| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 主要符号对照表 | 第9-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-32页 |
| 1.1 恶性肿瘤发病现状及趋势 | 第12-13页 |
| 1.1.1 全球现状 | 第12页 |
| 1.1.2 国内现状 | 第12-13页 |
| 1.2 恶性肿瘤发生发展和转移的机理 | 第13-17页 |
| 1.2.1 影响癌细胞无序增殖的基因突变 | 第13-14页 |
| 1.2.2 信号通路的激活 | 第14页 |
| 1.2.3 其他压力因素 | 第14-15页 |
| 1.2.4 癌症的转移过程 | 第15-17页 |
| 1.3 外泌体与肿瘤的关系 | 第17-20页 |
| 1.3.1 外泌体的正常生理功能 | 第17-19页 |
| 1.3.2 外泌体在肿瘤中的功能 | 第19-20页 |
| 1.4 小分子GTP酶 | 第20-21页 |
| 1.5 Rab家族 | 第21-25页 |
| 1.5.1 Rab3D | 第22-24页 |
| 1.5.2 Rab蛋白与外泌体的形成和分泌 | 第24-25页 |
| 1.6 Hsp90与肿瘤 | 第25-29页 |
| 1.6.1 热休克蛋白（Heat shock proteins） | 第25-26页 |
| 1.6.2 Hsp90 | 第26-27页 |
| 1.6.3 Hsp90α | 第27-29页 |
| 1.7 论文研究的目的、内容和意义 | 第29-32页 |
| 1.7.1 论文研究目的 | 第29页 |
| 1.7.2 论文研究内容和意义 | 第29-32页 |
| 第2章 Rab3D与肿瘤恶性程度的相关性 | 第32-52页 |
| 2.1 本章引言 | 第32-33页 |
| 2.2 实验材料和方法 | 第33-35页 |
| 2.2.1 细胞系和细胞培养 | 第33页 |
| 2.2.2 抗体 | 第33页 |
| 2.2.3 免疫印迹 | 第33-34页 |
| 2.2.4 组织芯片 | 第34页 |
| 2.2.5 免疫组化结果的评价方法 | 第34页 |
| 2.2.6 数据处理 | 第34-35页 |
| 2.3 实验结果 | 第35-50页 |
| 2.3.1 Rab3D在肿瘤细胞中表达水平 | 第35-36页 |
| 2.3.2 免疫组化中评分标准和得分情况 | 第36页 |
| 2.3.3 Rab3D在人正常组织、乳腺癌良性肿瘤和恶性肿瘤中的表达 | 第36-40页 |
| 2.3.4 Rab3D在其他常见肿瘤中的表达 | 第40-43页 |
| 2.3.5 Rab3D与乳腺癌不同恶性程度和组织分级的相关性 | 第43-49页 |
| 2.3.6 缺氧诱导Rab3D的过量表达 | 第49-50页 |
| 2.4 本章小结与讨论 | 第50-52页 |
| 第3章 Rab3D在肿瘤发展和转移中的作用 | 第52-74页 |
| 3.1 本章引言 | 第52页 |
| 3.2 实验材料和方法 | 第52-57页 |
| 3.2.1 细胞系 | 第52页 |
| 3.2.2 实验耗材和试剂 | 第52-53页 |
| 3.2.3 质粒构建 | 第53-54页 |
| 3.2.4 细胞转染和稳转细胞系的建立 | 第54-55页 |
| 3.2.5 细胞迁移实验 | 第55页 |
| 3.2.6 细胞侵袭实验 | 第55-56页 |
| 3.2.7 免疫荧光 | 第56页 |
| 3.2.8 MMP体外降解实验 | 第56页 |
| 3.2.9 小鼠肿瘤转移实验 | 第56页 |
| 3.2.10 组织切片的染色 | 第56-57页 |
| 3.2.11 细胞增殖实验 | 第57页 |
| 3.3 实验结果 | 第57-72页 |
| 3.3.1 Rab3D促进肿瘤细胞形态的变化 | 第57-60页 |
| 3.3.2 Rab3D促进肿瘤细胞的侵袭和迁移 | 第60-65页 |
| 3.3.3 Rab3D调节肿瘤细胞分泌的MMP活性 | 第65-66页 |
| 3.3.4 Rab3D促进小鼠肿瘤的肺转移 | 第66-69页 |
