| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第10-24页 |
| 1.1 花青素生物功能及合成途径 | 第10-13页 |
| 1.1.1 花青素的功能 | 第10页 |
| 1.1.2 花青素的生物合成途径 | 第10-13页 |
| 1.2 转录因子与花青素积累 | 第13-21页 |
| 1.2.1 MYB转录因子 | 第13-15页 |
| 1.2.2 bHLH转录因子 | 第15-17页 |
| 1.2.3 WD40转录因子 | 第17-18页 |
| 1.2.4 MYB-bHLH-WD40复合体 | 第18-21页 |
| 1.3 十字花科作物中转录因子的研究进展 | 第21-24页 |
| 1.3.1 MYB类转录因子 | 第21-22页 |
| 1.3.2 HLH转录因子 | 第22-23页 |
| 1.3.3 其它转录因子 | 第23-24页 |
| 第二章 引言 | 第24-26页 |
| 2.1 研究的目的及意义 | 第24页 |
| 2.2 研究思路与技术路线 | 第24-26页 |
| 第三章 材料与方法 | 第26-35页 |
| 3.1 材料 | 第26页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 3.1.2 菌株与质粒 | 第26页 |
| 3.1.3 实验药品 | 第26页 |
| 3.2 主要溶液及培养基配方 | 第26-27页 |
| 3.2.1 主要溶液配方 | 第26页 |
| 3.2.2 主要培养基配方 | 第26-27页 |
| 3.3 主要仪器设备 | 第27页 |
| 3.4 实验引物 | 第27-28页 |
| 3.5 实验方法 | 第28-35页 |
| 3.5.1 RNA的提取方法 | 第28-29页 |
| 3.5.2 cDNA的获得 | 第29页 |
| 3.5.3 DNA酶切 | 第29页 |
| 3.5.4 DNA片段回收 | 第29-30页 |
| 3.5.5 DNA片段连接 | 第30页 |
| 3.5.6 DNA连接产物转化大肠杆菌 | 第30页 |
| 3.5.7 重组质粒的鉴定与质粒提取培养 | 第30-31页 |
| 3.5.8 烟草转化遗传 | 第31-32页 |
| 3.5.9 烟草DNA提取 | 第32-33页 |
| 3.5.10 目的基因的PCR鉴定 | 第33页 |
| 3.5.11 花青素相对含量的测定 | 第33-34页 |
| 3.5.12 目标基因的半定量表达分析 | 第34-35页 |
| 第四章 结果与分析 | 第35-61页 |
| 4.1 BoMYB2，BoTT8，BoTTG1基因的获得 | 第35-37页 |
| 4.2 目标基因序列生物信息学分析 | 第37-46页 |
| 4.2.1 BoMYB2转录因子 | 第37-40页 |
| 4.2.2 BoTT8转录因子 | 第40-42页 |
| 4.2.3 BoTTG1转录因子 | 第42-46页 |
| 4.3 载体构建 | 第46-47页 |
| 4.4 农杆菌介导转化法获得转基因烟草植株 | 第47页 |
| 4.5 转基因植株形态学及花青素积累比较 | 第47-59页 |
| 4.5.1 遗传转化过程的花青素积累比较 | 第47-49页 |
| 4.5.2 转基因植株的叶片、茎的形态学比较 | 第49-51页 |
| 4.5.3 转基因植株叶片花青素含量测定及结构基因表达分析 | 第51-54页 |
| 4.5.4 转基因植株花器官形态学特点及花青素结构基因表达分析 | 第54-56页 |
| 4.5.5 转基因植株蒴果及种子形态学特征 | 第56-57页 |
| 4.5.6 转基因植株种子萌发及幼苗形态学特征 | 第57-59页 |
| 4.6 转基因植株幼苗根系发育特点 | 第59-61页 |
| 第五章 讨论 | 第61-65页 |
| 5.1 BoMYB2是调控花青素合成的关键因子 | 第61页 |
| 5.2 BoTT8调控花器官中花青素的积累 | 第61-62页 |
| 5.3 BoTTG1超表达不影响花青素积累但促进根的生长 | 第62-63页 |
| 5.4 BoMYB2-BoTT8-Bo TTG1复合体调控花青素积累 | 第63-65页 |
| 第六章 结论 | 第65-66页 |
| 6.1 BoMYB2转录因子是调控花青素合成的关键因子 | 第65页 |
| 6.2 BoTT8转录因子特异性的调控花器官中花青素的积累 | 第65页 |
| 6.3 烟草种子胚主要受BoMYB2、BoTT8基因共同表达调控 | 第65页 |
| 6.4 BoTTG1转录因子促进根系生长而BoTT8和BoMYB2抑制根系生长 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-79页 |
| 致谢 | 第79-80页 |
| 附录 | 第80-82页 |
| 附录1 培养瓶中生长的 35SPro:MYB2TT8TTG1转基因植株 | 第80-81页 |
| 附录2 缩略词 | 第81-82页 |
| 附录3 35SPro:MYB2TT8和 35SPro:MYB2TT8TTG1胚乳颜色标记验证 | 第82页 |
