61页 |
| 3.2.1 cDNA-AFLP分析 | 第54-55页 |
| 3.2.1.1 RNA提取和检测 | 第54页 |
| 3.2.1.2 cDNA合成 | 第54-55页 |
| 3.2.1.3 cDNA-AFLP技术对芥蓝不定芽发生基因差异的分析 | 第55页 |
| 3.2.2 双向电泳分析 | 第55-61页 |
| 3.2.2.1 蛋白质提取 | 第55-57页 |
| 3.2.2.2 双向电泳参数优化 | 第57-58页 |
| 3.2.2.3 芥蓝不定芽发生的基因表达差异的双向电泳分析 | 第58-61页 |
| 3.3 讨论 | 第61-63页 |
| 4 青花菜与芥蓝遗传转化体系构建 | 第63-75页 |
| 4.1 材料与方法 | 第63-66页 |
| 4.1.1 植物材料、菌株及抗生素 | 第63页 |
| 4.1.2 培养基 | 第63-64页 |
| 4.1.2.1 预培养基 | 第63-64页 |
| 4.1.2.2 共培养基 | 第64页 |
| 4.1.2.3 分化培养基 | 第64页 |
| 4.1.2.4 生根培养基 | 第64页 |
| 4.1.3 实验设计与方法 | 第64-66页 |
| 4.1.4 青花菜与芥蓝转化植株的获得 | 第66页 |
| 4.2 结果与分析 | 第66-72页 |
| 4.2.1 主效应分析 | 第66页 |
| 4.2.2 单因子效应分析 | 第66-71页 |
| 4.2.2.1 预培养时间单因子分析 | 第67-68页 |
| 4.2.2.2 共培养时间单因子分析 | 第68页 |
| 4.2.2.3 感染时间单因子分析 | 第68-69页 |
| 4.2.2.4 Kan浓度单因子分析 | 第69页 |
| 4.2.2.5 Amp浓度单因子分析 | 第69-71页 |
| 4.2.3 青花菜与芥蓝反义CYP86MF片段转化植株的获得 | 第71-72页 |
| 4.3 讨论 | 第72-75页 |
| 4.3.1 外植体预培养对遗传转化的影响 | 第72页 |
| 4.3.2 共培养对遗传转化的影响 | 第72-73页 |
| 4.3.3 感染时间、Kan筛选浓度及抑菌剂浓度对遗传转化的影响 | 第73-75页 |
| 5 CYP86MF反义基因转化植株的分子检测 | 第75-83页 |
| 5.1 材料与方法 | 第75-77页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第75页 |
| 5.1.2 基因组DNA和总RNA的提取 | 第75-76页 |
| 5.1.3 PCR检测 | 第76-77页 |
| 5.1.4 Southern印迹杂交检测 | 第77页 |
| 5.1.5 Northern印迹杂交检测 | 第77页 |
| 5.1.6 X-Gluc组织化学染色检测 | 第77页 |
| 5.2 结果与分析 | 第77-81页 |
| 5.2.1 基因组DNA和总RNA的提取 | 第77-78页 |
| 5.2.2 PCR检测 | 第78页 |
| 5.2.3 Southern印迹杂交检测 | 第78页 |
| 5.2.4 Northern印迹杂交检测 | 第78-81页 |
| 5.2.5 X-Gluc组织化学染色检测 | 第81页 |
| 5.3 讨论 | 第81-83页 |
| 6 CYP86MF反义基因转化获得雄性不育植株育性观察 | 第83-87页 |
| 6.1 材料与方法 | 第83-84页 |
| 6.1.1 植物材料 | 第83页 |
| 6.1.2 花器官的形态学观察 | 第83页 |
| 6.1.3 小孢子的形态学观察 | 第83-84页 |
| 6.1.4 花粉萌发实验 | 第84页 |
| 6.2 结果与分析 | 第84-86页 |
| 6.2.1 花器官的形态学观察 | 第84-85页 |
| 6.2.2 小孢子的形态学观察 | 第85页 |
| 6.2.3 花粉萌发实验 | 第85-86页 |
| 6.3 讨论 | 第86-87页 |
| 7 人工雄性不育植株和核不育两用系的双向电泳比较分析 | 第87-97页 |
| 7.1 材料与方法 | 第87-89页 |
| 7.1.1 植物材料 | 第87页 |
| 7.1.2 设备和试剂 | 第87-88页 |
| 7.1.3 溶液配制 | 第88页 |
| 7.1.4 蛋白质含量测定 | 第88页 |
| 7.1.5 等电聚焦电泳 | 第88页 |
| 7.1.6 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第88页 |
| 7.1.7 银染方法 | 第88-89页 |
| 7.2 结果与分析 | 第89-94页 |
| 7.2.1 蛋白质提取比较 | 第89-90页 |
| 7.2.2 转基因材料与非转基因材料的双向电泳比较分析 | 第90-92页 |
| 7.2.3 核雄性不育两用系可育株与不育株双向电泳比较分析 | 第92-94页 |
| 7.3 讨论 | 第94-97页 |
| 7.3.1 蛋白质的提取 | 第94-95页 |
| 7.3.2 双向电泳技术参数的优化 | 第95页 |
| 7.3.3 植物小孢子形成和花粉发育的相关蛋白 | 第95-97页 |
| 结论 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-109页 |
| 博士期间发表的论文及论著 | 第109-110页 |
