缩略语表 | 第7-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
英文摘要 | 第10页 |
第一章 文献综述 | 第12-36页 |
1 植物抗病基因分子生物学研究进展 | 第12-31页 |
1.1 R基因的克隆方法 | 第12-14页 |
1.2 已克隆的植物抗病基因 | 第14-24页 |
1.3 R基因编码产物的共同基序 | 第24-26页 |
1.4 R基因的功能 | 第26-29页 |
1.5 R基因在农业上的应用前景 | 第29-31页 |
2 小麦抗条锈基因研究现状 | 第31-34页 |
2.1 小麦抗条锈主效基因的染色体定位 | 第31-32页 |
2.2 小麦抗条锈基因的分子标记 | 第32-34页 |
3 本研究的立题依据和研究意义 | 第34-36页 |
第二章 差异显示RT-PCR方法克隆小麦抗条锈相关基因cDNA片段 | 第36-54页 |
1 材料与方法 | 第37-45页 |
1.1 实验材料的培养和采集 | 第37页 |
1.2 总RNA提取 | 第37-38页 |
1.3 cDNA的合成及PCR扩增 | 第38-40页 |
1.4 PCR产物的回收及再扩增 | 第40页 |
1.5 反向Northern杂交验证 | 第40-42页 |
1.6 差异cDNA片段的克隆 | 第42-43页 |
1.7 筛选阳性克隆 | 第43-44页 |
1.8 差异片段的Northem点杂交 | 第44-45页 |
2 结果与分析 | 第45-50页 |
2.1 总RNA的提取 | 第45页 |
2.2 RT-PCR扩增结果 | 第45页 |
2.3 回收到的差异显示cDNA条带 | 第45-47页 |
2.4 差异片段的反向Northern杂交验证 | 第47页 |
2.5 DD-1 cDNA片段的克隆和重组质粒的鉴定 | 第47-48页 |
2.6 DD-1 cDNA片段的序列测定和分析 | 第48-49页 |
2.7 DD-1 cDNA片段的表达分析 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-54页 |
3.1 DD-1 cDNA片段的表达特点及其代表基因的可能功能 | 第50-51页 |
3.2 对本实验中一些问题的探讨 | 第51-54页 |
第三章 小麦抗条锈基因Yr10同源片段的克隆 | 第54-67页 |
1 材料与方法 | 第54-57页 |
1.1 供试植物材料 | 第54页 |
1.2 实验中所用引物 | 第54-55页 |
1.3 mRNA的纯化 | 第55页 |
1.4 cDNA合成 | 第55-56页 |
1.5 用于PCR特异扩增的简易DNA提取 | 第56页 |
1.6 PCR分析 | 第56-57页 |
2 结果与分析 | 第57-64页 |
2.1 引物C1和C2扩增Yr10近等基因系cDNA | 第57页 |
2.2 差异片段的克隆和鉴定 | 第57页 |
2.3 差异cDNA片段的序列测定和分析 | 第57-58页 |
2.4 差异片段与已知序列的同源性比较 | 第58-64页 |
2.5 设计特异引物扩增Yr10近等基因系基因组DNA | 第64页 |
3 讨论 | 第64-67页 |
3.1 771bp cDNA片段可能是小麦抗条锈基因Yr10的部分片段 | 第64-65页 |
3.2 保守引物法扩增抗病基因类似物的改进 | 第65-66页 |
3.3 用特异引物扩增基因组DNA | 第66-67页 |
第四章 小麦抗条锈基因Yr10的全长cDNA序列分析 | 第67-76页 |
1 材料与方法 | 第67-70页 |
1.1 cDNA的合成 | 第67页 |
l.2 Yr10基因与5′及3′端序列的PCR扩增 | 第67-68页 |
1.3 PCR产物的克隆和鉴定 | 第68页 |
1.4 Yr10基因全序列的PCR扩增 | 第68页 |
1.5 用于Southern blotting的基因组DNA的提取 | 第68-69页 |
1.6 基因组DNA的酶切 | 第69页 |
1.7 Southern blotting | 第69页 |
1.8 探针的标记Southern杂交 | 第69-70页 |
2 结果与分析 | 第70-74页 |
2.1 5′和3′部分特异引物扩增Yr10/6*Avocet S总cDNA和基因组DNA | 第70页 |
2.2 5′和3′部分cDNA扩增产物的克隆及全长cDNA序列 | 第70-73页 |
2.3 全长cDNA和全长基因的扩增 | 第73页 |
2.4 Southern杂交分析 | 第73-74页 |
3 讨论 | 第74-76页 |
第五章 结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-95页 |
致谢 | 第95页 |