中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略词表 | 第10-12页 |
前言 | 第12-14页 |
文献综述 | 第14-26页 |
1 肿瘤 | 第14-16页 |
1.1 肿瘤概述 | 第14页 |
1.2 肿瘤靶向疗法 | 第14-16页 |
2 表观遗传 | 第16-19页 |
2.1 概述 | 第16页 |
2.2 表观遗传机制 | 第16-17页 |
2.3 表观遗传调控 | 第17-18页 |
2.4 多梳家族蛋白 | 第18-19页 |
3 肿瘤与表观遗传 | 第19-22页 |
3.1 概述 | 第19-20页 |
3.2 肿瘤中的表观遗传改变 | 第20-21页 |
3.3 PRC2与肿瘤 | 第21-22页 |
3.4 表观遗传抑制剂 | 第22页 |
3.5 肿瘤表观遗传靶向疗法 | 第22页 |
4 天然产物与蛋白互作小分子抑制剂高通量筛选 | 第22-26页 |
4.1 天然产物 | 第22-23页 |
4.2 蛋白互作小分子抑制剂高通量筛选 | 第23-26页 |
材料与方法 | 第26-41页 |
1 材料 | 第26-30页 |
1.1 质粒与细胞 | 第26页 |
1.2 试剂 | 第26-27页 |
1.3 仪器设备 | 第27-28页 |
1.4 主要溶液配制 | 第28-30页 |
2 方法 | 第30-41页 |
2.1 细胞培养 | 第30-31页 |
2.2 细胞的转染 | 第31页 |
2.3 感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
2.4 表达纯化EED蛋白 | 第32-33页 |
2.5 基于表面等离子共振技术的重组蛋白与小分子互作分析 | 第33页 |
2.6 体外表达重组Myc-EZH2,Myc-His-EED | 第33-34页 |
2.7 竞争性免疫共沉淀实验 | 第34页 |
2.8 Western blot实验 | 第34-35页 |
2.9 Real-time PCR测定细胞相关基因表达水平的变化 | 第35-37页 |
2.10 MTT法检测细胞活力 | 第37-38页 |
2.11 细胞周期检测 | 第38页 |
2.12 细胞凋亡检测 | 第38-39页 |
2.13 趋化小室法(transwell)测定细胞迁移 | 第39-40页 |
2.14 统计方法 | 第40-41页 |
实验结果 | 第41-54页 |
1 重组蛋白EED的表达,纯化及质谱鉴定 | 第41-42页 |
2 干扰EED-EZH2互作的天然小分子化合物的筛选 | 第42-46页 |
3 表面等离子共振法检测EGCG和蟛蜞菊内酯与EED的结合 | 第46-48页 |
4 蟛蜞菊内酯能调节PRC2依赖性肿瘤细胞中PRC2靶基因及肿瘤相关基因的表达 | 第48-50页 |
5 蟛蜞菊内酯抑制PRC2依赖性肿瘤细胞 | 第50-54页 |
讨论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
硕士期间研究成果 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |