摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
1.1 植物内生放线菌概况 | 第12-18页 |
1.1.1 植物内生放线菌的种类 | 第12页 |
1.1.2 植物内生放线菌的应用 | 第12-15页 |
1.1.3 生防放线菌生防机理 | 第15-18页 |
1.2 微生物基因组信息分析 | 第18-22页 |
1.2.1 微生物基因组测序的应用 | 第18页 |
1.2.2 基因组功能注释 | 第18-19页 |
1.2.3 次级代谢生物合成基因簇 | 第19-21页 |
1.2.4 外泌蛋白预测 | 第21-22页 |
1.3 本研究的选题依据及目的意义 | 第22-23页 |
1.3.1 选题依据 | 第22页 |
1.3.2 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 Streptomyces lavendulae gCLA4基因功能预测 | 第23-29页 |
2.1 材料 | 第23-24页 |
2.1.1 培养基 | 第23页 |
2.1.2 试剂 | 第23页 |
2.1.3 仪器 | 第23-24页 |
2.2 方法 | 第24-25页 |
2.2.1 gCLA4基因组DNA的提取 | 第24页 |
2.2.2 gCLA4基因组测序 | 第24页 |
2.2.3 gCLA4基因组测序结果分析 | 第24页 |
2.2.4 gCLA4基因组组分分析 | 第24页 |
2.2.5 gCLA4基因功能注释 | 第24-25页 |
2.2.6 gCLA4次级代谢生物合成基因簇分析 | 第25页 |
2.2.7 gCLA4外泌蛋白预测 | 第25页 |
2.3 结果与分析 | 第25-28页 |
2.3.1 gCLA4基因组测序数据概况 | 第25页 |
2.3.2 gCLA4基因组组装概况 | 第25页 |
2.3.3 gCLA4基因组组分分析 | 第25-26页 |
2.3.4 gCLA4基因功能注释 | 第26-27页 |
2.3.5 gCLA4次级代谢生物合成基因簇分析 | 第27-28页 |
2.3.6 gCLA4外泌蛋白预测 | 第28页 |
2.4 结论与讨论 | 第28-29页 |
第三章 gCLA4外泌蛋白的原核表达及活性初探 | 第29-37页 |
3.1 材料 | 第29-30页 |
3.1.1 菌株及质粒 | 第29页 |
3.1.2 植物材料 | 第29页 |
3.1.3 培养基 | 第29页 |
3.1.4 试剂 | 第29-30页 |
3.1.5 仪器 | 第30页 |
3.2 方法 | 第30-33页 |
3.2.1 原核表达载体的构建 | 第30-32页 |
3.2.2 目的蛋白的表达与检测 | 第32-33页 |
3.2.3 原核表达蛋白活性检测 | 第33页 |
3.3 结果与分析 | 第33-35页 |
3.3.1 原核表达载体的构建 | 第33-34页 |
3.3.2 目的蛋白的表达 | 第34-35页 |
3.3.3 原核表达蛋白活性检测 | 第35页 |
3.4 结论与讨论 | 第35-37页 |
第四章 蛋白4955的性质及诱导抗性功能探究 | 第37-46页 |
4.1 材料 | 第37-38页 |
4.1.1 植物材料 | 第37页 |
4.1.2 试剂 | 第37-38页 |
4.1.3 仪器 | 第38页 |
4.2 方法 | 第38-40页 |
4.2.1 蛋白4955基本性质分析 | 第38页 |
4.2.2 蛋白4955稳定性检测 | 第38页 |
4.2.3 蛋白4955诱导烟草防御酶活性测定 | 第38-39页 |
4.2.4 蛋白4955诱导烟草防御相关基因表达 | 第39-40页 |
4.3 结果与分析 | 第40-45页 |
4.3.1 蛋白4955基本性质分析 | 第40-42页 |
4.3.2 蛋白4955稳定性 | 第42-43页 |
4.3.3 蛋白4955诱导烟草防御酶活性变化 | 第43-44页 |
4.3.4 蛋白4955诱导烟草防御相关基因表达 | 第44-45页 |
4.4 结论与讨论 | 第45-46页 |
第五章 gCLA4中6个外泌蛋白的基本性质探究 | 第46-52页 |
5.1 材料 | 第46页 |
5.1.1 试剂 | 第46页 |
5.1.2 仪器 | 第46页 |
5.2 方法 | 第46-47页 |
5.2.1 6个外泌蛋白的基本性质分析 | 第46页 |
5.2.2 几丁质结合蛋白活性测定 | 第46-47页 |
5.2.3 壳聚糖酶、几丁质酶酶活测定 | 第47页 |
5.3 结果与分析 | 第47-50页 |
5.3.1 6个外泌蛋白的基本理化性质分析 | 第47-48页 |
5.3.2 6个外泌蛋白的保守结构域分析 | 第48-49页 |
5.3.3 6个外泌蛋白的三维结构预测 | 第49-50页 |
5.3.4 几丁质结合蛋白活性测定 | 第50页 |
5.3.5 壳聚糖酶、几丁质酶酶活测定 | 第50页 |
5.4 结论与讨论 | 第50-52页 |
第六章 结论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
附录 | 第61-70页 |
附录1 目的基因PCR扩增引物序列 | 第61-66页 |
附录2 目的基因扩增结果 | 第66-67页 |
附录3 原核表达载体验证结果 | 第67-68页 |
附录4 目的蛋白SDS-PAGE检测结果 | 第68-69页 |
附录5 酶活测定方法 | 第69-70页 |
附录 5.1 CAT酶活测定 | 第69页 |
附录 5.2 SOD酶活测定 | 第69页 |
附录 5.3 POD酶活测定 | 第69页 |
附录 5.4 PAL酶活测定 | 第69-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者简介 | 第71页 |