| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第1章 引言 | 第9-19页 |
| 1.1 蛹虫草 | 第9-10页 |
| 1.2 凝集素的研究进展 | 第10-18页 |
| 1.2.1 凝集素的定义和分类 | 第10-11页 |
| 1.2.2 凝集素的结构及理化性质 | 第11-13页 |
| 1.2.3 凝集素的生物学功能特性 | 第13-15页 |
| 1.2.4 凝集素的应用 | 第15-16页 |
| 1.2.5 Nem1(Nuclear envelope morphology protein 1)基因介绍 | 第16-18页 |
| 1.3 本论文的主要研究内容 | 第18-19页 |
| 1.3.1 蛹虫草凝集素基因及编码产物的生物信息学分析和功能研究 | 第18页 |
| 1.3.2 蛹虫草中 Nem1 基因功能探究 | 第18-19页 |
| 第2章 蛹虫草凝集素基因及编码产物的生物信息学分析和功能研究 | 第19-37页 |
| 2.1 实验材料和设备 | 第19-21页 |
| 2.1.1 供试菌种 | 第19页 |
| 2.1.2 培养基和主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-27页 |
| 2.2.1 生物信息学分析工具 | 第21页 |
| 2.2.2 蛹虫草培养 | 第21页 |
| 2.2.3 蛹虫草不同生长时期凝集素基因表达量的测定 | 第21-24页 |
| 2.2.4 凝集素基因的cDNA序列扩增与表达载体构建 | 第24-25页 |
| 2.2.5 重组蛹虫草凝集素蛋白的表达与提取 | 第25页 |
| 2.2.6 SDS-PAGE电泳分析 | 第25-26页 |
| 2.2.7 蛋白质浓度测定 | 第26-27页 |
| 2.2.8 重组蛹虫草凝集素蛋白抑菌活性测定 | 第27页 |
| 2.2.9 重组蛹虫草凝集素蛋白抑制肿瘤细胞增殖试验 | 第27页 |
| 2.3 实验结果 | 第27-34页 |
| 2.3.1 凝集素编码基因的生物信息学分析结果 | 第27-30页 |
| 2.3.2 蛹虫草培养 | 第30-31页 |
| 2.3.3 蛹虫草不同生长时期凝集素基因表达量的测定 | 第31页 |
| 2.3.4 重组蛹虫草凝集素蛋白的表达与SDS-PAGE电泳分析 | 第31-32页 |
| 2.3.5 凝集素蛋白浓度测定 | 第32页 |
| 2.3.6 重组蛹虫草凝集素蛋白抑菌活性 | 第32-33页 |
| 2.3.7 重组蛹虫草凝集素蛋白抑制肿瘤细胞增殖活性 | 第33-34页 |
| 2.4 结论与讨论 | 第34-37页 |
| 2.4.1 结论 | 第34-35页 |
| 2.4.2 讨论 | 第35-37页 |
| 第3章 蛹虫草中Nem1基因功能初探 | 第37-62页 |
| 3.1 实验材料 | 第37-39页 |
| 3.1.1 实验菌株和载体 | 第37-38页 |
| 3.1.2 培养基 | 第38-39页 |
| 3.2 实验方法 | 第39-50页 |
| 3.2.1 蛹虫草菌丝的培养与收集 | 第39页 |
| 3.2.2 蛹虫草基因组DNA的提取 | 第39-40页 |
| 3.2.3 敲除及过表达载体的构建 | 第40-44页 |
| 3.2.4 敲除载体转化农杆菌(冻融法) | 第44-45页 |
| 3.2.5 根癌农杆菌介导的蛹虫草遗传转化 | 第45页 |
| 3.2.6 蛹虫草转化子验证 | 第45-46页 |
| 3.2.7 Nem1敲除菌株和过表达菌株表型分析 | 第46页 |
| 3.2.8 Nem1敲除菌株侵染能力分析 | 第46-47页 |
| 3.2.9 细胞核和脂滴荧光染色观察 | 第47-48页 |
| 3.2.10 细胞自噬相关基因的表达模式分析 | 第48-50页 |
| 3.3 实验结果 | 第50-59页 |
| 3.3.1 Nem1基因生物信息学分析 | 第50-51页 |
| 3.3.2 根癌农杆菌介导的丝状真菌遗传转化 | 第51-53页 |
| 3.3.3 Nem1敲除菌株和过表达菌株表性分析 | 第53-55页 |
| 3.3.4 敲除菌株侵染能力分析 | 第55-56页 |
| 3.3.5 细胞核及脂滴荧光染色观察 | 第56-58页 |
| 3.3.6 细胞自噬相关基因的表达模式分析 | 第58-59页 |
| 3.4 结论与讨论 | 第59-62页 |
| 3.4.1 结论 | 第59-60页 |
| 3.4.2 讨论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文及其它成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
