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重组猪生长素基因工程菌培养基优化及高密度液体发酵研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-10页
英文缩写词表(ABBREVIATIONS)第10-12页
第1章 绪论第12-28页
   ·我国在生长素(growth hormone GH)方面的研究进展第12页
   ·猪生长激素(pGH)基因的结构特点、定位及遗传连锁分析第12-13页
   ·pGH 基因的作用机理及表达调控第13-14页
   ·猪生长激素的生理功能第14-16页
     ·pGH 对类胰岛素生长因子Ⅰ(Insulin-like growth factors IGF-Ⅰ)、类胰岛素生长因子Ⅱ(Insulin-like growth factors IGF-Ⅱ)和胰岛素分泌及葡萄糖浓度的影响第14页
     ·pGH 对蛋白质合成的影响第14-15页
     ·pGH 对脂肪合成的影响第15页
     ·pGH 对矿物代谢的影响第15页
     ·猪生长激素的分泌规律第15-16页
   ·猪生长激素抗体及其与猪生长激素的相互作用第16-17页
   ·pGH 最新应用研究第17页
     ·利用pGH 的皮下控释给药技术进行研究第17页
     ·利用脂质体包被技术进行研究第17页
   ·pGH 的社会及经济意义第17-19页
   ·毕赤酵母中基因的表达第19-26页
     ·大肠杆菌中基因表达的限制及毕赤酵母表达系统的优点第19-20页
     ·影响目的基因在毕赤酵母中表达的因素第20页
     ·毕赤酵母表达系统的特点第20-21页
     ·毕赤酵母及载体第21-23页
     ·毕赤酵母表达菌的生长特性第23-24页
     ·培养条件对毕赤酵母工程菌外源基因高密度发酵表达的影响第24-26页
   ·本研究的背景和拟研究的主要内容第26-28页
第2章 猪生长素毕赤酵母基因工程菌高产菌株筛选、发酵罐液体发酵及喂饲实验第28-41页
   ·材料第28-32页
     ·菌种第28页
     ·喂饲实验材料第28页
     ·主要试剂药品第28页
     ·主要仪器设备第28-29页
     ·培养基第29-30页
     ·主要试剂配方第30-32页
   ·方法第32-37页
     ·生物量测定第32页
     ·蛋白质浓度测定第32页
     ·猪生长素基因工程酵母菌高产菌株的筛选第32-35页
       ·猪生长素基因工程酵母菌高产菌株的PCR 鉴定第33-34页
       ·猪生长素基因工程酵母菌高产菌株SDS-PAGE 筛选第34-35页
     ·猪生长素基因工程酵母菌高产菌株发酵罐发酵第35-36页
     ·pGH 喂饲实验第36-37页
   ·结果第37-39页
     ·猪生长素基因工程酵母菌高产菌株的PCR 鉴定第37页
     ·猪生长素基因工程酵母菌高产菌株的SDS-PAGE 筛选第37-38页
     ·pGH 喂饲实验第38-39页
   ·讨论第39页
   ·本章小结第39-41页
第3章 毕赤酵母工程菌培养基优化及摇瓶发酵条件探索第41-57页
   ·材料第41页
     ·菌株第41页
     ·主要仪器第41页
     ·主要试剂配方第41页
   ·方法第41-46页
     ·培养基配置原则第41-42页
     ·毕赤酵母工程菌培养基C 源-马铃薯渣酸水解第42-44页
       ·酸浓度对马铃薯渣水解上清总还原糖重量的影响第43页
       ·酸固比对马铃薯渣水解上清总还原糖重量的影响第43页
       ·水解时间对马铃薯渣水解上清总还原糖重量的影响第43页
       ·水解温度对马铃薯渣水解上清总还原糖重量的影响第43-44页
       ·正交试验确定马铃薯渣最佳水解条件第44页
     ·毕赤酵母工程菌培养基N 源-豆渣碱水解第44页
     ·毕赤酵母工程菌pPGHA-01 培养基优化配比第44-45页
     ·pPGHA-01 工程菌马铃薯渣-豆渣培养基摇瓶发酵条件探索第45-46页
       ·培养基初始pH 值对蛋白总产量的影响第45页
       ·接种量对蛋白总产量的影响第45页
       ·发酵温度对蛋白总产量的影响第45页
       ·培养基装液量对蛋白总产量的影响第45-46页
       ·诱导时间对蛋白总产量的影响第46页
       ·毕赤酵母工程菌pPGHA-01 在种子培养基BMGY 中生长曲线第46页
     ·pPGHA-01 工程菌马铃薯渣豆渣培养基摇瓶发酵验证第46页
   ·结果与讨论第46-55页
     ·毕赤酵母工程菌培养基C 源-马铃薯渣酸水解结果与分析第46-50页
       ·酸浓度对马铃薯渣水解上清总还原糖重量的影响第46-47页
       ·酸固比对马铃薯渣水解上清总还原糖重量的影响第47-50页
     ·毕赤酵母工程菌培养基N 源-豆渣碱水解第50页
     ·毕赤酵母工程菌pPGHA-01 培养基优化第50-51页
     ·毕赤酵母工程菌pPGHA-01 马铃薯渣豆渣摇瓶发酵条件探索第51-55页
       ·培养基初始pH 值对蛋白总产量的影响第51-52页
       ·接种量对蛋白总产量的影响第52-53页
       ·发酵温度对蛋白总产量的影响第53页
       ·培养基装液量对蛋白总产量的影响第53-54页
       ·诱导时间对蛋白总产量的影响第54页
       ·毕赤酵母工程菌pPGHA-01 在种子培养基BMGY 中生长曲线第54-55页
       ·pPGHA-01 工程菌马铃薯渣-豆渣培养基摇瓶发酵验证第55页
       ·马铃薯渣-豆渣培养基成本核算第55页
   ·本章讨论与小结第55-57页
主要结论第57-58页
不足与展望第58-59页
参考文献第59-63页
致谢第63-64页
附录A:攻读学位期间所发表的学术论文及成果第64-65页
附录B:合成的猪生长素cDNA 序列第65-66页

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