摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-25页 |
1.1 环糊精概述 | 第13-18页 |
1.1.1 环糊精的组成与结构 | 第13-14页 |
1.1.2 环糊精的性质 | 第14-15页 |
1.1.2.1 物理性质 | 第14-15页 |
1.1.2.2 化学性质 | 第15页 |
1.1.2.3 生物学性质 | 第15页 |
1.1.3 环糊精的应用 | 第15-16页 |
1.1.4 环糊精的制备 | 第16-17页 |
1.1.5 环糊精的研究现状 | 第17-18页 |
1.2 CGTase酶 | 第18-22页 |
1.2.1 CGTase酶的功能与结构 | 第18-20页 |
1.2.2 CGTase酶的产物特异性 | 第20-21页 |
1.2.3 酶的应用 | 第21页 |
1.2.4 CGTase酶的研究进展 | 第21-22页 |
1.3 甜菊糖苷 | 第22-24页 |
1.3.1 甜菊糖苷来源及种类 | 第22页 |
1.3.2 甜菊糖苷的功能 | 第22-23页 |
1.3.3 酶转化甜菊糖的研究进展 | 第23-24页 |
1.4 本试验的立题依据及主要研究内容 | 第24-25页 |
1.4.1 立题依据 | 第24页 |
1.4.2 研究内容 | 第24-25页 |
第二章 环糊精葡萄糖基转移酶规模化发酵制备工艺条件优化及中试放大 | 第25-37页 |
2.1 材料与仪器 | 第25-26页 |
2.1.1 菌株 | 第25页 |
2.1.2 主要仪器 | 第25-26页 |
2.1.3 主要试剂 | 第26页 |
2.1.4 主要培养基 | 第26页 |
2.2 试验方法 | 第26-29页 |
2.2.1 实验室粗酶液的制备 | 第26-27页 |
2.2.2 20 L发酵罐发酵工艺优化 | 第27页 |
2.2.3 500 L发酵罐中试放大试验 | 第27页 |
2.2.4 酶活测定方法 | 第27页 |
2.2.5 生物量的测定 | 第27-28页 |
2.2.6 固体酶粉的制备流程 | 第28页 |
2.2.7 絮凝剂种类的选择 | 第28页 |
2.2.8 絮凝剂用量的筛选 | 第28页 |
2.2.9 絮凝效果评价 | 第28页 |
2.2.10 有机溶剂沉淀 | 第28-29页 |
2.2.11 冷冻干燥 | 第29页 |
2.3 试验结果与讨论 | 第29-36页 |
2.3.1 发酵罐发酵规律 | 第29-30页 |
2.3.2 转速对产酶的影响 | 第30-31页 |
2.3.3 溶氧对菌株产酶的影响 | 第31-32页 |
2.3.4 优化后 20 L发酵罐发酵规律 | 第32页 |
2.3.5 多批次 20 L发酵罐发酵验证试验 | 第32-33页 |
2.3.6 中试发酵试验放大结果 | 第33页 |
2.3.7 絮凝过滤 | 第33-35页 |
2.3.7.1 不同絮凝剂过夜静置试验 | 第33-35页 |
2.3.7.2 絮凝剂浓度对絮凝的影响 | 第35页 |
2.3.8 500 L发酵罐规模发酵制备结果 | 第35-36页 |
2.4 本章小结 | 第36-37页 |
第三章 环糊精葡萄糖基转移酶制备环糊精工艺研究 | 第37-51页 |
3.1 材料与仪器 | 第37-38页 |
3.1.1 酶的来源 | 第37页 |
3.1.2 主要仪器 | 第37页 |
3.1.3 主要试剂 | 第37-38页 |
3.2 试验方法 | 第38-40页 |
3.2.1 酶液准备 | 第38页 |
3.2.2 α-CGTase活力的测定 | 第38页 |
3.2.3 绘制标准曲线 | 第38-39页 |
3.2.4 α-环糊精含量测定 | 第39页 |
3.2.5 α-CGTase作用淀粉产α-环糊精影响因素研究 | 第39-40页 |
3.2.6 Plackett-Burman试验 | 第40页 |
3.2.7 Box-Behnken试验 | 第40页 |
3.2.8 验证试验 | 第40页 |
3.3 试验结果与分析 | 第40-50页 |
3.3.1 α-环糊精的标准曲线 | 第40-41页 |
3.3.2 底物种类对α-环糊精制备的影响 | 第41-42页 |
3.3.3 底物浓度对α-环糊精制备的影响 | 第42页 |
3.3.4 加酶量对α-环糊精制备的影响 | 第42-43页 |
3.3.5 温度对α-环糊精制备的影响 | 第43页 |
3.3.6 作用时间对α-环糊精制备的影响 | 第43-44页 |
3.3.7 pH对α-环糊精制备的影响 | 第44-45页 |
3.3.8 Mg2+浓度对α-环糊精制备的影响 | 第45-46页 |
3.3.9 PB试验结果 | 第46-47页 |
3.3.10 BB试验设计及结果 | 第47-50页 |
3.3.11 回归方程的验证 | 第50页 |
3.4 本章小结 | 第50-51页 |
第四章 α-环糊精葡萄糖基转移酶酶法改性甜菊苷 | 第51-63页 |
4.1 材料与仪器 | 第51-52页 |
4.1.1 酶的来源 | 第51页 |
4.1.2 主要仪器 | 第51-52页 |
4.1.3 主要试剂 | 第52页 |
4.2 试验方法 | 第52-54页 |
4.2.1 α-CGTase酶活力的测定 | 第52-53页 |
4.2.2 转葡萄糖基反应 | 第53页 |
4.2.3 单因素试验 | 第53页 |
4.2.4 产物定性定量分析 | 第53-54页 |
4.2.5 甜菊苷转化率的测定 | 第54页 |
4.2.6 正交试验 | 第54页 |
4.3 结果与讨论 | 第54-62页 |
4.3.1 甜菊苷标准曲线 | 第54-55页 |
4.3.2 普通甜菊糖的转糖基反应 | 第55-57页 |
4.3.3 甜菊苷(90% St)的转糖基反应 | 第57页 |
4.3.4 酶的种类对甜菊苷转化的影响 | 第57-58页 |
4.3.5 底物种类对甜菊苷转化的影响 | 第58-59页 |
4.3.6 底物比对甜菊苷转化的影响 | 第59页 |
4.3.7 加酶量对甜菊苷转化的影响 | 第59-60页 |
4.3.8 温度对甜菊苷转化的影响 | 第60-61页 |
4.3.9 时间对甜菊苷转化的影响 | 第61页 |
4.3.10 pH对甜菊苷转化的的影响 | 第61-62页 |
4.3.11 正交试验结果 | 第62页 |
4.4 本章小结 | 第62-63页 |
第五章 结论与展望 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-71页 |
附录 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |