| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-20页 |
| 1.1 无脊椎动物先天免疫系统 | 第9-11页 |
| 1.1.1 细胞免疫 | 第9页 |
| 1.1.2 体液免疫 | 第9-11页 |
| 1.2 免疫识别 | 第11-12页 |
| 1.2.1 病原相关分子模式(PAMPs) | 第11页 |
| 1.2.2 模式识别受体(Pattern recognition receptors,PRRs) | 第11-12页 |
| 1.3 补体系统 | 第12-14页 |
| 1.3.1 经典途径(classical pathway) | 第13页 |
| 1.3.2 旁路途径(alternative pathway) | 第13页 |
| 1.3.3 甘露糖结合凝集素途径(mannose-binding lectin pathway) | 第13-14页 |
| 1.4 贝类免疫防御机制 | 第14-17页 |
| 1.4.1 贝类细胞免疫防御机制 | 第15-16页 |
| 1.4.2 贝类体液免疫防御机制 | 第16-17页 |
| 1.5 国内外研究现状 | 第17-18页 |
| 1.6 本课题的研究内容、意义及技术路线 | 第18-20页 |
| 1.6.1 研究内容 | 第18页 |
| 1.6.2 研究意义 | 第18-19页 |
| 1.6.3 技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 三角帆蚌C-型凝集素在先天免疫中的功能研究 | 第20-45页 |
| 2.1 引言 | 第20页 |
| 2.2 材料和方法 | 第20-33页 |
| 2.2.1 实验动物及菌株 | 第20-21页 |
| 2.2.2 试剂和仪器 | 第21页 |
| 2.2.3 三角帆蚌的免疫刺激 | 第21-22页 |
| 2.2.4 RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.5 cDNA模板的合成 | 第23-24页 |
| 2.2.6 三角帆蚌HcLec4基因的扩增 | 第24-25页 |
| 2.2.7 序列分析 | 第25页 |
| 2.2.8 四个CRD结构域的原核重组表达载体构建 | 第25-27页 |
| 2.2.9 四个CRD结构域原核重组蛋白表达及纯化 | 第27-30页 |
| 2.2.10 实时定量PCR(qRT-PCR)分析HcLec4的组织分布 | 第30页 |
| 2.2.11 HcLec4在mRNA水平上的表达模式分析 | 第30页 |
| 2.2.12 细菌结合实验 | 第30-31页 |
| 2.2.13 蛋白与糖的直接结合实验 | 第31-32页 |
| 2.2.14 RNA干扰实验 | 第32页 |
| 2.2.15 体内细菌清除实验 | 第32-33页 |
| 2.2.16 干扰后检测效应基因的表达 | 第33页 |
| 2.3 实验结果 | 第33-43页 |
| 2.3.1 HcLec4序列分析 | 第33-37页 |
| 2.3.2 HcLec4组织分布及表达模式 | 第37-39页 |
| 2.3.3 HcLec4的4个CRD结构域原核重组蛋白的表达和纯化 | 第39-40页 |
| 2.3.4 四个CRD结构域蛋白的细菌结合实验与糖结合实验 | 第40-41页 |
| 2.3.5 HcLec4基因沉默后对细菌清除和抗菌肽表达的影响 | 第41-43页 |
| 2.4 讨论 | 第43-45页 |
| 第三章 三角帆蚌C1qDC蛋白在先天免疫中的功能研究 | 第45-57页 |
| 3.1 引言 | 第45页 |
| 3.2 材料和方法 | 第45-48页 |
| 3.2.1 实验动物和菌株 | 第45-46页 |
| 3.2.2 三角帆蚌的免疫刺激、总RNA的提取和cDNA的合成 | 第46页 |
| 3.2.3 三角帆蚌四个HcC1qDC基因的克隆 | 第46页 |
| 3.2.4 序列分析 | 第46页 |
| 3.2.5 三角帆蚌四个HcC1qDC原核重组表达载体构建 | 第46-47页 |
| 3.2.6 四个HcC1qDC原核重组蛋白的表达及纯化 | 第47页 |
| 3.2.7 提取基因组DNA和扩增HcC1qDC2和HcC1qDC3的内含子 | 第47页 |
| 3.2.8 RT-PCR和qRT-PCR实验 | 第47-48页 |
| 3.2.9 重组蛋白与微生物的结合 | 第48页 |
| 3.3 结果 | 第48-55页 |
| 3.3.1 基因克隆和四个HcC1qDC基因的序列分析 | 第48-49页 |
| 3.3.2 多序列比对和进化分析 | 第49-52页 |
| 3.3.3 HcC1qDC2和HcC1qDC3基因组 | 第52页 |
| 3.3.4 四个HcC1qDC基因的组织分布和表达模式 | 第52-53页 |
| 3.3.5 四个HcC1qDC原核重组蛋白的表达与纯化 | 第53-54页 |
| 3.3.6 分析四个HcC1qDC蛋白的细菌结合活性 | 第54-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-71页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
