| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 本文所用缩略词及中文对照 | 第7-10页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| 1.1 植物黄酮类化合物生物合成基本途径及相关基因的研究 | 第10-14页 |
| 1.1.1 查尔酮合酶及其基因的研究 | 第10-11页 |
| 1.1.2 查尔酮异构酶及其基因的研究 | 第11-12页 |
| 1.1.3 异黄酮合酶及其基因的研究 | 第12-13页 |
| 1.1.4 黄烷酮 3’-羟化酶及其基因的研究 | 第13页 |
| 1.1.5 植物黄酮代谢相关酶之间的相互作用 | 第13-14页 |
| 1.2 发根农杆菌诱导毛状根的研究概况 | 第14-15页 |
| 1.2.1 发根农杆菌诱导形成毛状根的机制 | 第14页 |
| 1.2.2 发根农杆菌诱导毛状根形成的方法 | 第14-15页 |
| 1.2.3 毛状根的应用 | 第15页 |
| 1.3 甘草的研究概况 | 第15-18页 |
| 1.3.1 甘草的主要化学成分 | 第15-16页 |
| 1.3.2 甘草的组织培养技术 | 第16-17页 |
| 1.3.3 甘草次生代谢途径相关基因的研究 | 第17页 |
| 1.3.4 甘草毛状根的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-26页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 化学药品和试剂盒 | 第19页 |
| 2.1.3 主要实验仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法 | 第19-26页 |
| 2.2.1 重组质粒的构建 | 第19-20页 |
| 2.2.2 感受态细胞的制备与转化 | 第20-21页 |
| 2.2.3 外植体的制备 | 第21-22页 |
| 2.2.4 菌种的活化与筛选 | 第22页 |
| 2.2.5 外植体的选择 | 第22页 |
| 2.2.6 侵染方式的选择 | 第22页 |
| 2.2.7 转基因毛状根的鉴定与培养 | 第22-23页 |
| 2.2.8 黄酮类化合物检测 | 第23页 |
| 2.2.9 甘草基因组RNA提取 | 第23-24页 |
| 2.2.10 cDNA的合成 | 第24页 |
| 2.2.11 q-PCR检测 | 第24-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-35页 |
| 3.1 发根农杆菌的转化结果 | 第26页 |
| 3.2 甘草毛状根的诱导 | 第26-30页 |
| 3.2.1 发根农杆菌菌株对诱导毛状根的影响 | 第26-27页 |
| 3.2.2 外植体类型对诱导毛状根的影响 | 第27-29页 |
| 3.2.3 侵染方式对诱导毛状根的影响 | 第29页 |
| 3.2.4 光照有无对诱导毛状根的影响 | 第29-30页 |
| 3.3 甘草毛状根的培养 | 第30-31页 |
| 3.3.1 培养基种类对毛状根生长的影响 | 第30-31页 |
| 3.3.2 活性炭对毛状根生长的影响 | 第31页 |
| 3.4 毛状根中黄酮类化合物的HPLC分析 | 第31-34页 |
| 3.4.1 转基因毛状根中黄酮类化合物的HPLC分析 | 第31-32页 |
| 3.4.2 荧光强度对合成黄酮类化合物的影响 | 第32页 |
| 3.4.3 不同形态根系及培养基对黄酮类化合物累积的影响 | 第32-34页 |
| 3.5 不同来源甘草根系IFS基因表达量的差异 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-38页 |
| 4.1 影响毛状根遗传转化效率的因素 | 第35-36页 |
| 4.2 影响毛状根生长及有效物质累积的因素 | 第36页 |
| 4.3 建立高效毛状根遗传转化体系的优势 | 第36-37页 |
| 4.4 IFS表达分析 | 第37-38页 |
| 5 结论 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-46页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第46-47页 |
| 作者简历 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
