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小麦抗条锈病相关基因cDNA片段及Yr10候选基因的克隆

缩略语表第7-8页
中文摘要第8-10页
英文摘要第10页
第一章 文献综述第12-36页
    1 植物抗病基因分子生物学研究进展第12-31页
        1.1 R基因的克隆方法第12-14页
        1.2 已克隆的植物抗病基因第14-24页
        1.3 R基因编码产物的共同基序第24-26页
        1.4 R基因的功能第26-29页
        1.5 R基因在农业上的应用前景第29-31页
    2 小麦抗条锈基因研究现状第31-34页
        2.1 小麦抗条锈主效基因的染色体定位第31-32页
        2.2 小麦抗条锈基因的分子标记第32-34页
    3 本研究的立题依据和研究意义第34-36页
第二章 差异显示RT-PCR方法克隆小麦抗条锈相关基因cDNA片段第36-54页
    1 材料与方法第37-45页
        1.1 实验材料的培养和采集第37页
        1.2 总RNA提取第37-38页
        1.3 cDNA的合成及PCR扩增第38-40页
        1.4 PCR产物的回收及再扩增第40页
        1.5 反向Northern杂交验证第40-42页
        1.6 差异cDNA片段的克隆第42-43页
        1.7 筛选阳性克隆第43-44页
        1.8 差异片段的Northem点杂交第44-45页
    2 结果与分析第45-50页
        2.1 总RNA的提取第45页
        2.2 RT-PCR扩增结果第45页
        2.3 回收到的差异显示cDNA条带第45-47页
        2.4 差异片段的反向Northern杂交验证第47页
        2.5 DD-1 cDNA片段的克隆和重组质粒的鉴定第47-48页
        2.6 DD-1 cDNA片段的序列测定和分析第48-49页
        2.7 DD-1 cDNA片段的表达分析第49-50页
    3 讨论第50-54页
        3.1 DD-1 cDNA片段的表达特点及其代表基因的可能功能第50-51页
        3.2 对本实验中一些问题的探讨第51-54页
第三章 小麦抗条锈基因Yr10同源片段的克隆第54-67页
    1 材料与方法第54-57页
        1.1 供试植物材料第54页
        1.2 实验中所用引物第54-55页
        1.3 mRNA的纯化第55页
        1.4 cDNA合成第55-56页
        1.5 用于PCR特异扩增的简易DNA提取第56页
        1.6 PCR分析第56-57页
    2 结果与分析第57-64页
        2.1 引物C1和C2扩增Yr10近等基因系cDNA第57页
        2.2 差异片段的克隆和鉴定第57页
        2.3 差异cDNA片段的序列测定和分析第57-58页
        2.4 差异片段与已知序列的同源性比较第58-64页
        2.5 设计特异引物扩增Yr10近等基因系基因组DNA第64页
    3 讨论第64-67页
        3.1 771bp cDNA片段可能是小麦抗条锈基因Yr10的部分片段第64-65页
        3.2 保守引物法扩增抗病基因类似物的改进第65-66页
        3.3 用特异引物扩增基因组DNA第66-67页
第四章 小麦抗条锈基因Yr10的全长cDNA序列分析第67-76页
    1 材料与方法第67-70页
        1.1 cDNA的合成第67页
        l.2 Yr10基因与5′及3′端序列的PCR扩增第67-68页
        1.3 PCR产物的克隆和鉴定第68页
        1.4 Yr10基因全序列的PCR扩增第68页
        1.5 用于Southern blotting的基因组DNA的提取第68-69页
        1.6 基因组DNA的酶切第69页
        1.7 Southern blotting第69页
        1.8 探针的标记Southern杂交第69-70页
    2 结果与分析第70-74页
        2.1 5′和3′部分特异引物扩增Yr10/6*Avocet S总cDNA和基因组DNA第70页
        2.2 5′和3′部分cDNA扩增产物的克隆及全长cDNA序列第70-73页
        2.3 全长cDNA和全长基因的扩增第73页
        2.4 Southern杂交分析第73-74页
    3 讨论第74-76页
第五章 结论第76-77页
参考文献第77-95页
致谢第95页

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