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砷通过诱导HepG2细胞线粒体自噬抑制细胞增殖的机制研究

中文摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第一章 前言第11-22页
    1.1 肝癌第11-12页
    1.2 三氧化二砷第12-14页
        1.2.1 三氧化二砷简介第12页
        1.2.2 三氧化二砷在肿瘤治疗方面的研究进展第12-14页
    1.3 线粒体第14-15页
        1.3.1 线粒体简介第14页
        1.3.2 线粒体是砷发挥细胞毒性的重要靶位点第14-15页
    1.4 线粒体自噬第15-18页
        1.4.1 自噬与线粒体自噬第15-16页
        1.4.2 PINK1-Parkin信号通路介导的线粒体自噬分子途径第16-17页
        1.4.3 线粒体自噬与细胞增殖第17-18页
    1.5 环氧合酶-2第18-20页
        1.5.1 环氧合酶-2概述第18页
        1.5.2 环氧合酶-2调控细胞增殖第18-19页
        1.5.3 环氧合酶2与线粒体自噬第19-20页
    1.6 研究目的及意义第20页
    1.7 实验技术路线第20-22页
第二章 实验材料与方法第22-39页
    2.1 实验材料第22页
    2.2 主要试剂与仪器第22-27页
        2.2.1 主要试剂第22-23页
        2.2.2 主要仪器第23-24页
        2.2.3 主要溶液配制第24-27页
    2.3 实验方法第27-38页
        2.3.1 细胞培养第27-28页
        2.3.2 细胞活力检测第28-29页
        2.3.3 细胞生长曲线检测以及绘制第29页
        2.3.4 细胞克隆形成分析第29页
        2.3.5 RNA的提取第29-31页
        2.3.6 实时定量PCR检测Ki-67及COX-2 mRNA表达量第31-33页
        2.3.7 AV/PI检测细胞凋亡第33-34页
        2.3.8 透射电镜检测细胞内线粒体自噬体的产生第34页
        2.3.9 蛋白提取及定量第34-36页
        2.3.10 蛋白免疫印迹实验第36-37页
        2.3.11 细胞免疫荧光实验第37-38页
        2.3.12 MTG/LTR双染示踪线粒体自噬体第38页
    2.4 统计学分析第38-39页
第三章 研究结果第39-53页
    3.1 As_2O_3对细胞活力的影响第39-40页
    3.2 As_2O_3对细胞增殖以及凋亡的影响第40-43页
        3.2.1 As_2O_3对细胞生长曲线的影响第40页
        3.2.2 AS_2O_3对细胞克隆形成能力的影响第40页
        3.2.3 As_2O_3对Ki-67 mRNA表达量的影响第40-42页
        3.2.4 As_2O_3对细胞凋亡的影响第42-43页
    3.3 As_2O_3对线粒体自噬的影响第43-48页
        3.3.1 As_2O_3诱导线粒体自噬体产生第43页
        3.3.2 As_2O_3诱导线粒体自噬相关蛋白PINK1蓄积第43-44页
        3.3.3 As_2O_3诱导LC3由Ⅰ型向Ⅱ型转化第44-46页
        3.3.4 As_2O_3诱导线粒体通过自噬途径降解第46-48页
    3.4 抑制线粒体自噬对细胞增殖的影响第48-49页
    3.5 COX-2介导线粒体自噬对细胞增殖的抑制作用第49-53页
        3.5.1 COX-2参与As_2O_3抑增殖作用第49-51页
        3.5.2 抑制线粒体自噬增加COX-2表达量第51-53页
第四章 讨论第53-58页
    4.1 As_2O_3对细胞增殖的影响第53页
    4.2 As_2O_3诱导线粒体自噬发生及其对细胞增殖的影响作用第53-56页
    4.3 COX-2介导As_2O_3通过线粒体自噬途径抑制细胞增殖第56-58页
第五章 结论第58-59页
    5.1 主要结论第58页
    5.2 研究展望第58-59页
附录第59-61页
    附录Ⅰ:qPCR扩增曲线、标准曲线及溶解曲线第59-60页
    附录Ⅱ:主要缩略词第60-61页
参考文献第61-69页
在学期间的研究成果第69-70页
致谢第70页

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