| 3.3.5 Rab3D与肿瘤细胞增殖之间的关系 | 第69-72页 |
| 3.4 本章小结与讨论 | 第72-74页 |
| 第4章 Rab3D促进肿瘤转移的分子机理研究 | 第74-95页 |
| 4.1 本章引言 | 第74-75页 |
| 4.2 实验材料和方法 | 第75-77页 |
| 4.2.1 细胞系 | 第75页 |
| 4.2.2 抗体 | 第75-76页 |
| 4.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫印迹 | 第76页 |
| 4.2.4 免疫組化及定量方法 | 第76-77页 |
| 4.2.5 外泌体的分离与鉴定 | 第77页 |
| 4.2.6 透射电镜 | 第77页 |
| 4.2.7 动态光散射 | 第77页 |
| 4.2.8 反转录PCR（RT-PCR） | 第77页 |
| 4.2.9 质谱分析 | 第77页 |
| 4.3 实验结果 | 第77-93页 |
| 4.3.1 Rab3D对肿瘤细胞中上皮间质转化（EMT）的影响 | 第77-79页 |
| 4.3.2 Rab3D对肿瘤组织中上皮间质转化（EMT）的影响 | 第79-82页 |
| 4.3.3 Rab3D对外泌体（exosome）释放的作用 | 第82-85页 |
| 4.3.4 Rab3D与Hsp90α 的分泌 | 第85-88页 |
| 4.3.5 Rab3D促进肿瘤侵袭迁移依赖胞外Hsp90α 的功能 | 第88-93页 |
| 4.4 本章小结与讨论 | 第93-95页 |
| 第5章 分泌型Rab3D与恶性肿瘤的相关性 | 第95-104页 |
| 5.1 本章引言 | 第95页 |
| 5.2 实验材料和方法 | 第95-96页 |
| 5.2.1 免疫电镜 | 第95页 |
| 5.2.2 Rab3D酶联免疫法（ELISA） | 第95-96页 |
| 5.2.3 热休克蛋白 90α 酶联免疫法（ELISA） | 第96页 |
| 5.3 实验结果 | 第96-102页 |
| 5.3.1 临床样本组织中Rab3D的mRNA水平 | 第96-97页 |
| 5.3.2 Rab3D分布在细胞外exosome膜上 | 第97-98页 |
| 5.3.3 分泌型Rab3D在肿瘤细胞中高表达 | 第98-100页 |
| 5.3.4 分泌型Rab3D与肿瘤恶性程度正相关 | 第100-101页 |
| 5.3.5 分泌型Rab3D与分泌型Hsp90α 的联用 | 第101-102页 |
| 5.4 本章小结与讨论 | 第102-104页 |
| 第6章 热休克蛋白 90α 的质膜转运的信号通路 | 第104-118页 |
| 6.1 本章引言 | 第104-105页 |
| 6.2 实验材料和方法 | 第105-106页 |
| 6.2.1 exosome的提取 | 第105页 |
| 6.2.2 细胞质膜提取方法 | 第105页 |
| 6.2.3 免疫荧光 | 第105-106页 |
| 6.2.4 细胞伪足形成实验 | 第106页 |
| 6.2.5 抗体和试剂 | 第106页 |
| 6.3 实验结果 | 第106-116页 |
| 6.3.1 Hsp90α 在细胞表面的分布 | 第106-107页 |
| 6.3.2 膜表面的Hsp90α 参与肿瘤细胞运动和伪足形成 | 第107-108页 |
| 6.3.3 生长因子参与细胞中Hsp90α 的质膜转运 | 第108-111页 |
| 6.3.4 胞内信号通路参与细胞中Hsp90α 的质膜转运 | 第111-115页 |
| 6.3.5 细胞中Hsp90α 的质膜转运和分泌依赖小分子GTP酶 | 第115-116页 |
| 6.4 本章小结与讨论 | 第116-118页 |
| 第7章 讨论与展望 | 第118-123页 |
| 7.1 讨论 | 第118-122页 |
| 7.2 展望 | 第122-123页 |
| 参考文献 | 第123-132页 |
| 致谢 | 第132-134页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第134页 |
