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α-环糊精葡萄糖基转移酶中试制备工艺优化及酶的应用评价

摘要第4-6页
abstract第6-7页
引言第12-13页
第一章 文献综述第13-25页
    1.1 环糊精概述第13-18页
        1.1.1 环糊精的组成与结构第13-14页
        1.1.2 环糊精的性质第14-15页
            1.1.2.1 物理性质第14-15页
            1.1.2.2 化学性质第15页
            1.1.2.3 生物学性质第15页
        1.1.3 环糊精的应用第15-16页
        1.1.4 环糊精的制备第16-17页
        1.1.5 环糊精的研究现状第17-18页
    1.2 CGTase酶第18-22页
        1.2.1 CGTase酶的功能与结构第18-20页
        1.2.2 CGTase酶的产物特异性第20-21页
        1.2.3 酶的应用第21页
        1.2.4 CGTase酶的研究进展第21-22页
    1.3 甜菊糖苷第22-24页
        1.3.1 甜菊糖苷来源及种类第22页
        1.3.2 甜菊糖苷的功能第22-23页
        1.3.3 酶转化甜菊糖的研究进展第23-24页
    1.4 本试验的立题依据及主要研究内容第24-25页
        1.4.1 立题依据第24页
        1.4.2 研究内容第24-25页
第二章 环糊精葡萄糖基转移酶规模化发酵制备工艺条件优化及中试放大第25-37页
    2.1 材料与仪器第25-26页
        2.1.1 菌株第25页
        2.1.2 主要仪器第25-26页
        2.1.3 主要试剂第26页
        2.1.4 主要培养基第26页
    2.2 试验方法第26-29页
        2.2.1 实验室粗酶液的制备第26-27页
        2.2.2 20 L发酵罐发酵工艺优化第27页
        2.2.3 500 L发酵罐中试放大试验第27页
        2.2.4 酶活测定方法第27页
        2.2.5 生物量的测定第27-28页
        2.2.6 固体酶粉的制备流程第28页
        2.2.7 絮凝剂种类的选择第28页
        2.2.8 絮凝剂用量的筛选第28页
        2.2.9 絮凝效果评价第28页
        2.2.10 有机溶剂沉淀第28-29页
        2.2.11 冷冻干燥第29页
    2.3 试验结果与讨论第29-36页
        2.3.1 发酵罐发酵规律第29-30页
        2.3.2 转速对产酶的影响第30-31页
        2.3.3 溶氧对菌株产酶的影响第31-32页
        2.3.4 优化后 20 L发酵罐发酵规律第32页
        2.3.5 多批次 20 L发酵罐发酵验证试验第32-33页
        2.3.6 中试发酵试验放大结果第33页
        2.3.7 絮凝过滤第33-35页
            2.3.7.1 不同絮凝剂过夜静置试验第33-35页
            2.3.7.2 絮凝剂浓度对絮凝的影响第35页
        2.3.8 500 L发酵罐规模发酵制备结果第35-36页
    2.4 本章小结第36-37页
第三章 环糊精葡萄糖基转移酶制备环糊精工艺研究第37-51页
    3.1 材料与仪器第37-38页
        3.1.1 酶的来源第37页
        3.1.2 主要仪器第37页
        3.1.3 主要试剂第37-38页
    3.2 试验方法第38-40页
        3.2.1 酶液准备第38页
        3.2.2 α-CGTase活力的测定第38页
        3.2.3 绘制标准曲线第38-39页
        3.2.4 α-环糊精含量测定第39页
        3.2.5 α-CGTase作用淀粉产α-环糊精影响因素研究第39-40页
        3.2.6 Plackett-Burman试验第40页
        3.2.7 Box-Behnken试验第40页
        3.2.8 验证试验第40页
    3.3 试验结果与分析第40-50页
        3.3.1 α-环糊精的标准曲线第40-41页
        3.3.2 底物种类对α-环糊精制备的影响第41-42页
        3.3.3 底物浓度对α-环糊精制备的影响第42页
        3.3.4 加酶量对α-环糊精制备的影响第42-43页
        3.3.5 温度对α-环糊精制备的影响第43页
        3.3.6 作用时间对α-环糊精制备的影响第43-44页
        3.3.7 pH对α-环糊精制备的影响第44-45页
        3.3.8 Mg2+浓度对α-环糊精制备的影响第45-46页
        3.3.9 PB试验结果第46-47页
        3.3.10 BB试验设计及结果第47-50页
        3.3.11 回归方程的验证第50页
    3.4 本章小结第50-51页
第四章 α-环糊精葡萄糖基转移酶酶法改性甜菊苷第51-63页
    4.1 材料与仪器第51-52页
        4.1.1 酶的来源第51页
        4.1.2 主要仪器第51-52页
        4.1.3 主要试剂第52页
    4.2 试验方法第52-54页
        4.2.1 α-CGTase酶活力的测定第52-53页
        4.2.2 转葡萄糖基反应第53页
        4.2.3 单因素试验第53页
        4.2.4 产物定性定量分析第53-54页
        4.2.5 甜菊苷转化率的测定第54页
        4.2.6 正交试验第54页
    4.3 结果与讨论第54-62页
        4.3.1 甜菊苷标准曲线第54-55页
        4.3.2 普通甜菊糖的转糖基反应第55-57页
        4.3.3 甜菊苷(90% St)的转糖基反应第57页
        4.3.4 酶的种类对甜菊苷转化的影响第57-58页
        4.3.5 底物种类对甜菊苷转化的影响第58-59页
        4.3.6 底物比对甜菊苷转化的影响第59页
        4.3.7 加酶量对甜菊苷转化的影响第59-60页
        4.3.8 温度对甜菊苷转化的影响第60-61页
        4.3.9 时间对甜菊苷转化的影响第61页
        4.3.10 pH对甜菊苷转化的的影响第61-62页
        4.3.11 正交试验结果第62页
    4.4 本章小结第62-63页
第五章 结论与展望第63-64页
参考文献第64-71页
附录第71-72页
致谢第72页

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