| 摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 第1章 绪论 | 第17-28页 |
| 1.1 心血管疾病 | 第17-18页 |
| 1.2 动脉粥样硬化 | 第18页 |
| 1.3 血管内皮细胞与动脉粥样硬化 | 第18-20页 |
| 1.4 氧化型低密度脂蛋白与心血管疾病 | 第20-21页 |
| 1.5 BAMBI基因 | 第21-25页 |
| 1.5.1 BAMBI基因概述 | 第21页 |
| 1.5.2 BAMBI蛋白结构 | 第21-22页 |
| 1.5.3 BAMBI的生物学功能 | 第22-23页 |
| 1.5.4 TGF-β/Smad通路 | 第23-24页 |
| 1.5.5 TLR4/NF-κB通路 | 第24-25页 |
| 1.6 miRNA的研究进展 | 第25-27页 |
| 1.6.1 miRNA的调控机制 | 第25-26页 |
| 1.6.2 miRNA与心血管疾病 | 第26-27页 |
| 1.6.3 miRNA的鉴定和靶基因预测 | 第27页 |
| 1.7 小结与展望 | 第27-28页 |
| 第2章 BAMBI在ox-LDL诱导的内皮细胞损伤中的作用 | 第28-55页 |
| 2.1 引言 | 第28-29页 |
| 2.2 实验材料 | 第29-34页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.2.2 实验材料及试剂 | 第30-31页 |
| 2.2.3 抗体 | 第31页 |
| 2.2.4 主要溶液配制 | 第31-34页 |
| 2.3 实验方法 | 第34-40页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第34-35页 |
| 2.3.2 细胞转染及药物处理 | 第35页 |
| 2.3.3 细胞分组 | 第35页 |
| 2.3.4 RNA抽提 | 第35-36页 |
| 2.3.5 RNA逆转录 | 第36页 |
| 2.3.6 实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
| 2.3.7 蛋白抽提及定量 | 第37-38页 |
| 2.3.8 Western blot检测 | 第38-39页 |
| 2.3.9 MTT检测 | 第39页 |
| 2.3.10 流式细胞仪检测 | 第39页 |
| 2.3.11 ROS含量测定 | 第39页 |
| 2.3.12 SOD及MDA含量测定 | 第39页 |
| 2.3.13 Nitrite及cGMP含量测定 | 第39-40页 |
| 2.3.14 统计方法 | 第40页 |
| 2.4 实验结果 | 第40-49页 |
| 2.4.1 BAMBI在ox-LDL诱导的HUVECs中表达下调 | 第40-41页 |
| 2.4.2 BAMBI影响ox-LDL诱导的HUVECs细胞增殖 | 第41-42页 |
| 2.4.3 BAMBI影响ox-LDL诱导的HUVECs细胞凋亡 | 第42页 |
| 2.4.4 BAMBI影响ox-LDL诱导的HUVECs中凋亡蛋白的表达 | 第42-44页 |
| 2.4.5 BAMBI影响ox-LDL诱导的HUVECs中炎症因子的水平 | 第44-45页 |
| 2.4.6 BAMBI影响ox-LDL诱导的HUVECs中粘附因子的表达 | 第45-47页 |
| 2.4.7 BAMBI影响ox-LDL诱导的HUVECs中氧化应激的水平 | 第47页 |
| 2.4.8 BAMBI影响ox-LDL诱导的HUVECs中NO和eNOS产生 | 第47-49页 |
| 2.5 讨论 | 第49-53页 |
| 2.6 结论 | 第53-55页 |
| 第3章 BAMBI通过调控TGF-β/Smad通路发挥生物学作用 | 第55-74页 |
| 3.1 引言 | 第55-56页 |
| 3.2 实验材料 | 第56-58页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第56页 |
| 3.2.2 实验材料及试剂 | 第56-57页 |
| 3.2.3 抗体 | 第57-58页 |
| 3.2.4 溶液配制 | 第58页 |
| 3.3 实验方法 | 第58-60页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第58页 |
| 3.3.2 细胞转染及药物处理 | 第58页 |
| 3.3.3 细胞分组 | 第58-59页 |
| 3.3.4 Western blot检测 | 第59页 |
| 3.3.5 MTT检测 | 第59页 |
| 3.3.6 流式细胞仪检测 | 第59页 |
| 3.3.7 ROS含量测定 | 第59页 |
| 3.3.8 SOD及MDA含量测定 | 第59-60页 |
| 3.3.9 Nitrite及cGMP含量测定 | 第60页 |
| 3.3.10 统计方法 | 第60页 |
| 3.4 实验结果 | 第60-71页 |
| 3.4.1 TGF-β/Smad通路蛋白在ox-LDL诱导的HUVECs中的表达 | 第60-61页 |
| 3.4.2 BAMBI通过调节TGF-β影响ox-LDL诱导的HUVECs细胞增殖 | 第61-62页 |
| 3.4.3 BAMBI通过调节TGF-β影响ox-LDL诱导的HUVECs细胞凋亡 | 第62-63页 |
| 3.4.4 BAMBI通过调节TGF-β影响ox-LDL诱导的HUVECs中凋亡蛋白的表达 | 第63-65页 |
| 3.4.5 BAMBI通过调节TGF-β影响ox-LDL诱导的HUVECs中炎症因子的水平 | 第65-67页 |
| 3.4.6 BAMBI通过调节TGF-β影响ox-LDL诱导的HUVECs中粘附因子的表达 | 第67-69页 |
| 3.4.7 BAMBI通过调节TGF-β影响ox-LDL诱导的HUVECs中氧化应激的水平 | 第69-70页 |
| 3.4.8 BAMBI通过调节TGF-β影响ox-LDL诱导的HUVECs中eNOS/NO的表达 | 第70-71页 |
| 3.5 讨论 | 第71-73页 |
| 3.6 结论 | 第73-74页 |
| 第4章 ox-LDL/TLR4/NF-κB信号通路调控BAMBI/TGF-β通路 | 第74-100页 |
| 4.1 引言 | 第74-75页 |
| 4.2 实验材料 | 第75-77页 |
| 4.2.1 实验仪器 | 第75页 |
| 4.2.2 实验材料及试剂 | 第75-76页 |
| 4.2.3 抗体 | 第76-77页 |
| 4.2.4 溶液配制 | 第77页 |
| 4.3 实验方法 | 第77-80页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第77页 |
| 4.3.2 细胞转染及药物处理 | 第77-78页 |
| 4.3.3 细胞分组 | 第78页 |
| 4.3.4 Western blot检测 | 第78页 |
| 4.3.5 实时荧光定量PCR | 第78-79页 |
| 4.3.6 MTT检测 | 第79页 |
| 4.3.7 流式细胞仪检测 | 第79页 |
| 4.3.8 ROS含量测定 | 第79页 |
| 4.3.9 SOD及MDA含量测定 | 第79页 |
| 4.3.10 Nitrite及cGMP含量测定 | 第79页 |
| 4.3.11 统计方法 | 第79-80页 |
| 4.4 实验结果 | 第80-94页 |
| 4.4.1 TLR4/MyD88/NF-κB通路蛋白在ox-LDL诱导的HUVECs中的表达 | 第80-81页 |
| 4.4.2 抑制TLR4/NF-κB信号通路对BAMBI表达的影响 | 第81-82页 |
| 4.4.3 抑制TLR4/NF-κB信号通路对过表达或干扰BAMBI表达的影响 | 第82-83页 |
| 4.4.4 TLR4/NF-κB信号通路调控BAMBI介导的TGF/Smad信号通路 | 第83-84页 |
| 4.4.5 TLR4/NF-κB信号通路通过调控BAMBI影响ox-LDL诱导的HUVECs增殖 | 第84-86页 |
| 4.4.6 TLR4/NF-κB信号通路通过调控BAMBI影响ox-LDL诱导的HUVECs凋亡 | 第86-87页 |
| 4.4.7 TLR4/NF-κB信号通路通过调控BAMBI影响凋亡相关蛋白的表达 | 第87-89页 |
| 4.4.8 TLR4/NF-κB信号通路通过调控BAMBI影响炎性因子的表达 | 第89-91页 |
| 4.4.9 TLR4/NF-κB信号通路通过调控BAMBI影响黏附分子的表达 | 第91-92页 |
| 4.4.10 TLR4/NF-κB信号通路通过调控BAMBI影响ox-LDL诱导的氧化应激 | 第92-93页 |
| 4.4.11 TLR4/NF-κB信号通路通过调控BAMBI影响ox-LDL诱导eNOS和NO 产生 | 第93-94页 |
| 4.5 讨论 | 第94-98页 |
| 4.6 结论 | 第98-100页 |
| 第5章 miR-373调控ox-LDL诱导的HUVECs中BAMBI表达 | 第100-124页 |
| 5.1 引言 | 第100-101页 |
| 5.2 实验材料 | 第101-103页 |
| 5.2.1 实验仪器 | 第101页 |
| 5.2.2 实验材料及试剂 | 第101-102页 |
| 5.2.3 抗体 | 第102-103页 |
| 5.2.4 溶液配制 | 第103页 |
| 5.3 实验方法 | 第103-106页 |
| 5.3.1 细胞培养 | 第103页 |
| 5.3.2 细胞转染及药物处理 | 第103页 |
| 5.3.3 细胞分组 | 第103-104页 |
| 5.3.4 荧光素酶活性实验 | 第104页 |
| 5.3.5 实时荧光定量PCR | 第104页 |
| 5.3.6 Western blot检测 | 第104-105页 |
| 5.3.7 MTT检测 | 第105页 |
| 5.3.8 流式细胞仪检测 | 第105页 |
| 5.3.9 ROS含量测定 | 第105页 |
| 5.3.10 SOD及MDA含量测定 | 第105页 |
| 5.3.11 Nitrite及cGMP含量测定 | 第105页 |
| 5.3.12 统计方法 | 第105-106页 |
| 5.4 实验结果 | 第106-118页 |
| 5.4.1 miR-373靶向调控BAMBI | 第106-107页 |
| 5.4.2 miR-373对BAMBI表达的影响 | 第107-108页 |
| 5.4.3 miR-373对过表达或抑制BAMBI表达的影响 | 第108-109页 |
| 5.4.4 miR-373对BAMBI介导的TGF-β/Smad信号通路的影响 | 第109-110页 |
| 5.4.5 miR-373通过调控BAMBI影响ox-LDL诱导的细胞增殖 | 第110-111页 |
| 5.4.6 miR-373通过调控BAMBI影响ox-LDL诱导的细胞凋亡 | 第111-112页 |
| 5.4.7 miR-373通过调控BAMBI影响凋亡相关蛋白的表达 | 第112-114页 |
| 5.4.8 miR-373通过调控BAMBI影响炎性因子的表达 | 第114-115页 |
| 5.4.9 miR-373通过调控BAMBI影响粘附分子的表达 | 第115-116页 |
| 5.4.10 miR-373通过调控BAMBI影响ox-LDL诱导的氧化应激 | 第116-117页 |
| 5.4.11 miR-373通过调控BAMBI影响ox-LDL诱导的NO和eNOS产生 | 第117-118页 |
| 5.5 讨论 | 第118-123页 |
| 5.6 结论 | 第123-124页 |
| 第6章 结论与展望 | 第124-127页 |
| 6.1 结论 | 第124-125页 |
| 6.2 展望 | 第125-127页 |
| 参考文献 | 第127-142页 |
| 中英文对照缩略词表 | 第142-143页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第143-144页 |
| 致谢 | 第144-145页 |
