中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第一章 前言 | 第11-22页 |
1.1 肝癌 | 第11-12页 |
1.2 三氧化二砷 | 第12-14页 |
1.2.1 三氧化二砷简介 | 第12页 |
1.2.2 三氧化二砷在肿瘤治疗方面的研究进展 | 第12-14页 |
1.3 线粒体 | 第14-15页 |
1.3.1 线粒体简介 | 第14页 |
1.3.2 线粒体是砷发挥细胞毒性的重要靶位点 | 第14-15页 |
1.4 线粒体自噬 | 第15-18页 |
1.4.1 自噬与线粒体自噬 | 第15-16页 |
1.4.2 PINK1-Parkin信号通路介导的线粒体自噬分子途径 | 第16-17页 |
1.4.3 线粒体自噬与细胞增殖 | 第17-18页 |
1.5 环氧合酶-2 | 第18-20页 |
1.5.1 环氧合酶-2概述 | 第18页 |
1.5.2 环氧合酶-2调控细胞增殖 | 第18-19页 |
1.5.3 环氧合酶2与线粒体自噬 | 第19-20页 |
1.6 研究目的及意义 | 第20页 |
1.7 实验技术路线 | 第20-22页 |
第二章 实验材料与方法 | 第22-39页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.2 主要试剂与仪器 | 第22-27页 |
2.2.1 主要试剂 | 第22-23页 |
2.2.2 主要仪器 | 第23-24页 |
2.2.3 主要溶液配制 | 第24-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-38页 |
2.3.1 细胞培养 | 第27-28页 |
2.3.2 细胞活力检测 | 第28-29页 |
2.3.3 细胞生长曲线检测以及绘制 | 第29页 |
2.3.4 细胞克隆形成分析 | 第29页 |
2.3.5 RNA的提取 | 第29-31页 |
2.3.6 实时定量PCR检测Ki-67及COX-2 mRNA表达量 | 第31-33页 |
2.3.7 AV/PI检测细胞凋亡 | 第33-34页 |
2.3.8 透射电镜检测细胞内线粒体自噬体的产生 | 第34页 |
2.3.9 蛋白提取及定量 | 第34-36页 |
2.3.10 蛋白免疫印迹实验 | 第36-37页 |
2.3.11 细胞免疫荧光实验 | 第37-38页 |
2.3.12 MTG/LTR双染示踪线粒体自噬体 | 第38页 |
2.4 统计学分析 | 第38-39页 |
第三章 研究结果 | 第39-53页 |
3.1 As_2O_3对细胞活力的影响 | 第39-40页 |
3.2 As_2O_3对细胞增殖以及凋亡的影响 | 第40-43页 |
3.2.1 As_2O_3对细胞生长曲线的影响 | 第40页 |
3.2.2 AS_2O_3对细胞克隆形成能力的影响 | 第40页 |
3.2.3 As_2O_3对Ki-67 mRNA表达量的影响 | 第40-42页 |
3.2.4 As_2O_3对细胞凋亡的影响 | 第42-43页 |
3.3 As_2O_3对线粒体自噬的影响 | 第43-48页 |
3.3.1 As_2O_3诱导线粒体自噬体产生 | 第43页 |
3.3.2 As_2O_3诱导线粒体自噬相关蛋白PINK1蓄积 | 第43-44页 |
3.3.3 As_2O_3诱导LC3由Ⅰ型向Ⅱ型转化 | 第44-46页 |
3.3.4 As_2O_3诱导线粒体通过自噬途径降解 | 第46-48页 |
3.4 抑制线粒体自噬对细胞增殖的影响 | 第48-49页 |
3.5 COX-2介导线粒体自噬对细胞增殖的抑制作用 | 第49-53页 |
3.5.1 COX-2参与As_2O_3抑增殖作用 | 第49-51页 |
3.5.2 抑制线粒体自噬增加COX-2表达量 | 第51-53页 |
第四章 讨论 | 第53-58页 |
4.1 As_2O_3对细胞增殖的影响 | 第53页 |
4.2 As_2O_3诱导线粒体自噬发生及其对细胞增殖的影响作用 | 第53-56页 |
4.3 COX-2介导As_2O_3通过线粒体自噬途径抑制细胞增殖 | 第56-58页 |
第五章 结论 | 第58-59页 |
5.1 主要结论 | 第58页 |
5.2 研究展望 | 第58-59页 |
附录 | 第59-61页 |
附录Ⅰ:qPCR扩增曲线、标准曲线及溶解曲线 | 第59-60页 |
附录Ⅱ:主要缩略词 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-69页 |
在学期间的研究成果 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |