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菘蓝IiFUL和IiSHP2基因的克隆及功能研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 绪论第13-22页
    1.1 MADS基因家族第14-16页
        1.1.1 MADS家族转录因子的结构第14-15页
        1.1.2 MADS家族基因的调控特征第15页
        1.1.3 MADS家族转录因子的功能第15-16页
    1.2 FUL基因的功能第16-17页
    1.3 SHP2基因的功能第17-18页
    1.4 果实结构的基因调控网络第18-19页
    1.5 药用植物菘蓝第19-21页
    1.6 本研究的内容及意义第21-22页
第二章 菘蓝IiFUL和IiSHP2基因cDNA全长序列的鉴定第22-33页
    2.1 材料与试剂第22-23页
        2.1.1 植物材料、载体和菌株第22-23页
        2.1.2 实验试剂和溶液配方第23页
        2.1.3 引物设计第23页
    2.2 实验方法第23-28页
        2.2.1 总RNA的提取与纯化第23-25页
        2.2.2 总RNA的检测第25页
        2.2.3 5'-RACE和3'-RACE末端扩增反应第25-28页
    2.3 实验结果第28-32页
        2.3.1 总RNA质量检测第28页
        2.3.2 cDNA质量检测第28页
        2.3.3 IiFUL和IiSHP2基因cDNA 5'-端和3'-端序列的获得第28-31页
        2.3.4 IiFUL和IiSHP2基因cDNA 5'-端和3'-端序列的分析第31-32页
    2.4 讨论第32-33页
第三章 IiFUL和IiSHP2植物双元表达载体的构建第33-44页
    3.1 材料与试剂第33-35页
        3.1.1 植物材料、载体和菌株第33页
        3.1.2 实验试剂和溶液配方第33-34页
        3.1.3 引物设计第34-35页
    3.2 实验方法第35-37页
    3.3 实验结果第37-40页
        3.3.1 IiFUL和liSHP2基因开放阅读框序列的获得第37-38页
        3.3.2 IiFUL和liSHP2植物双元表达载体的构建第38-40页
        3.3.3 IiFUL和IiSHP2基因ORF序列的分析第40页
    3.4 讨论第40-44页
第四章 IiFUL和IiSHP2在菘蓝不同组织器官中的表达模式分析第44-51页
    4.1 材料与试剂第44-45页
        4.1.1 植物材料第44页
        4.1.2 实验试剂第44-45页
        4.1.3 引物设计第45页
    4.2 实验方法第45-46页
    4.3 实验结果第46-48页
        4.3.1 菘蓝IiFUL基因的表达模式第46页
        4.3.2 菘蓝IiSHP2基因的表达模式第46-48页
    4.4 讨论第48-51页
第五章 菘蓝IiFUL基因转基因植物的获得及其表型观察第51-68页
    5.1 材料与试剂第51-52页
        5.1.1 植物材料和菌株第51页
        5.1.2 试剂和溶液配方第51-52页
    5.2 实验方法第52-53页
        5.2.1 拟南芥和烟草的播种第52页
        5.2.2 浸花法侵染拟南芥第52页
        5.2.3 叶圆盘法侵染烟草叶片第52-53页
        5.2.4 转基因植株的鉴定第53页
    5.3 实验结果第53-64页
        5.3.1 转基因拟南芥和烟草的获得第53-54页
        5.3.2 转基因拟南芥和烟草植株的鉴定第54页
        5.3.3 IiFUL基因对拟南芥开花时间的影响第54-55页
        5.3.4 IiFUL基因对花序发育的影响第55-57页
        5.3.5 IiFUL基因对花形态发育的影响第57-60页
        5.3.6 IiFUL基因对早期顶端花育性的影响第60页
        5.3.7 IiFUL过表达对侧枝可育角果生长的影响第60-63页
        5.3.8 IiFUL基因对叶片形状的影响第63-64页
    5.4 讨论第64-68页
        5.4.1 IiFUL基因对拟南芥开花时间的影响第64-65页
        5.4.2 IiFUL基因对拟南芥顶端花序发育的影响第65-66页
        5.4.3 IiFUL基因对早期顶端花形态发育的影响第66页
        5.4.4 IiFUL基因对早期顶端花育性的影响第66-67页
        5.4.5 IiFUL基因对果实发育的影响第67页
        5.4.6 IiFUL基因对叶片形状的影响第67-68页
第六章 IiFUL和IiSHP2基因表达的原位杂交分析第68-83页
    6.1 材料与试剂第68-71页
        6.1.1 植物材料、载体和菌株第68页
        6.1.2 实验试剂和溶液配方第68-70页
        6.1.3 引物设计第70-71页
    6.2 实验方法第71-76页
        6.2.1 组织材料的石蜡包埋第71-72页
        6.2.2 RNA探针的合成及检测第72-74页
        6.2.3 原位杂交及检测过程第74-76页
    6.3 实验结果第76-81页
        6.3.1 重组质粒的构建第76-77页
        6.3.2 RNA探针的制备与检测第77-79页
        6.3.3 IiFUL基因的原位杂交分析第79-81页
        6.3.4 IiSHP2基因在菘蓝果实中表达的原位杂交分析第81页
    6.4 讨论第81-83页
结论第83-86页
参考文献第86-94页
附录第94-95页
攻读硕士学位期间取得的学术成果第95-96页
致谢第96页

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