摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
英文缩写词表(ABBREVIATIONS) | 第10-12页 |
第1章 绪论 | 第12-28页 |
·我国在生长素(growth hormone GH)方面的研究进展 | 第12页 |
·猪生长激素(pGH)基因的结构特点、定位及遗传连锁分析 | 第12-13页 |
·pGH 基因的作用机理及表达调控 | 第13-14页 |
·猪生长激素的生理功能 | 第14-16页 |
·pGH 对类胰岛素生长因子Ⅰ(Insulin-like growth factors IGF-Ⅰ)、类胰岛素生长因子Ⅱ(Insulin-like growth factors IGF-Ⅱ)和胰岛素分泌及葡萄糖浓度的影响 | 第14页 |
·pGH 对蛋白质合成的影响 | 第14-15页 |
·pGH 对脂肪合成的影响 | 第15页 |
·pGH 对矿物代谢的影响 | 第15页 |
·猪生长激素的分泌规律 | 第15-16页 |
·猪生长激素抗体及其与猪生长激素的相互作用 | 第16-17页 |
·pGH 最新应用研究 | 第17页 |
·利用pGH 的皮下控释给药技术进行研究 | 第17页 |
·利用脂质体包被技术进行研究 | 第17页 |
·pGH 的社会及经济意义 | 第17-19页 |
·毕赤酵母中基因的表达 | 第19-26页 |
·大肠杆菌中基因表达的限制及毕赤酵母表达系统的优点 | 第19-20页 |
·影响目的基因在毕赤酵母中表达的因素 | 第20页 |
·毕赤酵母表达系统的特点 | 第20-21页 |
·毕赤酵母及载体 | 第21-23页 |
·毕赤酵母表达菌的生长特性 | 第23-24页 |
·培养条件对毕赤酵母工程菌外源基因高密度发酵表达的影响 | 第24-26页 |
·本研究的背景和拟研究的主要内容 | 第26-28页 |
第2章 猪生长素毕赤酵母基因工程菌高产菌株筛选、发酵罐液体发酵及喂饲实验 | 第28-41页 |
·材料 | 第28-32页 |
·菌种 | 第28页 |
·喂饲实验材料 | 第28页 |
·主要试剂药品 | 第28页 |
·主要仪器设备 | 第28-29页 |
·培养基 | 第29-30页 |
·主要试剂配方 | 第30-32页 |
·方法 | 第32-37页 |
·生物量测定 | 第32页 |
·蛋白质浓度测定 | 第32页 |
·猪生长素基因工程酵母菌高产菌株的筛选 | 第32-35页 |
·猪生长素基因工程酵母菌高产菌株的PCR 鉴定 | 第33-34页 |
·猪生长素基因工程酵母菌高产菌株SDS-PAGE 筛选 | 第34-35页 |
·猪生长素基因工程酵母菌高产菌株发酵罐发酵 | 第35-36页 |
·pGH 喂饲实验 | 第36-37页 |
·结果 | 第37-39页 |
·猪生长素基因工程酵母菌高产菌株的PCR 鉴定 | 第37页 |
·猪生长素基因工程酵母菌高产菌株的SDS-PAGE 筛选 | 第37-38页 |
·pGH 喂饲实验 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39页 |
·本章小结 | 第39-41页 |
第3章 毕赤酵母工程菌培养基优化及摇瓶发酵条件探索 | 第41-57页 |
·材料 | 第41页 |
·菌株 | 第41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·主要试剂配方 | 第41页 |
·方法 | 第41-46页 |
·培养基配置原则 | 第41-42页 |
·毕赤酵母工程菌培养基C 源-马铃薯渣酸水解 | 第42-44页 |
·酸浓度对马铃薯渣水解上清总还原糖重量的影响 | 第43页 |
·酸固比对马铃薯渣水解上清总还原糖重量的影响 | 第43页 |
·水解时间对马铃薯渣水解上清总还原糖重量的影响 | 第43页 |
·水解温度对马铃薯渣水解上清总还原糖重量的影响 | 第43-44页 |
·正交试验确定马铃薯渣最佳水解条件 | 第44页 |
·毕赤酵母工程菌培养基N 源-豆渣碱水解 | 第44页 |
·毕赤酵母工程菌pPGHA-01 培养基优化配比 | 第44-45页 |
·pPGHA-01 工程菌马铃薯渣-豆渣培养基摇瓶发酵条件探索 | 第45-46页 |
·培养基初始pH 值对蛋白总产量的影响 | 第45页 |
·接种量对蛋白总产量的影响 | 第45页 |
·发酵温度对蛋白总产量的影响 | 第45页 |
·培养基装液量对蛋白总产量的影响 | 第45-46页 |
·诱导时间对蛋白总产量的影响 | 第46页 |
·毕赤酵母工程菌pPGHA-01 在种子培养基BMGY 中生长曲线 | 第46页 |
·pPGHA-01 工程菌马铃薯渣豆渣培养基摇瓶发酵验证 | 第46页 |
·结果与讨论 | 第46-55页 |
·毕赤酵母工程菌培养基C 源-马铃薯渣酸水解结果与分析 | 第46-50页 |
·酸浓度对马铃薯渣水解上清总还原糖重量的影响 | 第46-47页 |
·酸固比对马铃薯渣水解上清总还原糖重量的影响 | 第47-50页 |
·毕赤酵母工程菌培养基N 源-豆渣碱水解 | 第50页 |
·毕赤酵母工程菌pPGHA-01 培养基优化 | 第50-51页 |
·毕赤酵母工程菌pPGHA-01 马铃薯渣豆渣摇瓶发酵条件探索 | 第51-55页 |
·培养基初始pH 值对蛋白总产量的影响 | 第51-52页 |
·接种量对蛋白总产量的影响 | 第52-53页 |
·发酵温度对蛋白总产量的影响 | 第53页 |
·培养基装液量对蛋白总产量的影响 | 第53-54页 |
·诱导时间对蛋白总产量的影响 | 第54页 |
·毕赤酵母工程菌pPGHA-01 在种子培养基BMGY 中生长曲线 | 第54-55页 |
·pPGHA-01 工程菌马铃薯渣-豆渣培养基摇瓶发酵验证 | 第55页 |
·马铃薯渣-豆渣培养基成本核算 | 第55页 |
·本章讨论与小结 | 第55-57页 |
主要结论 | 第57-58页 |
不足与展望 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
附录A:攻读学位期间所发表的学术论文及成果 | 第64-65页 |
附录B:合成的猪生长素cDNA 序列 | 第65-66页 |