摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-20页 |
1.1. 家蚕及其抗病毒研究的概况 | 第11-14页 |
1.1.1. 家蚕基因组的研究 | 第11页 |
1.1.2. 家蚕抗病毒相关基因研究 | 第11-14页 |
1.2. 家蚕核型多角体病毒(Bm NPV) | 第14-16页 |
1.2.1. 杆状病毒分类 | 第14页 |
1.2.2. 杆状病毒生活史 | 第14-15页 |
1.2.3. 杆状病毒基因 | 第15-16页 |
1.3. 家蚕二分浓核病毒(BmBDV) | 第16-18页 |
1.3.1. 家蚕二分浓核病毒基因组 | 第16页 |
1.3.2. 家蚕二分浓核病毒的蛋白质组 | 第16-17页 |
1.3.3. 家蚕二分浓核病毒的复制与表达 | 第17-18页 |
1.4. 研究意义 | 第18页 |
1.5. 主要研究内容和技术路线 | 第18-20页 |
1.5.1. 主要研究内容 | 第18-19页 |
1.5.2. 技术路线 | 第19-20页 |
第二章 6个抗病毒度相关基因在家蚕抗病毒品系和易感病毒品系中的转录水平 | 第20-32页 |
2.1. 材料与试剂 | 第20-21页 |
2.1.1. 家蚕品种、桑叶和病毒 | 第20页 |
2.1.2. 试剂盒 | 第20-21页 |
2.1.3. 其他试剂 | 第21页 |
2.1.4. 实验仪器 | 第21页 |
2.2. 实验方法 | 第21-23页 |
2.2.1. 家蚕的饲养及病毒接种方法 | 第21页 |
2.2.2. RNA提取及c DNA合成 | 第21-22页 |
2.2.3. 荧光定量PCR | 第22-23页 |
2.2.4. 数据处理 | 第23页 |
2.3. 实验结果 | 第23-28页 |
2.3.1. 接种Bm BDV后家蚕体内6个基因的表达分析 | 第23-26页 |
2.3.2. 接种Bm NPV后家蚕体内6个基因的表达分析 | 第26-28页 |
2.4. 本章讨论及小结 | 第28-32页 |
第三章 car基因的原核表达、纯化、多克隆抗体制备与酶活测定 | 第32-48页 |
3.1 材料与试剂 | 第32-35页 |
3.1.1 菌种、质粒和实验小鼠 | 第32页 |
3.1.2 工具酶和试剂盒 | 第32页 |
3.1.3 其他试剂 | 第32-33页 |
3.1.4 缓冲液 | 第33-34页 |
3.1.5 培养基 | 第34页 |
3.1.6 主要仪器 | 第34-35页 |
3.2 实验方法 | 第35-42页 |
3.2.1 基因克隆 | 第35-36页 |
3.2.2 构建克隆载体和表达载体 | 第36-38页 |
3.2.3. 基因的原核表达 | 第38-40页 |
3.2.4. 蛋白质的纯化 | 第40-41页 |
3.2.5. 酶活力测定 | 第41页 |
3.2.6. 多克隆抗体制备及纯化 | 第41-42页 |
3.3. 实验结果 | 第42-47页 |
3.3.1. 基因克隆、克隆质粒构建和表达质粒构建 | 第42-43页 |
3.3.2. 目的基因的原核表达 | 第43-44页 |
3.3.3. 蛋白纯化 | 第44-45页 |
3.3.4. 酶活性测定 | 第45-46页 |
3.3.5. 抗体验证 | 第46-47页 |
3.4. 本章讨论与小结 | 第47-48页 |
第四章 car基因时相转录水平表达分析 | 第48-53页 |
4.1 材料与试剂 | 第48-49页 |
4.1.1 实验家蚕 | 第48页 |
4.1.2 试剂盒 | 第48页 |
4.1.3 其他试剂 | 第48页 |
4.1.4 实验仪器 | 第48-49页 |
4.2 实验方法 | 第49-50页 |
4.2.1 家蚕饲养及解剖 | 第49页 |
4.2.2 RNA提取及c DNA合成 | 第49页 |
4.2.3 荧光定量PCR | 第49-50页 |
4.2.4 数据分析 | 第50页 |
4.3. 实验结果 | 第50-51页 |
4.3.1. 羧酸酯酶基因在不同组织的表达分析 | 第50-51页 |
4.3.2. 羧酸酯酶基因在不同发育阶段的表达分析 | 第51页 |
4.4. 本章讨论及小结 | 第51-53页 |
第五章 总结与展望 | 第53-55页 |
5.1 总结 | 第53-54页 |
5.2 展望 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
在学期间发表的学术论文 | 第62-63页 |
参与的主要课题 | 第63页 |