摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-13页 |
1 引言 | 第13-30页 |
·光周期途径 | 第13-14页 |
·光受体 | 第14-15页 |
·光受体信号向生物钟的传递 | 第15-17页 |
·生物钟 | 第17-25页 |
·生物钟基因TOC1研究进展 | 第18-21页 |
·生物钟基因LHY/CCA1研究进展 | 第21-23页 |
·生物钟其他基因 | 第23-25页 |
·下游调节基因 | 第25-28页 |
·CAB2(CHLOROPYLL A/B BINDING PROTEIN 2)基因 | 第25-26页 |
·GI(GIGANTEA)基因 | 第26-27页 |
·CO(CONSTANS)与FT(FLOWERING LOCUST)基因 | 第27-28页 |
·本课题研究的目的和意义 | 第28-30页 |
2 材料与方法 | 第30-49页 |
·实验材料 | 第30-33页 |
·拟南芥材料 | 第30页 |
·大豆材料 | 第30页 |
·菌株及载体 | 第30-31页 |
·主要的分子生物学试剂和实验仪器 | 第31页 |
·常用溶液的配制 | 第31-33页 |
·实验方法 | 第33-49页 |
·植物材料的种植和培养 | 第33-34页 |
·候选基因的确定 | 第34页 |
·引物设计与PCR扩增 | 第34页 |
·基因的染色体定位 | 第34页 |
·系统进化树的构建 | 第34页 |
·基因内含子/外显子结构分析 | 第34-35页 |
·启动子作用元件分析 | 第35页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
·PCR产物的回收与连接反应 | 第36页 |
·连接产物的转化 | 第36-37页 |
·基因表达载体的构建 | 第37页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第37页 |
·农杆菌转化 | 第37-38页 |
·农杆菌克隆的鉴定 | 第38页 |
·拟南芥转化与筛选 | 第38页 |
·原生质体分离与瞬时表达观察亚细胞定位 | 第38-39页 |
·总RNA提取与DNA消化 | 第39-40页 |
·RNA变性琼脂糖凝胶电泳 | 第40-41页 |
·cDNA第一链的合成 | 第41页 |
·qRT-PCR引物设计 | 第41页 |
·实时定量RT-PCR | 第41-42页 |
·实时定量RT-PCR表达分析 | 第42页 |
·融合蛋白的表达纯化和抗体制备 | 第42-44页 |
·植物总蛋白的提取 | 第44页 |
·SDS-PAGE蛋白电泳 | 第44-49页 |
3 结果与分析 | 第49-82页 |
·大豆GmTOC1s基因的克隆及生物信息学分析 | 第49-60页 |
·大豆GmTOC1s基因的查询与确定 | 第49页 |
·大豆GmTOC1s基因的克隆 | 第49-50页 |
·大豆GmTOC1s基因的染色体定位 | 第50-51页 |
·大豆GmTOC1s基因的结构 | 第51-52页 |
·大豆GmTOC1s基因保守位点分析 | 第52-53页 |
·大豆GmTOC1s基因同源性分析 | 第53-54页 |
·TOC1s系统进化树分析 | 第54-56页 |
·大豆GmTOC1s基因启动子克隆 | 第56页 |
·大豆GmTOC1s基因启动子分析 | 第56-60页 |
·大豆GmLCLs基因的克隆、表达模式及功能分析 | 第60-82页 |
·大豆GmLCLs基因的查询与确定 | 第61页 |
·大豆GmLCLs基因的克隆 | 第61-62页 |
·大豆GmLCLs基因的染色体定位 | 第62-63页 |
·大豆GmLCLs基因的结构 | 第63页 |
·大豆GmLCLs基因的保守位点分析 | 第63-64页 |
·LCLs的系统进化树分析 | 第64-65页 |
·LCLs邻近基因的同线性分析 | 第65页 |
·大豆GmLCLs蛋白的亚细胞定位 | 第65-66页 |
·大豆GmLCLs基因的表达模式 | 第66-71页 |
·大豆GmLCLs蛋白的表达模式 | 第71-79页 |
·大豆GmLCL1和GmLCL2基因过表达拟南芥的表现型分析 | 第79-80页 |
·生物钟调节基因的测定 | 第80-82页 |
4 讨论 | 第82-87页 |
·大豆GmTOC1s基因的进化分析 | 第82-83页 |
·大豆GmTOC1s启动子元件分析 | 第83-84页 |
·大豆GmLCLs基因的进化分析 | 第84-85页 |
·GmLCLs基因表达模式 | 第85-86页 |
·受生物钟调节基因的测定 | 第86-87页 |
5 全文结论 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-102页 |
附录 | 第102-121页 |
作者简介 | 第121-122页 |