| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 英文缩略表 | 第10-11页 |
| 第一章引 言 | 第11-16页 |
| 1.1 转基因动物的研究与应用 | 第11-12页 |
| 1.1.1 转基因动物的研究 | 第11页 |
| 1.1.2 转基因动物的应用 | 第11-12页 |
| 1.2 转基因动物生物安全的研究与评价 | 第12-13页 |
| 1.2.1 转基因动物安全评价 | 第12页 |
| 1.2.2 转基因动环境安全评价 | 第12-13页 |
| 1.3 NEO基因的简介与应用 | 第13页 |
| 1.4454平台对研究肠道微生物的应用 | 第13-14页 |
| 1.5 细菌耐药性 | 第14页 |
| 1.6 非期望效应 | 第14-15页 |
| 1.7 目的意义和本实验的技术路线 | 第15-16页 |
| 1.7.1 研究目的与意义 | 第15页 |
| 1.7.2 本实验的技术路线 | 第15-16页 |
| 第二章 NEO转基因猪分子鉴定 | 第16-21页 |
| 2.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 实验动物及样品 | 第16页 |
| 2.1.2 主要仪器和设备 | 第16页 |
| 2.1.3 主要试剂、耗材 | 第16页 |
| 2.1.4 所用引物序列 | 第16-17页 |
| 2.2 试验方法 | 第17-18页 |
| 2.2.1 DNA的提取 | 第17页 |
| 2.2.2 PCR检测 | 第17页 |
| 2.2.3 Southern Blot检测 | 第17-18页 |
| 2.3 实验结果 | 第18-20页 |
| 2.3.1 DNA质量检测 | 第18页 |
| 2.3.2 酶切检测 | 第18-19页 |
| 2.3.3 PCR鉴定结果 | 第19页 |
| 2.3.4 Southern Blot鉴定结果 | 第19-20页 |
| 2.4 讨论与分析 | 第20-21页 |
| 第三章 NEO基因表达产物在肠道组织和肠道内容物中的鉴定 | 第21-26页 |
| 3.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 3.1.1 实验样品 | 第21页 |
| 3.1.2 主要仪器和设备 | 第21页 |
| 3.1.3 主要试剂、耗材 | 第21-22页 |
| 3.2 实验方法 | 第22-23页 |
| 3.2.1 Western blot检测 | 第22页 |
| 3.2.2 ELISA检测 | 第22-23页 |
| 3.3 实验结果 | 第23-24页 |
| 3.3.1 Western Blot检测结果 | 第23-24页 |
| 3.3.2 Elisa检测结果 | 第24页 |
| 3.4 讨论 | 第24-26页 |
| 第四章 NEO转基因猪外源基因水平漂移评估 | 第26-30页 |
| 4.1 实验材料 | 第26页 |
| 4.1.1 实验主要试剂 | 第26页 |
| 4.2 实验方法 | 第26-27页 |
| 4.2.1 粪便DNA的提取 | 第26-27页 |
| 4.2.2 多重PCR技术 | 第27页 |
| 4.3 实验结果 | 第27-28页 |
| 4.4 讨论分析 | 第28-30页 |
| 第五章外源基因NEO表达对猪肠道微生物耐药性的影响 | 第30-41页 |
| 5.1 实验材料 | 第30页 |
| 5.1.1 样品采集 | 第30页 |
| 5.1.2 主要实验仪器和试剂 | 第30页 |
| 5.2 实验步骤 | 第30-32页 |
| 5.2.1.剪切、连接 | 第30页 |
| 5.2.2.单链DNA模板的分离 | 第30-31页 |
| 5.2.3.emPCR | 第31页 |
| 5.2.4.测序反应 | 第31页 |
| 5.2.5. 生物信息分析流程 | 第31-32页 |
| 5.3 实验结果 | 第32-39页 |
| 5.3.1 实验数据处理 | 第32-35页 |
| 5.3.2 A组转基因猪和阴性猪微生物在门水平上不同程度和规模的改变 | 第35-36页 |
| 5.3.3 A组转基因猪和阴性猪微生物在属水平上不同程度和规模的改变 | 第36-39页 |
| 5.4 分析与讨论 | 第39-41页 |
| 第六章外源基因NEO表达对猪肠道微生物产生的非期望效应 | 第41-54页 |
| 6.1 实验材料 | 第41页 |
| 6.1.1 样品采集 | 第41页 |
| 6.1.2 主要实验仪器和试剂 | 第41页 |
| 6.2 实验步骤 | 第41页 |
| 6.3 实验结果 | 第41-53页 |
| 6.3.1 实验数据处理 | 第41-44页 |
| 6.3.2 B组转基因猪和阴性猪不同肠段细菌在门水平上的变化 | 第44-46页 |
| 6.3.3 B组转基因猪和阴性猪不同肠段细菌在属水平上的变化 | 第46-50页 |
| 6.3.4 1.5月龄到3月龄时，A组和B组转基因猪和阴性猪肠道细菌在门水平上的动态变化 | 第50-51页 |
| 6.3.5 1.5月龄到3月龄时，A组和B组转基因猪和阴性猪肠道细菌在属水平上的动态变化 | 第51-53页 |
| 6.4 分析与讨论 | 第53-54页 |
| 第七章全文结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 作者简历 | 第62页 |
